【正文】 Ti4＋ 時(shí)， Fe3＋ 黃色干擾，可加 H3PO4使其成為 Fe(PO4)3－ （無色 ）。 （ 2）調(diào)節(jié)溶液酸度 如硅鉬藍(lán)在酸度 4～ 6mol/L仍然穩(wěn)定，但磷砷鉬藍(lán)在酸度 。 （ 3）根據(jù)配合物的穩(wěn)定性不同實(shí)現(xiàn)分離 （ 4）選擇合適的測(cè)定波長 若顯色物質(zhì)存在多個(gè)吸收峰且在 ?max處存在干擾時(shí)，可選擇吸收次強(qiáng)的峰以避開干擾，但測(cè)定靈敏度會(huì)降低。 （ 5）分離 考慮采用預(yù)先分離的方法，如沉淀、萃取、離子交換、蒸發(fā)和蒸餾以及色譜分離等。 （ 5）提高靈敏度及選擇性的方法 ① 合成或改進(jìn)新的高靈敏、高選擇的有機(jī)顯色劑； ② 分離富集和測(cè)定相結(jié)合，如用有機(jī)溶劑萃取顯色產(chǎn)物再進(jìn)行光度測(cè)定； ③ 采用三元（或多元）配合物顯色體系。 （ 1）高 含量組分的測(cè)定 ——示差光度法 普通的分光光度法采用 不含已顯色被測(cè)組分的參比溶液， 當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用 示 差法。 示差光度法使用 濃度比試樣溶液稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液在同樣條件下顯色，用作參比溶液來調(diào)節(jié) T=100% 。 5. 其他定量分析方法 示 差 法原理 參比溶液： 濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液 c1。 用 c1 調(diào)節(jié) T%為 100（ A=0），若被測(cè)溶液的濃度 為 c2 。 A1= ? l c 1 A2= ? l c 2 結(jié)論： 兩溶液的吸光度差 △ A與濃度差 △ c成正比。 △ A =A2 – A1 ＝ ? l (c2－ c1) ＝ ? l △ c 步驟： 標(biāo)準(zhǔn)溶液 c c c3…… 。以 c1作參比，調(diào) A = 0 測(cè) c c3……的△ A，用△ A對(duì)△ c作圖。同條件下測(cè)△ Ax。 從示差工作曲線中查出△ cx. cx = △ cx + c1 △ A △ c △ Ax △ cx 示差工作曲線 示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理： 普通法： cs的 T=10%； cx的 T=5% 示差法： cs 做參比，調(diào) T=100% cx的 T=50% ；標(biāo)尺擴(kuò)展 10倍 示差光度法 例：若普通的分光光度法測(cè)得試樣的T=%，配制一濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液 S，測(cè)得 T=%， 二者之差為 3%；用示差法時(shí)，以此標(biāo)準(zhǔn)溶液 S來調(diào)節(jié)儀器令T=100%，再來測(cè)定試樣 X，可得T=%， 二者之差為 30%。這樣，示差法相當(dāng)于把標(biāo)尺擴(kuò)大了 10倍，測(cè)量讀數(shù)的相對(duì)誤差也就縮小了 10倍。 準(zhǔn)確度提高的原因： ?使讀數(shù)落入測(cè)量誤差最小區(qū)域（可稀釋解決） ?相對(duì)誤差 dc/(?c+cs)很小，從而結(jié)果可靠。 注意事項(xiàng)： ?光源強(qiáng)度足夠強(qiáng) ?可以使用于低濃度或中濃度組分 示差光度法特點(diǎn) 參比溶液濃度與測(cè)量誤差的關(guān)系 參比溶液濃度與測(cè)量誤差的關(guān)系可用下圖表示： 圖中 A＝ 的誤差曲線 ,設(shè)儀器透光度讀數(shù)的絕對(duì)誤差 Δ Tr＝ ％ ， 由圖可見： 隨著 參比溶液濃度的增加 ， 即 Ts減少 ， 濃度相對(duì)誤差也減小 ， 結(jié)果示差法測(cè)定的準(zhǔn)確度可與重量法或滴定法接近 。 不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比時(shí)的 誤差曲線 測(cè)量誤差 ， 但是 濃度越高 ，透過光線越弱 ， 產(chǎn)生的光電流就越小 ， 以至調(diào)節(jié)儀器的滿標(biāo)有困難 。 