可移動的遺傳因子轉座和染色體外遺傳因子-資料下載頁
2025-05-02 01:21本頁面
【正文】 個 DNA 分子中，又稱整合式重組） ⑵ 發(fā)生在噬菌體和細菌 DNA短同源序列的專一性 核苷酸上 ，需要位點專一性的蛋白質因子參與。 ? 位點特異性重組與同源重組的區(qū)別： ① 同源重組 中 DNA鏈的 切斷是完全隨機的 ； 位點特異性重組 是在某些 特異的 DNA 序列 處發(fā)生重組。 ② 同源重組 后 染色體內(nèi)的 DNA序列一般仍按 原來的順序排列； 位點特異性重組 中 DNA節(jié)段的相對位置發(fā) 生了移動，即 DNA序列發(fā)生重排，從而得 到不同的結果。 （一） λ噬菌體對 的整合 λ噬菌體 DNA的整合作用： ? λ噬菌體感染大腸桿菌后，有兩種生活方式： ① 裂解生長途徑（溶菌生長）： lysis pathway ② 溶源菌生長途徑： lysogenic pathway ? λ噬菌體在 溶源周期和裂解周期中，其 DNA狀態(tài) 不同，兩種狀態(tài)的相互轉變（整合與切離）是通 過位點特異性重組實現(xiàn)的。 ? 這些特異位點叫附著點（ attachment site）， 簡稱為 att。 BOB180。 att B att P POP180。 Int IHF Int Xis IHF BOP180。 POB180。 att L att R 原噬菌體 切除 整合 細菌 DNA 噬菌體 核心序列 “ O” 完全一致 （同源部分） 位點特異性重組發(fā)生的地方 整合后的附著位點為 attL（ BOP’） attR（ POB’） ? λ噬菌體的整合作用有兩個特點： ① λDNA和宿主 DNA的交換是可逆的， 原先存在的 DNA序列全部被保存下來，并 無丟失。 ② 噬菌體和細菌的 DNA之間有一段很短的 同源序列，重組交換必須通過其中的一個 特定的核苷酸。 λ噬菌體整合的分子機制： ? 分成三個階段： ① λ整合酶與 λDNA、宿主 DNA的 att 位點 結合形成復合物； ② 鏈交換，兩條鏈形成 Holliday連接； ③ 拆分 Holliday中間體，形成重組分子。 ? λ噬菌體 整合需要兩種蛋白： ① 整合酶（ integratase， Int）： ② 整合宿主因子（ integration host factor， IHF） λ噬菌體編碼。有三種功能： ?λ噬菌體的插入 ?原噬菌體的切離 ?拓撲異構酶活性。 宿主 him A基因編碼，對整合起促進作用。 ? λ噬菌體的切除需要三種蛋白： ① 整合酶（ integratase， Int）： ② 整合宿主因子（ IHF）： ③ 切除酶（ excisionase， Xis）： Xis和 Int結合形成復合物，作用于 BOP′和 POB′位點，促進兩者之間的相互作用和重組。 ? 整合與切離的反應如下： POP′(attP) + BOB′(attB) Int, IHF, Xis Int, IHF BOP′(attL) + POB′(attR) ? 酶蛋白作用的特異性： ① Int、 IHF只能在 attP （ POP′）上形成整合 體，再作用于 attB（ BOB′），繼而切斷、相 互交換重組連接。 Int、 IHF不能在 attL （ BOP′） 或 attR （ POB′）上形成整合體，從而決定重 組方向。 ② Xis、 Int、 IHF只能與 attL （ BOP′）或 attR （ POB′）上形成另一種整合體，重組結果是 使原噬菌體從宿主基因組上切離下來。 ? 整合需識別 attP和 attB，切離需識別 attL和 attR ，所以，位點特異性重組是通過重組位點 的鑒別來控制的。 復習題 解釋概念： 轉座子、逆轉錄轉座子、質粒、 遺傳重組、同源重組、位點特異重組 簡述原核生物轉座子的類型及組成特點。 解釋逆轉錄病毒與逆轉錄轉座子的區(qū)別。 簡述質粒 DNA特性。 試述大腸桿菌同源重組酶的特點。 同源重組與位點特異重組有何不同？
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