db37t3122-20xx槐花多糖提取工藝及其生物活性評價技術(shù)規(guī)程-資料下載頁
2025-04-07 03:03本頁面
【正文】 驗檢測雛雞血清抗體水平。血凝（HA）與血凝抑制（HI）試驗依據(jù)GB/T 白細(xì)胞數(shù)目及淋巴細(xì)胞比率的測定用一次性醫(yī)用抗凝管采集各組雛雞的抗凝血1 mL，用全自動血細(xì)胞分析儀測定雛雞血液內(nèi)白細(xì)胞數(shù)目和淋巴細(xì)胞比率?！?小腸內(nèi)分泌型免疫球蛋白A（SIgA）含量的測定雛雞剖殺后，取10 cm長的十二指腸段，用3 mL 1 % BSAPBS反復(fù)沖洗3次后，8000 rpm離心取上清，用商品化ELISA試劑盒檢測上清中SIgA的含量。AA附 錄 A （資料性附錄）溶液的配制 牛血清白蛋白（BSA）的配制將100 mL水中（須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白中），蓋好蓋后，輕輕搖動，直至牛血清白蛋白完全溶解為止。加水定容到10 mL，然后分裝成小份貯存于20 ℃?！?Sevag試劑的配制氯仿:正丁醇＝5:1（V/V）混合。 磷酸鹽緩沖溶液（PBS）的配制取ZLI9061 PBS溶于1000 mL的蒸餾水中，混勻，～，若偏離此范圍?！?1%雞紅細(xì)胞的配制 配制1 %紅細(xì)胞懸液時最好選擇2～3只SPF雞或未進(jìn)行過任何免疫過的成年公雞血液，采血時按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝劑，如肝素或枸椽酸鈉等?！?采血完畢后最好分裝至2 mL容量的圓底離心管中，經(jīng)2000 r/min～3000 r/min，5 min～10min，棄去上液和紅細(xì)胞上層的白細(xì)胞薄膜，再加入10倍以上血量的PBS液，上下緩慢顛倒（切忌用力過大使紅細(xì)胞破裂），使其充分混勻，再離心棄去上清液，反復(fù)幾次直至上清液清亮透明為止?！?按照離心之后紅細(xì)胞壓積，用生理鹽水或者PBS液配制成1 %雞紅細(xì)胞。實驗室用水應(yīng)符合GB/T 6682。試驗中配制試劑應(yīng)符合GB/T 603的要求。_________________________________
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