食品毒理學第七章ppt課件-資料下載頁
2025-01-08 05:38本頁面
【正文】 或非永久性結(jié)構(gòu)改變 在正常胚胎中有一定的發(fā)生率 胚胎胎仔發(fā)育毒性和致畸性試驗 胚胎胎仔發(fā)育毒性和致畸性試驗 圍產(chǎn)期毒性試驗 ? 試驗目的 對晚期胚胎發(fā)育的影響 對分娩過程的影響 對仔鼠存活率的影響 對母體哺育過程的影響 對仔鼠生長發(fā)育的影響 圍產(chǎn)期毒性試驗 ? 試驗動物 孕鼠， 20只 /組 ? 給藥方式：同臨床擬用給藥途徑 ? 給藥期限：懷孕第 15天～哺乳第 21天 圍產(chǎn)期毒性試驗 ? 劑量設(shè)置： 三個給藥組，一個對照組 高劑量組：預期產(chǎn)生明顯的毒性反應， 但動物死亡 10% 中劑量組：介于高劑量和低劑量組之間 低劑量組：無不良影響的劑量水平 圍產(chǎn)期毒性試驗 懷孕大鼠在懷孕第 15天～哺乳第 21天給藥，自然分娩并哺育后代至斷乳。然后每個劑量組每性別隨即選取 20只 F1代動物飼養(yǎng)至斷乳后 12周，然后交配 14天，懷孕動物在懷孕第 13～ 15天處死解剖，記錄懷孕和胚胎存活情況 。 圍產(chǎn)期毒性試驗 ? 觀察指標 毒性臨床征狀和死亡情況（親代和 F1代） 孕鼠體重和 F1代仔鼠體重 攝食量（親代和 F1代） 圍產(chǎn)期毒性試驗 觀測指標 ? 對分娩過程的影響：懷孕總天數(shù)，分娩歷時時間，難產(chǎn)率 ? 子代存活率：出生后 0天、 4天、 7天、 14天、 21天的存活率 圍產(chǎn)期毒性試驗 發(fā)育指標，哺乳第 4天開始觀察： ? 耳廓分離 第一次觀察到雙側(cè)耳廓分離的時間。 ? 切齒萌出 第一次觀察到兩個上門牙萌出的時間。 ? 開眼 第一次觀察到雙眼上下眼瞼分離的時間。 圍產(chǎn)期毒性試驗 ? 功能試驗 1. 哺乳第 1天－表面翻正反射 10秒鐘內(nèi)仔鼠從仰位回到正常體位的能力。 2. 哺乳第 17天－空中翻正反射 從離地面 50厘米高度的地方仰位落下，能以正常體位著地的能力。 3. 哺乳第 21天－抓握力 抓握并懸掛于懸掛式金屬桿的能力。 圍產(chǎn)期毒性試驗 4. 哺乳第 21天－瞳孔反射 瞳孔遇狹窄光線縮小。 5. 哺乳第 21天－聽覺反射 對短促恒定音調(diào)的驚愕反射。 6. 哺乳第 21天－視覺反射 當抓起尾巴向金屬網(wǎng)降落時前爪向金屬網(wǎng)伸展的能力。 圍產(chǎn)期毒性試驗 生長發(fā)育指標 出生后 30～ 40天內(nèi)，每天觀察動物陰道張開（雌性）和睪丸下降（雄性）情況。 圍產(chǎn)期毒性試驗 學習記憶能力 1. 在出生后第 5周和第 6周，采用水迷宮評價動物的學習記憶能力和行為能力。 2. 光電穿梭回避試驗 圍產(chǎn)期毒性試驗 運動能力 1. 采用自動光電池活動記錄裝置評價動物的運動能力。 2. 曠場試驗：記錄自主活動能力。 3. 轉(zhuǎn)棒試驗 圍產(chǎn)期毒性試驗 F1代生殖能力 出生后第 12周，將同劑量組的雄性和雌性動物合籠交配（避免同胞），懷孕第13～ 15天處死，記錄懷孕情況。 體外試驗 ? 主要用于機理研究；細胞水平、分析水平、器官培養(yǎng)、全胚胎培養(yǎng)等等。 ? 替代試驗研究 致畸試驗替代試驗方法 1. 小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)（ EST） Enbryonic stem cell test 2. 大鼠著床后全胚胎培養(yǎng)（ WEC） Whole Embryo cultrue 小鼠胚胎干細胞試驗 ? 細胞系：多能小鼠胚胎干細胞 ? 包括小鼠胚胎干細胞、胚胎生殖細胞和胚胎癌細胞 ? 具有無限繁殖能力和定向分化能力 ? 在體外可以分化形成 內(nèi)胚層、中胚層和外胚層的所有細胞 小鼠胚胎干細胞試驗 ? 體外建立小鼠胚胎干細胞定向分化成能夠博動的心肌細胞模型； ? 加入化學物質(zhì)，檢測對分化模型的抑制作用 ? 結(jié)合細胞毒性數(shù)據(jù)，建立預測模型 大鼠著床后全胚胎培養(yǎng)試驗 ? 采用孕 ? 培養(yǎng)基采用即刻離心大鼠血清； ? 旋轉(zhuǎn)間歇式充氣培養(yǎng) 48小時； ? 觀測發(fā)育指標 大鼠著床后全胚胎培養(yǎng)試驗 大鼠著床后全胚胎培養(yǎng)試驗
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