【文章內(nèi)容簡介】 中常用的層析方法是根據(jù)物質(zhì)的什么性質(zhì)分離的：離子交換層析（ionexchange chromatography，iec）是以蛋白質(zhì)分子凈電荷和表面電荷分布為分離基礎(chǔ)的；凝膠過濾層析（gel filtration chromatography，gfc）又稱排阻層析或分子篩方法，主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和形狀，即蛋白質(zhì)的質(zhì)量進(jìn)行分離和純化；親和層析（affinity chromatography，ac）根據(jù)生物分子間的親和力分離。42. 蛋白質(zhì)含量測定常用方法：物理性質(zhì)——uv；化學(xué)性質(zhì)——?jiǎng)P氏定氮法，雙縮尿法；染色性質(zhì)——考馬斯亮染色法，銀染法；其他性質(zhì)——熒光法。 43. 蛋白質(zhì)的純度測定常用方法：電泳法_sdspage，ief；化學(xué)法_n端測定，c端測定；儀器法_hplc，質(zhì)譜，氨基酸組成分析。44. 包涵體（inclusion bodies，ib）：在某些生長條件下，大腸桿菌能積累某種特殊的生物大分子，它們致密地集聚在細(xì)胞內(nèi)，或被膜包裹或形成無膜裸露結(jié)構(gòu)，這種水不溶性的結(jié)構(gòu)就是包涵體。以包涵體形式表達(dá)的重組蛋白喪失了原有的生物活性，必須通過有效的變性復(fù)性操作，才能回收得到具有正確空間構(gòu)象（因而具有生物活性）的目標(biāo)蛋白。45. 外源基因在大腸桿菌中高效表達(dá)的影響因素：轉(zhuǎn)錄——啟動(dòng)子、終止子；翻譯——核糖體結(jié)合位點(diǎn)、密碼子、質(zhì)?？截悢?shù)。 46. 核糖體結(jié)合位點(diǎn)（rbs）：mrna翻譯的起始效率主要是由其5’端的結(jié)構(gòu)序列所決定，這個(gè)結(jié)合位點(diǎn)即為核糖體結(jié)合位點(diǎn)。47. 瓊脂糖凝膠電泳的原理，移動(dòng)方向，影響dna在瓊脂糖中遷移的因素？原理：瓊脂糖凝膠電泳是利用瓊脂糖融化再凝固后能形成帶有一定孔隙的固體基質(zhì)的特性，其密度取決于瓊脂糖的濃度。在電場的作用下及中性ph的緩沖條件下帶負(fù)電的核酸分子就可以向（陽極）遷移。它主要用于分離、鑒定核酸，如dna鑒定，dna限制性內(nèi)切酶圖譜制作等，為dna分子及其片段分子量的測定和dna分子構(gòu)象的分析提供了重要手段。 影響dna在瓊脂糖中遷移的因素：1） 加dna分子：分子的大小、構(gòu)象、堿基組成2） 凝膠濃度3） 電壓、電場強(qiáng)度、電泳緩沖液的組成及ph值 4） 電泳溫度48. 感受態(tài)（petence）：就是細(xì)菌能夠吸收周圍環(huán)境中dna分子的生理狀態(tài)ca2+誘導(dǎo)的完整細(xì)胞的轉(zhuǎn)化適用于革蘭氏陰性菌 49. 影響轉(zhuǎn)化因素：1） 宿主細(xì)胞的限制修飾系統(tǒng)2） 宿主細(xì)胞感受態(tài)形成對轉(zhuǎn)化率有較大的影響，感受態(tài)細(xì)胞形成率低，轉(zhuǎn)化率相應(yīng)降低。3） 重組dna的構(gòu)型與轉(zhuǎn)化率有關(guān)，因?yàn)橛贸菪]合環(huán)狀和開環(huán)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌不會受細(xì)菌內(nèi)酶的破壞，所以用環(huán)狀dna轉(zhuǎn)化率比分子量相同的線性dna高10~100倍。轉(zhuǎn)化效率：超螺旋dna＞開環(huán)dna＞線性dna4） 轉(zhuǎn)化體系中重組dna的濃度和純度對轉(zhuǎn)化率有一定影響，在一定范圍內(nèi)，重組dna的濃度越高，轉(zhuǎn)化率越高；在一定濃度下，重組dna的純度越高，轉(zhuǎn)化率越高。 