【正文】 Ti4＋ 時， Fe3＋ 黃色干擾，可加 H3PO4使其成為 Fe(PO4)3－ （無色 ）。 （ 2）調(diào)節(jié)溶液酸度 如硅鉬藍在酸度 4～ 6mol/L仍然穩(wěn)定，但磷砷鉬藍在酸度 。 （ 3）根據(jù)配合物的穩(wěn)定性不同實現(xiàn)分離 （ 4）選擇合適的測定波長 若顯色物質(zhì)存在多個吸收峰且在 ?max處存在干擾時，可選擇吸收次強的峰以避開干擾，但測定靈敏度會降低。 （ 5）分離 考慮采用預先分離的方法，如沉淀、萃取、離子交換、蒸發(fā)和蒸餾以及色譜分離等。 （ 5）提高靈敏度及選擇性的方法 ① 合成或改進新的高靈敏、高選擇的有機顯色劑； ② 分離富集和測定相結(jié)合，如用有機溶劑萃取顯色產(chǎn)物再進行光度測定； ③ 采用三元（或多元）配合物顯色體系。 （ 1）高 含量組分的測定 ——示差光度法 普通的分光光度法采用 不含已顯色被測組分的參比溶液， 當待測組分含量較高時，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用 示 差法。 示差光度法使用 濃度比試樣溶液稍低的標準溶液在同樣條件下顯色，用作參比溶液來調(diào)節(jié) T=100% 。 5. 其他定量分析方法 示 差 法原理 參比溶液： 濃度稍低的標準溶液 c1。 用 c1 調(diào)節(jié) T%為 100（ A=0），若被測溶液的濃度 為 c2 。 A1= ? l c 1 A2= ? l c 2 結(jié)論： 兩溶液的吸光度差 △ A與濃度差 △ c成正比。 △ A =A2 – A1 ＝ ? l (c2－ c1) ＝ ? l △ c 步驟： 標準溶液 c c c3…… 。以 c1作參比，調(diào) A = 0 測 c c3……的△ A，用△ A對△ c作圖。同條件下測△ Ax。 從示差工作曲線中查出△ cx. cx = △ cx + c1 △ A △ c △ Ax △ cx 示差工作曲線 示差法標尺擴展原理： 普通法： cs的 T=10%； cx的 T=5% 示差法： cs 做參比，調(diào) T=100% cx的 T=50% ；標尺擴展 10倍 示差光度法 例：若普通的分光光度法測得試樣的T=%，配制一濃度稍低的標準溶液 S，測得 T=%， 二者之差為 3%；用示差法時，以此標準溶液 S來調(diào)節(jié)儀器令T=100%，再來測定試樣 X，可得T=%， 二者之差為 30%。這樣，示差法相當于把標尺擴大了 10倍，測量讀數(shù)的相對誤差也就縮小了 10倍。 準確度提高的原因： ?使讀數(shù)落入測量誤差最小區(qū)域（可稀釋解決） ?相對誤差 dc/(?c+cs)很小，從而結(jié)果可靠。 注意事項： ?光源強度足夠強 ?可以使用于低濃度或中濃度組分 示差光度法特點 參比溶液濃度與測量誤差的關(guān)系 參比溶液濃度與測量誤差的關(guān)系可用下圖表示： 圖中 A＝ 的誤差曲線 ,設儀器透光度讀數(shù)的絕對誤差 Δ Tr＝ ％ ， 由圖可見： 隨著 參比溶液濃度的增加 ， 即 Ts減少 ， 濃度相對誤差也減小 ， 結(jié)果示差法測定的準確度可與重量法或滴定法接近 。 不同濃度標準溶液作參比時的 誤差曲線 測量誤差 ， 但是 濃度越高 ，透過光線越弱 ， 產(chǎn)生的光電流就越小 ， 以至調(diào)節(jié)儀器的滿標有困難 。 為此 ， 要求儀器 必須增強入射光的強度 ， 或能增加光電流的放大倍數(shù) ， 以便在使用高吸光度參比溶液時 ， 仍能調(diào)節(jié)儀器的滿標度 （ T＝100％ ） 。 靈敏度和穩(wěn)定性 提出了較高的要求 。 線性關(guān)系往往受到破壞 ，測定范圍小，這是實際工作中必須注意的。 不同濃度標準溶液作參比時的 誤差曲線 某有色溶液以試劑空白作參比時，選用 cm吸收池，測得 T=%。已知 ? =?104 L?mol1?cm1 ，若用示差法測定上述溶液，應選擇多大濃度的溶液作參比才能使測量的相對誤差最小？ 解： 1544 3 %4 3 ???????????????????Lm o lclAAlAcAAArsrrrs??15410060110112170217008036800013680001100836?? ????????????????Lm ollTlAcTTTTrrrsrrs....lglg......%%.??例 A = ， T=% （ 2 ） 多組分混合物 的分析 分光光度法可以不經(jīng)分離而測定試液中兩種以上組分。 如果兩種組分的吸收曲線彼此不相干擾，可方便地選擇適當?shù)牟ㄩL進行測定，如果兩種組分地吸收曲線相互干擾時，則可用解聯(lián)立方程式的方法，求出各組分的含量。 ⑴ x、 y 吸收光譜不重疊 λ1測定 x , λ2測定 y, 互不干擾 ① 找出 x、 y 的最大吸收波長 λ λ2 ② 在 λ λ2測定吸光值 A A2 ⑵ 吸收光譜重疊 A ③ 解方程： 值。的時波長為值的時波長為值的時波長為值的時波長為其中????????????????y；x；y；x：lclcAlclcAyxyxyyxxyyxx221121————22112211???? B化合物溶液的濃度是 1 103 ，以蒸餾水為空白試驗時測得的吸光度為， B化合物的未知溶液在同樣條件下的吸光度為 。今以 1 103 B化合物溶液作為參比（ A=），則未知濃度的 B化合物 的吸光度是多少？ 例 1 %10lg%206 9 lg??????????未未TATATATABB??解： 3 0 %50%%%10%1 0 0%20) . ,%(1 0 0%20?????ATTAT 得到作為的以3 6 ????????sxxSAAAAA?或 在測定吸光度時，若百分透光率讀準至 1%，當某試液由于稀釋不當，測得的百分透光率一種情況是 10%，而另一種情況是 90%。求兩種稀釋情況下濃度測定的相對誤差是多少？ 例 2 %%)1(43 lg43 %90%%%)1(43 lg43 %10%21??????????????????????TTTccTTTTccT解： 例 3 為測定含 A和 B兩種有色物質(zhì)試液中 A和 B的濃度，先以 A物質(zhì)作校正曲線， 求得 A在 ?1和 ?2時 ? A(?1) =4800 L?mol1?cm1和 ? A(?2) =700 L?mol1?cm1 ，再以純B物質(zhì)作校正曲線，求得 ? B(?1) =800 L?mol1?cm1和 ? B(?2) =4200 L?mol1?cm1 ；對試液進行測定，得 A ?1 = A ?2 = 。求試液中 A和 B的濃度，在上述測定時均用 1cm比色皿。 Lm olcLm olccccclclcAlclcAlcABABABABbAABbAA/1048 /1093 :142 00170 180 0148 0058 :45)2()2(2)1()1(1???????????????????????求得即得由???????????解： 作業(yè)： P214P215習題： 8 小結(jié)： 1. LB定律基本原理及計算 2. 分光光度計結(jié)構(gòu) 3. 顯色反應與顯色條件選擇 4. 吸光度測量條件選擇 5. 光度計測量誤差計算 6. 高含量組分測定 —示差分光光度法