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疫學(xué)技術(shù)ppt課件-資料下載頁

2025-05-01 18:21本頁面
  

【正文】 T細(xì)胞功能檢測 ? (1)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 ? (2)淋巴細(xì)胞參與的細(xì)胞毒性試驗 ? B細(xì)胞功能檢測 E玫瑰花環(huán)形成試驗 ? 可用于 T細(xì)胞的檢測和鑒定。外周血 T淋巴細(xì)胞表面具有綿羊(雞、馬等)紅細(xì)胞受體,將紅細(xì)胞與外周血淋巴細(xì)胞按一定比例混合,在 4C條件下放置 1— 2小時,可形成以 T細(xì)胞為中心、周圍環(huán)繞 (綿羊 )紅細(xì)胞的花環(huán)樣細(xì)胞集團??尚纬?E玫瑰花環(huán)的細(xì)胞為 T細(xì)胞。 T細(xì)胞單克隆抗體對 T細(xì)胞及其亞群的檢測 ? T細(xì)胞單克隆抗體可用于 T細(xì)胞及其亞群的檢測和鑒定,所用的單克隆抗體主要有CD3 McAb、 CD4 McAb和 CD8 McAb。 ? 通常采用免疫熒光間接法測定。 T細(xì)胞單克隆抗體對 T細(xì)胞及其亞群的檢測 ? 淋巴細(xì)胞中,被 CD3 McAb著染熒光的細(xì)胞為總 T細(xì)胞,包括 TH、 TH TH TC和TS細(xì)胞。被 CD4 McAb著染熒光的細(xì)胞為TH、 TH TH2, 被 CD8 McAb著染熒光的細(xì)胞為 TC和 TS細(xì)胞。 ? 結(jié)果表示為: CD3+T細(xì)胞 =? CD4+T細(xì)胞 =? CD8+T細(xì)胞 =? B細(xì)胞鑒定和檢測 ? SmIgM/D是 B細(xì)胞表面特有的標(biāo)志,通過對該種標(biāo)志的檢測,可對 B細(xì)胞進行鑒定和檢測。 ? 通常采用免疫熒光直接法進行測定。即用熒光素標(biāo)記的 (兔 )抗 IgM/D抗體對外周血淋巴細(xì)胞進行直接免疫熒光染色,著染熒光的細(xì)胞為 B細(xì)胞。 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 ? T細(xì)胞在體外受到特異性抗原或非特異性有絲分裂原刺激后,能轉(zhuǎn)化為體積較大、代謝旺盛并能分裂的淋巴母細(xì)胞。根據(jù)其轉(zhuǎn)化程度和轉(zhuǎn)化率,可測定機體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)。 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 —— 非特異性轉(zhuǎn)化試驗 ? 用植物凝集素 (PHA)或刀豆球蛋白A(ConA)等有絲分裂原刺激多克隆 T細(xì)胞,使其發(fā)生母細(xì)胞轉(zhuǎn)化。正常人T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率約為 70%。 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 —— 特異性轉(zhuǎn)化試驗 ? 用特異性抗原刺激相應(yīng)抗原特異性 T細(xì)胞,使其發(fā)生母細(xì)胞轉(zhuǎn)化。其轉(zhuǎn)化率明顯低于非特異性轉(zhuǎn)化率,一般為5— 30%。 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 —— 方法 ? 取外周血或分離的淋巴細(xì)胞,加入促有絲分裂原或特異性抗原,在培養(yǎng)液中培養(yǎng) 72小時,經(jīng)涂片、染色后鏡檢??赏ㄟ^淋巴細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化計算出轉(zhuǎn)化百分率。
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