5） 轉(zhuǎn)化的條件：轉(zhuǎn)化所用試劑的質(zhì)量和濃度要求很高，如cacl2 宿主菌的培養(yǎng)時(shí)間重組dna和感受態(tài)混合后一定在冰浴條件下保溫 42℃熱處理時(shí)很關(guān)鍵，轉(zhuǎn)移速度要快，溫度要準(zhǔn)確。 50. 遺傳學(xué)篩選和分子生物學(xué)篩選的常用方法有哪些？遺傳學(xué)直接篩選法：抗藥性、顯色反應(yīng)、營養(yǎng)缺陷型、噬菌斑形成能力等。分子生物學(xué)間接方法：目的基因的大小、核苷酸序列分析（測序）、分子雜交、基因表達(dá)產(chǎn)物的放免反應(yīng)等。第四篇：藥學(xué)專業(yè)高級專業(yè)技術(shù)資格【愛文庫】藥學(xué)專業(yè)高級專業(yè)技術(shù)資格第一章 總 則第一條 為客觀、公正、科學(xué)地評價(jià)藥學(xué)專業(yè)技術(shù)人員的能力與水平，鼓勵(lì)多出成果，多出人才，培養(yǎng)造就一支高素質(zhì)專業(yè)技術(shù)人員隊(duì)伍，更好地滿足人民群眾對醫(yī)療保健服務(wù)的需要，實(shí)現(xiàn)衛(wèi)生工作為人民健康、為社會主義現(xiàn)代化建設(shè)服務(wù)的目標(biāo)，制定本標(biāo)準(zhǔn)條件。第二條 藥學(xué)專業(yè)高級專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格的名稱為副主任藥師、主任藥師。第三條 符合本規(guī)定申報(bào)條件的人員，可通過評審或考試與評審相結(jié)合的方式進(jìn)行評價(jià)。取得相應(yīng)專業(yè)技術(shù)資格的人員，表明其具有承擔(dān)高級專業(yè)技術(shù)資格相應(yīng)崗位工作的理論水平和業(yè)務(wù)能力。第二章 適用范圍與申報(bào)條件第四條 本標(biāo)準(zhǔn)條件適用于在醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)中，擬申報(bào)副主任藥師、主任藥師資格的專業(yè)技術(shù)人員。第五條 根據(jù)藥學(xué)專業(yè)的實(shí)際情況，藥學(xué)專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)條件按三級學(xué)科分為：醫(yī)院藥學(xué)和臨床藥學(xué)2個(gè)專業(yè)類別。第六條 遵守中華人民共和國憲法和法律，恪守職業(yè)道德，具有良好的敬業(yè)精神，在擔(dān)任主管藥師職務(wù)期限內(nèi)，年度考核與任期考核均為合格。第七條 申報(bào)人應(yīng)當(dāng)符合下列相應(yīng)學(xué)歷和資歷的要求：(一)副主任藥師具有相應(yīng)專業(yè)大學(xué)專科學(xué)歷，取得主管藥師資格后，從事本專業(yè)工作滿7年。具有相應(yīng)專業(yè)大學(xué)本科學(xué)歷，取得主管藥師資格后，從事本專業(yè)工作滿5年。具有相應(yīng)專業(yè)碩士學(xué)位，認(rèn)定主管藥師資格后，從事本專業(yè)工作滿4年。具有相應(yīng)專業(yè)博士學(xué)位，認(rèn)定主管藥師資格后，從事本專業(yè)工作滿2年。(二)主任藥師具有相應(yīng)專業(yè)大學(xué)本科及以上學(xué)歷或?qū)W士及以上學(xué)位，取得副主任藥師資格后，從事本專業(yè)工作滿5年。