【正文】 olliday，另兩條單鏈間同樣重組 attB有BOB ’3個序列 λDNA的 attP有POP’3個序列 P附著位點 (attP) attachment site P 第三節(jié) 位點專一性重組 二、 噬菌體的整合和切除 (三 )核心序列結構與識別 ’ 240bp 核心序列 O： 15bp，富含AT，非對稱序列 左序列 P： 160bp,160~0 右序列 P’： 80bp， 0~80 2. BOB’ 23bp 左序列 B： 11 ~0 右序列 B’： 0 ~11 核心序列 O同 λO 3. POP’與 BOB’相互識別 (attP)核心序列與B(attB)相互識別 第四節(jié) 異常重組 一、 異常重組 (illegitimate rebination) (一 )概念 依賴 DNA復制完成重組，不 依賴序列同源 (二 )特點 依賴轉座區(qū)域 DNA復制完成重組 需要轉座酶 不依賴序列同源 DS基因從中間位置轉到 C基因內(nèi) 第四節(jié) 異常重組 二、原核生物轉座子 (一 )插入序列 (IS， inserted sequence) 攜有轉座酶基因、兩端有反向重復序列的簡單轉座因子稱插入序列。 eg. IS1……IS 11。能高頻轉座。 ２ .插入序列突變的特點 ①突變體單鏈有頸環(huán)結構，即反向重復序列； ②突變體 DNA比野生型密度梯度大，增加了一段 DNA； ③不能核酸置換回復 ,非點突變 ④可自然回復，不是缺失 第四節(jié) 異常重組 二、原核生物轉座子 (二 ) 轉座子 (Tn, transposon) 攜有轉座酶、抗性或其它基因，兩端有反向重復序列 (IS)的細菌 ,能高頻轉座。如 YeastTn1……Tn9 。 Tn3：攜有 tnpA、 tnpR 、 ampR基因，兩端有 38bpIR Tn9：攜有 camR(氯霉素抗性 )基因，末端有 23bpIR IS 組件相同，方向相反 ca mR IS L IS R IS 組件 I S 組件 中的 I R 中的 IR 圖 2 3 3 1 復合轉座子結構的 ( T n 9 )Tn9 第四節(jié) 異常重組 二、原核生物轉座子 (三 )轉座噬菌體 ( mutator phage) 攜有 tnpA、 tnpB基因，末端有 DNA反向重復序列的噬菌體。能高頻轉座。如 res轉座噬菌體。 轉錄單位 IR r es IR t n p A t n p R a m pR 3 8 3 0 6 6 1 9 5 5 8 8 6 1 3 8 tn p A G UA Ⅰ Ⅱ Ⅲ AU G t n p R 5 8 0 + 1 0 5 m RN A m RNA 圖 23 3 4 T n A 的結構和轉錄 轉座噬菌體 第四節(jié) 異常重組 二、原核生物轉座子 (四 )轉座機制 Sharpiro 1979 １ .識別切單口 轉座酶識別靶序列，切開單鏈形成粘性末端 ２ .供授體連接 供、受體形成共聯(lián)體，留下缺口 ３ .轉座序列復制 聚合酶補齊缺口，連接成完整的共聯(lián)體，有１重復序列 ４ .斷裂重組，完成轉座 重組，共聯(lián)體分離。留下原轉座子；靶序列上插入轉座子，兩端有同向重復序列 轉座酶識別靶序列 切開單鏈形成粘性末端 供受體形成共聯(lián)體 轉座序列復制 斷裂重組 共聯(lián)體分離 第四節(jié) 異常重組 三、真核生物轉座子 (一 )玉米轉座子 轉座子的提出 1951， McClintock，首創(chuàng)跳躍基因 (jumping gene)和玉米胚乳色澤基因轉座 (Transposition)新概念。 玉米胚乳色澤 (無 .有 .斑色 ) 原認為是 9號染色體上抑制基因 I對胚乳色素基因 C的抑制作用。但 McClintock研究證明：是轉座基因作用的結果。 第四節(jié) 異常重組 三、真核生物轉座因子 玉米胚乳色澤受基礎色澤基因 C、激活因子 (activator,AC)和解離因子 (dissocator,DS)三個基因控制，不在同一染色體上。 AC產(chǎn)生活性物激活 DS，跳入 C時胚乳無色，跳開 C時胚乳有色，頻繁地跳入跳出胚乳呈花斑。 AC丟失后， DS不再跳躍胚乳呈無色或有色；增加 AC，DS跳躍頻率增加，胚乳色澤斑點由大變小。 DSAC轉座系統(tǒng) (一 )玉米轉座子 第四節(jié) 異常重組 三、真核生物轉座因子 ⑴ 轉座子包括 2個部分： AC+DS ⑵ AC結構比較穩(wěn)定： ⑶ DS轉座酶結構不穩(wěn)定。