可移動(dòng)的遺傳因子轉(zhuǎn)座和染色體外遺傳因子-資料下載頁(yè)
2025-05-02 01:21本頁(yè)面
【正文】 個(gè) DNA 分子中，又稱(chēng)整合式重組） ⑵ 發(fā)生在噬菌體和細(xì)菌 DNA短同源序列的專(zhuān)一性 核苷酸上 ，需要位點(diǎn)專(zhuān)一性的蛋白質(zhì)因子參與。 ? 位點(diǎn)特異性重組與同源重組的區(qū)別： ① 同源重組 中 DNA鏈的 切斷是完全隨機(jī)的 ； 位點(diǎn)特異性重組 是在某些 特異的 DNA 序列 處發(fā)生重組。 ② 同源重組 后 染色體內(nèi)的 DNA序列一般仍按 原來(lái)的順序排列； 位點(diǎn)特異性重組 中 DNA節(jié)段的相對(duì)位置發(fā) 生了移動(dòng)，即 DNA序列發(fā)生重排，從而得 到不同的結(jié)果。 （一） λ噬菌體對(duì) 的整合 λ噬菌體 DNA的整合作用： ? λ噬菌體感染大腸桿菌后，有兩種生活方式： ① 裂解生長(zhǎng)途徑（溶菌生長(zhǎng)）： lysis pathway ② 溶源菌生長(zhǎng)途徑： lysogenic pathway ? λ噬菌體在 溶源周期和裂解周期中，其 DNA狀態(tài) 不同，兩種狀態(tài)的相互轉(zhuǎn)變（整合與切離）是通 過(guò)位點(diǎn)特異性重組實(shí)現(xiàn)的。 ? 這些特異位點(diǎn)叫附著點(diǎn)（ attachment site）， 簡(jiǎn)稱(chēng)為 att。 BOB180。 att B att P POP180。 Int IHF Int Xis IHF BOP180。 POB180。 att L att R 原噬菌體 切除 整合 細(xì)菌 DNA 噬菌體 核心序列 “ O” 完全一致 （同源部分） 位點(diǎn)特異性重組發(fā)生的地方 整合后的附著位點(diǎn)為 attL（ BOP’） attR（ POB’） ? λ噬菌體的整合作用有兩個(gè)特點(diǎn)： ① λDNA和宿主 DNA的交換是可逆的， 原先存在的 DNA序列全部被保存下來(lái)，并 無(wú)丟失。 ② 噬菌體和細(xì)菌的 DNA之間有一段很短的 同源序列，重組交換必須通過(guò)其中的一個(gè) 特定的核苷酸。 λ噬菌體整合的分子機(jī)制： ? 分成三個(gè)階段： ① λ整合酶與 λDNA、宿主 DNA的 att 位點(diǎn) 結(jié)合形成復(fù)合物； ② 鏈交換，兩條鏈形成 Holliday連接； ③ 拆分 Holliday中間體，形成重組分子。 ? λ噬菌體 整合需要兩種蛋白： ① 整合酶（ integratase， Int）： ② 整合宿主因子（ integration host factor， IHF） λ噬菌體編碼。有三種功能： ?λ噬菌體的插入 ?原噬菌體的切離 ?拓?fù)洚悩?gòu)酶活性。 宿主 him A基因編碼，對(duì)整合起促進(jìn)作用。 ? λ噬菌體的切除需要三種蛋白： ① 整合酶（ integratase， Int）： ② 整合宿主因子（ IHF）： ③ 切除酶（ excisionase， Xis）： Xis和 Int結(jié)合形成復(fù)合物，作用于 BOP′和 POB′位點(diǎn)，促進(jìn)兩者之間的相互作用和重組。 ? 整合與切離的反應(yīng)如下： POP′(attP) + BOB′(attB) Int, IHF, Xis Int, IHF BOP′(attL) + POB′(attR) ? 酶蛋白作用的特異性： ① Int、 IHF只能在 attP （ POP′）上形成整合 體，再作用于 attB（ BOB′），繼而切斷、相 互交換重組連接。 Int、 IHF不能在 attL （ BOP′） 或 attR （ POB′）上形成整合體，從而決定重 組方向。 ② Xis、 Int、 IHF只能與 attL （ BOP′）或 attR （ POB′）上形成另一種整合體，重組結(jié)果是 使原噬菌體從宿主基因組上切離下來(lái)。 ? 整合需識(shí)別 attP和 attB，切離需識(shí)別 attL和 attR ，所以，位點(diǎn)特異性重組是通過(guò)重組位點(diǎn) 的鑒別來(lái)控制的。 復(fù)習(xí)題 解釋概念： 轉(zhuǎn)座子、逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子、質(zhì)粒、 遺傳重組、同源重組、位點(diǎn)特異重組 簡(jiǎn)述原核生物轉(zhuǎn)座子的類(lèi)型及組成特點(diǎn)。 解釋逆轉(zhuǎn)錄病毒與逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的區(qū)別。 簡(jiǎn)述質(zhì)粒 DNA特性。 試述大腸桿菌同源重組酶的特點(diǎn)。 同源重組與位點(diǎn)特異重組有何不同？
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1