第八條 符合下列條件之一的，在申報(bào)高級專業(yè)技術(shù)資格時(shí)可不受從事本專業(yè)工作年限的限制：(一)獲國家自然科學(xué)獎(jiǎng)、國家技術(shù)發(fā)明獎(jiǎng)、國家科技進(jìn)步獎(jiǎng)的主要完成人；(二)獲省部級科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)及以上獎(jiǎng)項(xiàng)的主要完成人。第九條 有下列情形之一的，不得申報(bào)：(一)發(fā)生醫(yī)療事故未滿3年的；(二)發(fā)生醫(yī)療差錯(cuò)未滿1年的；(三)受行政處分未滿處分期的。第三章 醫(yī)院藥學(xué)專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)條件第十條 副主任藥師朝陽【wlsh0908】整理（一）專業(yè)理論知識基本理論知識全面掌握藥理學(xué)、藥劑學(xué)、生物藥劑學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)、藥物分析、藥物化學(xué)、天然藥化、藥事管理學(xué)的基本理論知識，對醫(yī)院藥學(xué)專業(yè)的某個(gè)方面有所研究。熟悉與本專業(yè)有關(guān)的法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)規(guī)范，并符合相應(yīng)專業(yè)工作崗位條件：(1)調(diào)劑及藥事管理：掌握與常見疾病有關(guān)的藥物治療學(xué)、臨床藥理學(xué)、病理生理學(xué)的基本理論知識，對合理用藥、藥物相互作用及藥品不良反應(yīng)等方面有較深入了解；熟悉醫(yī)院藥事管理的組織機(jī)構(gòu)和工作程序。(2)制劑與藥檢：掌握藥劑學(xué)、生物藥劑學(xué)、藥物化學(xué)、藥物分析的基本理論知識；熟悉常用儀器設(shè)備的使用與保養(yǎng)。相關(guān)理論知識熟悉生物化學(xué)、分析化學(xué)、微生物學(xué)、常見病的基本理論知識。有計(jì)算機(jī)應(yīng)用的基本知識和操作技能，并符合相應(yīng)專業(yè)工作崗位條件：(1)調(diào)劑及藥事管理：熟悉醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)、藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)知識；充分了解《藥品管理法》及相關(guān)醫(yī)院藥事管理法規(guī)。(2)制劑與藥檢：熟悉醫(yī)院制劑生產(chǎn)質(zhì)量控制程序和操作方法；了解建立質(zhì)量評價(jià)與管理體系的基本要求；掌握常用儀器設(shè)備的工作原理和保養(yǎng)知識。學(xué)識水平較熟練運(yùn)用一門外語閱讀本專業(yè)外文期刊，了解本專業(yè)國內(nèi)外現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢，掌握新理論、新知識和新技術(shù)，并用于實(shí)踐。(二)工作經(jīng)歷與能力醫(yī)院藥學(xué)工作(1)從事本專業(yè)工作的經(jīng)歷：擔(dān)任主管藥師期間，平均每年參加本專業(yè)工作時(shí)間不少于40周。(2)從事本專業(yè)工作的能力：具有協(xié)助上級藥師進(jìn)行科室業(yè)務(wù)技術(shù)管理的能力，參與組織對臨床用藥的業(yè)務(wù)指導(dǎo)，并符合相應(yīng)專業(yè)工作崗位條件：a．調(diào)劑及藥事管理：熟練掌握藥品供應(yīng)、調(diào)配、制劑配制、質(zhì)量檢驗(yàn)等藥劑科日常工作；具備解決日常工作中疑難問題的能力。b．制劑與藥檢：熟練掌握制劑生產(chǎn)各環(huán)節(jié)工作規(guī)程，具有