已發(fā)現(xiàn)多個系統(tǒng)： ① 4000bp正常 ② 149bp缺失 ③ 2522bp缺失 ④ 405bp缺失 DSAC轉座序列的特點 (一 )玉米轉座子 第 12章 基因結構及其重組機理 一、 作業(yè)： P下 186 19 二、復習題 （一）名詞注釋 allele gene test test lapping gene （二）填空 人類的苯丙酮尿癥 (PKU)是苯丙氨酸 → A→ 酪氨酸 → B→CO 2+H2O生化反應中 A階段酶的失活所致，而尿黑酸癥 (AKU)是 B階段酶的失活所致，一個 PKU患者和一個 AKU患者結婚，他們的孩子表型是（ ），基因是（ ）。 基因內(nèi)不同位點間有結構差異的基因稱為擬等位基因，基因內(nèi)不同的基因排列方式稱為（ ）差異，順反位置效應稱為（ ）差異。 T4phage突變體成對感染 B株后代再感染 K株測定重組率的方法稱為（ ），它是基因內(nèi)精細結構及遺傳距離的研究方法，通常稱為（ ）。 在不允許基因交換的背景下，用成對的突變體混合接種測定成對基因否遺傳功能互補的實驗方法稱為（ ），成對的突變體在該遺傳背景下能產(chǎn)生野生型說明它們（ ） 反式排列遺傳功能不能互補的基因稱（ ），遺傳功能能夠互補的基因稱為（ ） 多個基因共有同一個 DNA序列的基因稱為（ ）基因，結構基因內(nèi)的間隔序列稱為（ ）基因。 DNA上能與 mRNA相應配對的區(qū)段稱為（ ），不能與 mRNA相應配對的區(qū)段稱為（ ）。 rebination sequence joining model conversion phage segregations specific rebination rebination （三）選擇填空 兩個白化人結婚生育了一個正常的孩子，最大可能的原因是（ ）。 a、胚系突變； b、雙親不同突變位點互補； c、基因交換重組； d、基因轉座重組 r47 與 r104成對感染 B株后再感染 K株產(chǎn)生野生型，而直接感染 K株不產(chǎn)生野生型，這是因為 r47 與 r104（ ）。 a、遺傳功能不互補； b、它們的基因型呈順式排列； c、他們沒有發(fā)生基因交換 d、他們分別位于不同的順反子間 一般認為能表達基因結構和功能差異的最小遺傳單位不太確切的是（ ） 。 a、突變子； b、交換子； c、順反子 d、內(nèi)含子 基因內(nèi)不同位點間有結構差異的基因稱為（ ）。 a、轉座基因； b、間隔基因； c、擬等位基因 d、重疊基因 已知 T4噬菌體 A區(qū) , 5號突體為同一個順反子 , 4號突變體為另一個順反子。則 1號突變體與 5號突變體的互補測驗結果應為 ( )。 a、 ++ b、 ++ c、 ++ d、 ++ 真核生物轉座子有多種類型，下面哪些類型不屬于真核生物轉座子。（ ） a、 DSAC轉座系統(tǒng)； b、 P因子序列； c、反轉錄轉座子； d、 Tn9轉座子 插入序列是一種攜有轉座酶基因，兩端有反向重復序列的簡單轉座因子，下面提供的轉座特點與它不相吻合的是（ ）。 a、能核酸置換回復； b、可自然回復； c、有反向重復序列； d、突變比野生型增加了一段 DNA λ DNA從 （ ）。 a、整合酶； b、整合宿主因子； c、切除酶； d、依賴蛋白質(zhì) A Holliday模型能科學合理地解釋生物同源重組現(xiàn)象，下列完成過程中哪些是錯誤的。（ ） a、內(nèi)切酶切斷酯鍵； b、連接酶形成交聯(lián)橋； c、十字構型，并旋轉； d、雙鏈雜種 DNA堿基匹配配對 （四）是非題（正確題畫 √ ，錯誤題畫 ） 由于堿基互補，真核生物 DNA中 (G+C)/(A+T)=1。 ( ) 單鏈 DNA病毒中， G/C與 A/T之比總是相等的。 ( ) 核小體中心顆粒是由 H2A、 H2B、 H H44個組蛋白各 2個分子組成的 8分子顆粒（ ） 基因轉錄具有空間性、時間性、同步性。（ ） 2n=4x生物基因組的 DNA含量為 4C。（ ） 女人體細胞中 XX染色體早期隨機失活會出現(xiàn) 1個巴氏小體。（ ） 細菌轉化是通過 DNA片段與染色體 DNA之間聯(lián)會、斷裂、遷移、錯接，產(chǎn)生重組。( ) λ DNA對 (Xis)參與。 ( ) 極化子是指基因內(nèi)各突變位點的轉變頻率從一端向另一端遞減的一段 DNA區(qū)段。（ ） 電鏡下能觀察到的 Chi結構，即“ χ ” 結構就是 Holliday模型的證據(jù)。（ ） 1 λ DNAPOP’ 與 BOB’ 序列中的 O序列是完全相同的。（ ） 五、復習題 以 Tn9為例說明轉座子調(diào)控的途徑和機理。 什么叫做 DsAc因子？有何功能？ P因子的作用是什么？ 為什么 P M不育，而 P P和 M P可育？ 簡述 Holliday模型的實質(zhì)