為此 ， 要求儀器 必須增強(qiáng)入射光的強(qiáng)度 ， 或能增加光電流的放大倍數(shù) ， 以便在使用高吸光度參比溶液時(shí) ， 仍能調(diào)節(jié)儀器的滿標(biāo)度 （ T＝100％ ） 。 靈敏度和穩(wěn)定性 提出了較高的要求 。 線性關(guān)系往往受到破壞 ，測(cè)定范圍小，這是實(shí)際工作中必須注意的。 不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比時(shí)的 誤差曲線 某有色溶液以試劑空白作參比時(shí)，選用 cm吸收池，測(cè)得 T=%。已知 ? =?104 L?mol1?cm1 ，若用示差法測(cè)定上述溶液，應(yīng)選擇多大濃度的溶液作參比才能使測(cè)量的相對(duì)誤差最??？ 解： 1544 3 %4 3 ???????????????????Lm o lclAAlAcAAArsrrrs??15410060110112170217008036800013680001100836?? ????????????????Lm ollTlAcTTTTrrrsrrs....lglg......%%.??例 A = ， T=% （ 2 ） 多組分混合物 的分析 分光光度法可以不經(jīng)分離而測(cè)定試液中兩種以上組分。 如果兩種組分的吸收曲線彼此不相干擾，可方便地選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL進(jìn)行測(cè)定，如果兩種組分地吸收曲線相互干擾時(shí)，則可用解聯(lián)立方程式的方法，求出各組分的含量。 ⑴ x、 y 吸收光譜不重疊 λ1測(cè)定 x , λ2測(cè)定 y, 互不干擾 ① 找出 x、 y 的最大吸收波長 λ λ2 ② 在 λ λ2測(cè)定吸光值 A A2 ⑵ 吸收光譜重疊 A ③ 解方程： 值。的時(shí)波長為值的時(shí)波長為值的時(shí)波長為值的時(shí)波長為其中????????????????y；x；y；x：lclcAlclcAyxyxyyxxyyxx221121————22112211???? B化合物溶液的濃度是 1 103 ，以蒸餾水為空白試驗(yàn)時(shí)測(cè)得的吸光度為， B化合物的未知溶液在同樣條件下的吸光度為 。今以 1 103 B化合物溶液作為參比（ A=），則未知濃度的 B化合物 的吸光度是多少？ 例 1 %10lg%206 9 lg??????????未未TATATATABB??解： 3 0 %50%%%10%1 0 0%20) . ,%(1 0 0%20?????ATTAT 得到作為的以3 6 ????????sxxSAAAAA?或 在測(cè)定吸光度時(shí)，若百分透光率讀準(zhǔn)至 1%，當(dāng)某試液由于稀釋不當(dāng)，測(cè)得的百分透光率一種情況是 10%，而另一種情況是 90%。求兩種稀釋情況下濃度測(cè)定的相對(duì)誤差是多少？ 例 2 %%)1(43 lg43 %90%%%)1(43 lg43 %10%21??????????????????????TTTccTTTTccT解： 例 3 為測(cè)定含 A和 B兩種有色物質(zhì)試液中 A和 B的濃度，先以 A物質(zhì)作校正曲線， 求得 A在 ?1和 ?2時(shí) ? A(?1) =4800 L?mol1?cm1和 ? A(?2) =700 L?mol1?cm1 ，再以純B物質(zhì)作校正曲線，求得 ? B(?1) =800 L?mol1?cm1和 ? B(?2) =4200 L?mol1?cm1 ；對(duì)試液進(jìn)行測(cè)定，得 A ?1 = A ?2 = 。求試液中 A和 B的濃度，在上述測(cè)定時(shí)均用 1cm比色皿。 Lm olcLm olccccclclcAlclcAlcABABABABbAABbAA/1048 /1093 :142 00170 180 0148 0058 :45)2()2(2)1()1(1???????????????????????求得即得由???????????解： 作業(yè)： P214P215習(xí)題： 8 小結(jié)： 1. LB定律基本原理及計(jì)算 2. 分光光度計(jì)結(jié)構(gòu) 3. 顯色反應(yīng)與顯色條件選擇 4. 吸光度測(cè)量條件選擇 5. 光度計(jì)測(cè)量誤差計(jì)算 6. 高含量組分測(cè)定 —示差分光光度法