基因突變和誘變育種-資料下載頁
2025-05-12 23:26本頁面
【正文】 型 第四步，鑒定缺陷型 淘汰野生型 : ? 有沒有選擇性培養(yǎng)基：野生型不生長，缺陷型生長 ? MM 野生型生長，缺陷型不生長 ? 孢子 → → → 菌絲體 過濾、離心 青霉素法 (細(xì)菌） ? MM+青霉素 ? 誘變菌懸液 →→→ →→野生型生長 →→→死亡 缺陷型生長 →→ 幸存 ↓ CM ? ↓ ? 結(jié)果：無菌生長 第三步，檢出缺陷型 夾層培養(yǎng)法 （ layer plating method） 限量補(bǔ)充培養(yǎng)法 逐個(gè)檢出法 影印平板法 ? 逐個(gè)檢出法 影印平板法 第四步，鑒定缺陷型 借助 生長譜法 （ auxanography） 進(jìn)行。 1. 營養(yǎng)缺陷型 （ auxotroph） 某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而 喪失 合成一種或幾種生長因子、堿基或氨基酸的能力， 只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些 營養(yǎng)或其前體物 （ precursor）才能 正常生長繁殖的變異類型，稱為 營養(yǎng)缺陷型 。 營養(yǎng)缺陷型突變株 在遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳育種 和遺傳工程等研究中 —— 十分重要 表型判斷的標(biāo)準(zhǔn)： 在基本培養(yǎng)基上能否生長 營養(yǎng)缺陷型的表示方法： 基因型： 所需營養(yǎng)物的前三個(gè)英文 小寫斜體字母 表示： hisC （組氨酸缺陷型，其中的大寫字母 C同一表型中不同基因的突變） 表型： 同上，但 第一個(gè)字母大寫 ，且不用斜體： HisC hisC－ 缺陷型 hisC＋ 野生型 2. 抗性突變型 （ resistant mutant） 指野生型菌株因發(fā)生基因突變， 使菌株對 對某化學(xué)藥物或致死物理因子 ，特別是抗生素，產(chǎn)生抗性 的抗性變異類型 。 特 點(diǎn)： 正選擇標(biāo)記 （突變株可直接從抗性平板上獲得 —— 在加有相應(yīng)抗生素的平板上，只有抗性突變能生長。所以很容易分離得到。 ） 表示方法： 所抗藥物的 前三個(gè)小寫斜體英文字母 加上 “ r”表示。 strr 對鏈霉素的 抗性 strs 對鏈霉素的 敏感性 抗性突變菌株 在遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳育種 和遺傳工程等研究中 —— 極為重要 3. 條件致死突變型 （ conditional lethal mutant） 某菌株或病毒經(jīng)基因突變后，在某種條件下可 正常 地生長、繁殖并呈現(xiàn)其固有的表型，而在另一種條件下卻 無法 生長、繁殖，這種突變類型稱為 條件致死突變型 。 在 25℃ 下可感染其 E. coli宿主 在 37℃ 卻不能感染 Ts突變株 即 溫度敏感突變株 （ temperature sensitive mutant， Ts mutant） 是一類典型的條件致死突變株。 E. coli的某些菌株 在 37℃ 下正常生長 不能在 42℃ 下生長 某些 T4噬菌體突變株 產(chǎn)生 Ts突變的原因 在某特定的溫度下具有功能 在另一溫度（一般為較高溫度）下則無功能 突變使某些重要蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變， 4. 形態(tài)突變型 （ morphological mutant） 指由于突變而引起的個(gè)體或菌落形態(tài)的 非選擇性變異 。 個(gè)體變異 孢子有無、孢子顏色、 鞭毛有無或莢膜有無等的突變 菌落變異 菌落表面光滑、粗糙、 噬菌斑的大小或清晰度等的突變 特點(diǎn)： 非選擇性突變 突變株和野生型菌株均可生長，但可從形態(tài)特征上進(jìn)行區(qū)分。 舉例： 菌落顏色變化 β半乳糖苷酶基因的插入失活 重組子菌落 白色 非重組子菌落 蘭色 5. 抗原突變型 （ antigenic mutant） 指由于基因突變引起的細(xì)胞抗原結(jié)構(gòu)發(fā)生的變異類型，一般也屬 非選擇性突變 。 例如， 細(xì)胞壁缺陷變異（ L型細(xì)菌等）、 莢膜或鞭毛成分變異等。 6. 產(chǎn)量突變型 （ metabolite quantitative mutant） 通過基因突變而產(chǎn)生的在代謝產(chǎn)物產(chǎn)量上明顯有別于原始菌株的突變株，稱為 產(chǎn)量突變型 。 “ 正變株 ” （ plusmutant） 產(chǎn)量 高于 原始菌株 “ 負(fù)變株 ” （ minusmutant） 產(chǎn)量 低于 原始菌株 篩選高產(chǎn)正變株的工作對生產(chǎn)實(shí)踐極其重要 在育種實(shí)踐上 誘變育種 重組育種 遺傳工程育種 平板法的優(yōu)點(diǎn)： 快速簡便，工作量小，結(jié)果直觀性強(qiáng)（例如可用上述變色圈、透明圈、抑制圈、生長圈或沉淀圈等方法測定某代謝產(chǎn)物的量）； 平板法的缺點(diǎn)： 在培養(yǎng)皿平板上固態(tài)培養(yǎng)的結(jié)果不一定能反映搖瓶培養(yǎng)或發(fā)酵罐中液體培養(yǎng)的結(jié)果。 back1
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