全內(nèi)反射熒光顯微鏡介紹-資料下載頁(yè)
2025-05-03 18:43本頁(yè)面
【正文】 LSM）雙光子激光掃描顯微鏡（ TPLSM）全內(nèi)反射熒光顯微鏡（ TIRFM）共同點(diǎn) 檢測(cè)細(xì)胞熒光物質(zhì)的技術(shù) —— 空間分辨熒光分析技術(shù)區(qū)別點(diǎn) CLSM提供了僅從單光學(xué)薄層收集光波的可能性。與聚焦平面共軛的針孔定位（即共焦）可避免來(lái)自檢測(cè)器之外的光，即從聚焦平面以外的其它地方反射 /發(fā)射過(guò)來(lái)的光。 不要求高于衍射極限的分辨率 TPLSM對(duì)生物系統(tǒng)和體內(nèi)細(xì)胞性質(zhì)具有高的分辨率。 雙光子激發(fā) 能 探索活細(xì)胞內(nèi)各種分子的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)，能實(shí)現(xiàn)在樣品中的高度精確定位。 減少了光損傷，特別對(duì)需要條件溫和的生物體系有利TIRFM具有高度的界面（表面）特異性，可有效排除本體干擾，獲取界面信息。 縱向分辨力極高，特別適用于表面或界面單分子的測(cè)定。 全內(nèi)反射熒光法相對(duì)簡(jiǎn)單，費(fèi)用低廉 。 表面或界面單分子的測(cè)定展望前景l(fā) 不論是對(duì)物理成像學(xué)家還是對(duì)細(xì)胞生物學(xué)家而言，全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)均是一項(xiàng)新的技術(shù)。它的未來(lái)發(fā)展將是怎樣的呢？l 它將向著兩個(gè)前沿方向發(fā)展：技術(shù)上的進(jìn)一步創(chuàng)新和在新的細(xì)胞生命科學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。這意味著在一方面全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)將繼續(xù)和其它的顯微成像技術(shù)，如熒光相關(guān)光譜技術(shù)，熒光壽命成像技術(shù)以及原子力顯微術(shù)相結(jié)合；另一方面，繼續(xù)尋求成像原理上的突破，這也正是目前有待積極探索的課題。全內(nèi)反射熒光顯微鏡的改進(jìn)1. 光電探測(cè)設(shè)備探測(cè)效率和探測(cè)速度的提高l 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入2. 單分子染色技術(shù)的發(fā)展新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 超高的信噪比，能夠得到完美的圖像l 嶄新的 UIS2物鏡的信噪比優(yōu)越，高于現(xiàn)有物鏡50%。這種物鏡的新特性還包括精選了低自發(fā)熒光玻璃（通過(guò)全反射鍍膜和連接材料，顯著減少了自發(fā)熒光），提高了數(shù)值孔徑，增強(qiáng)了信號(hào)亮度。 UIS2系統(tǒng)在弱激發(fā)光下，能夠有效探測(cè)極弱熒光，從而建立了活細(xì)胞熒光成像的新標(biāo)準(zhǔn)。 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l擁有更寬波長(zhǎng)范圍內(nèi)的高透過(guò)率l 內(nèi)置物鏡采用 UW多層鍍膜技術(shù)，能有效消除超寬譜帶上的反射，在可見(jiàn)光到近紅外光的波長(zhǎng)范圍內(nèi)能夠?qū)崿F(xiàn)平坦的高透過(guò)率，在近紅外和紫外范圍內(nèi)的透過(guò)率顯著提高。提高較寬波長(zhǎng)范圍內(nèi)的性能使它非常適合當(dāng)今最需要的研究用途。 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 有效消除直到近紅外范圍的色差l 杰出的超級(jí)復(fù)消色差特點(diǎn)有效地消除了從可見(jiàn)光譜直到 1000nm范圍內(nèi)的色差 , 意味著從紫外到紅外范圍內(nèi)的成像都可以只用一個(gè)物鏡實(shí)現(xiàn)。這一系列物鏡在使用覆蓋很寬譜帶的熒光進(jìn)行多色觀察時(shí)，可以獲得出色的清晰圖像而不產(chǎn)生顏色偏移。 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 雙層多光口設(shè)計(jì)保證了輸入 /輸出靈活性新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 后上光口l 后上光口不改變載物臺(tái)高度，所以不影響鏡架穩(wěn)定性這一光口可做光路輸入口，可裝一個(gè)附加熒光照明器l 右側(cè)光口l 右側(cè)光口裝置（ IX2RSPC2:可選件，視場(chǎng)數(shù)： 16）帶有一個(gè)結(jié)像透鏡，可以安裝一個(gè) C型接口 CCD照相機(jī)。l 后下光口l 能夠安裝冷 CCDDP30BW與同類設(shè)備。l 左側(cè)光口l 在這一光口上，原始圖像平面距顯微鏡鏡架 102mm，具有很大的靈活性，用以安裝濾色鏡轉(zhuǎn)盤(pán)或者超低 5X照相機(jī)適配器。與雙光口視頻適配器結(jié)合，能夠獲得兩個(gè)原始圖像。（可選件）l 底光口使用 IX2TVR（ T型接口），獲得原始圖像。新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 提高了近紅外透過(guò)率 l IX2系列采用 UIS2 光學(xué)系統(tǒng)，提高了側(cè)光口、后光口和底光口的紅外透過(guò)率，能夠提供多方面的高性能，以適應(yīng)未來(lái)研究的需要。 展望前景l(fā) 雙色和多色全內(nèi)反射熒光激發(fā)在國(guó)際上剛嶄露頭角。在生物學(xué)的應(yīng)用上 ,由于全內(nèi)反射熒光成像的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，它將成為細(xì)胞基底接觸區(qū)域內(nèi)的豐富的細(xì)胞生命活動(dòng)，如細(xì)胞膜內(nèi)蛋白質(zhì)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，基底附近的細(xì)胞骨架，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等最強(qiáng)有力的探測(cè)方法。 如細(xì)胞膜內(nèi)蛋白質(zhì)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，基底附近的細(xì)胞骨架，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等。l 我們有理由相信隨著光電探測(cè)設(shè)備探測(cè)效率和探測(cè)速度的提高以及單分子染色技術(shù)的發(fā)展，全內(nèi)反射熒光成像技術(shù)將越來(lái)越生動(dòng)的把細(xì)胞內(nèi)的生物世界展現(xiàn)在我們面前。
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