rna干擾技術(shù)基本原理與應用-資料下載頁
2025-05-10 19:21本頁面
【正文】 芯片檢測 Western雜交、表型分析、RTPCR、芯片檢測 研究領(lǐng)域 細胞培養(yǎng) 細胞培養(yǎng) amp。體內(nèi)研究 siRNA轉(zhuǎn)染細胞 .磷酸鈣共沉淀 電穿孔法 DEAE葡聚糖和 polybrene 機械法 ：顯微注射和基因槍 陽離子脂質(zhì)體試劑 提高轉(zhuǎn)染效率的方法 純化的 siRNA 避免使用抗生素 避免 RNA酶污染 較低傳代數(shù)的細胞 合適的轉(zhuǎn)染試劑 合適的陽性對照 熒光標記的 siRNA RNAi技術(shù)的應用 基因組功能研究的新方法 研究信號傳導通路的新途徑 開展基因治療的新策略 （抗病毒、抗腫瘤等） 篩選藥物靶點的新工具 RNAi技術(shù)抗病毒 作用 阻止病毒入侵、抑制病毒的復制和轉(zhuǎn)錄 自然界中普遍存在 在醫(yī)學上的應用 RNA病毒：如 HIV、 HCV、脊髓灰質(zhì)炎病毒 DNA病毒：如 HBV RNAi技術(shù)阻止 HIV的入侵 Novina將針對 CD4的 dsRNA導入 能表達CD CCR CXCR4的 M agi2CCR 5 細胞系），能使細胞表面 CD4 表達減少 75%；轉(zhuǎn)染后 60 小時后 , 再用 H IV 感染 , 結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD4siRNA 轉(zhuǎn)染的細胞很少有包涵體出現(xiàn) 其它試驗的受體： CCR CXCR4 RNAi技術(shù)抑制 HIV的復制 將 HIV1編碼 rev的基因和同源的 dsRNA共轉(zhuǎn)染到 293細胞中， rev基因的表達被顯著抑制 siRNA抑制 HIV revEGFP的表達，其抑制率可達到 90％；而反義 RNA，核酶組與對照組無顯著差異 RNAi技術(shù)抑制 HCV的復制 NS5B6133 siRNA NS31948 siRNA GAPDH siRNA + + + HCV表達質(zhì)粒 Huh7 細胞 共轉(zhuǎn)染 HCV RNA ↓ 21倍 HCV RNA ↓ 23倍 HCV RNA 無變化 RNAi技術(shù)抑制 HBV的復制 HBV是 DNA病毒，但是其復制過程需經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄的過程。 針對 HBV的 S， C， X， P基因序列及 DR1，DR2等調(diào)控元件序列，設計的 siRNA可顯著抑制 HBV的復制和蛋白表達 McCaffrey, et al. Nature Biotech 2021。pp16 謝 謝 !
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1