20xx年醫(yī)學專題—第4章-細菌藥敏試驗及其耐藥表型檢測(編輯修改稿)
2025-11-16 00:28 本頁面
【文章內容簡介】 E test 法,細菌(x236。jūn)生長區(qū),E test 塑料(s249。li224。o) 條,橢圓形 細菌生長(shēngzhǎng) 抑制區(qū),256 128 8 016,判讀抑菌濃度 （MIC ug/ml),第三十四頁，共八十一頁。,E test 法,菌液制備及接種(jiēzh242。ng)均同紙片擴散法。 90mm平板上可放E試驗試條1 ～ 2條，140mm平板最多可放6條。 孵育溫度及時間同紙片擴散法。,第三十五頁，共八十一頁。,2024/11/13,36,E test 法,優(yōu)點 連續(xù)濃度梯度，與瓊脂稀釋法相關性好 影響因素少，穩(wěn)定性高 操作簡單，省時 缺點：昂貴(225。nggu236。) 用途：快生長菌，苛養(yǎng)菌，厭氧菌，酵母菌， 分枝桿菌,第三十六頁，共八十一頁。,2024/11/13,37,評價藥物(y224。ow249。)體外抗菌活性的指標,MIC50, MIC90, MIC 均值， MIC 范圍，R，I，S MIC50/ MIC90：MIC從小到大排列，位于第50 / 90百分位菌株的MIC值 單純比較MIC50，MIC90是片面的，還要同時看平均(p237。ngjūn)MIC及MIC范圍 同時結合R，I，S，(不同藥物血濃度不同，安全范圍不同),第三十七頁，共八十一頁。,細菌(x236。jūn)耐藥機制,細菌耐藥機制主要有四種： 產生一種或多種水解酶、鈍化酶和修飾酶； 抗生素作用的靶位改變，包括青霉素結合蛋白位點、DNA解旋酶、DNA拓撲異構酶Ⅳ的改變等； 細菌膜的通透性下降，包括細菌生物被膜的形成(x237。ngch233。ng)和通道蛋白丟失； 細菌主動外排系統(tǒng)的過度表達。 在上述耐藥機制中，第一、二種耐藥機制具有專一性，第三、四種耐藥機制不具有專一性。,第三十八頁，共八十一頁。,Β內酰胺酶,β內酰胺酶是一類水解青霉素、頭孢菌素類抗生素的滅活酶；該酶位于革蘭陽性球菌菌體外，革蘭陰性桿菌間質中； 檢測(jiǎn c232。)方法有微生物培養(yǎng)法、碘－淀粉法、頭孢硝噻吩紙片法。其中頭孢硝噻吩紙片法因為簡單、方便、快速，應用于臨床檢測(jiǎn c232。)。,第三十九頁，共八十一頁。,葡萄球菌(p t225。o qi jūn)屬 – 青霉素,CLSI M100S20. Table 2C.,第四十頁，共八十一頁。,誘導(y242。udǎo)β內酰胺酶的檢測,如果青霉素的藥敏結果出現(xiàn)以下情況，需要做誘導(y242。udǎo)β內酰胺酶的檢測 ： MIC ≤0.12 181。g/ml Zone diameter ≥29 mm,第四十一頁，共八十一頁。,誘導(y242。udǎo)β內酰胺酶試驗,苯唑西林(xī l237。n) (誘導劑),接種純菌落于瓊脂上 (例如，BAP, MHA) ； 貼223。內酰胺類紙片 (例如,苯唑西林, 頭孢西丁)； 孵育過夜； 測試(c232。sh236。)抑菌圈周圍的細菌； 如果β內酰胺酶陽性,報告青霉素R。,Pos,Neg,第四十二頁，共八十一頁。,超廣譜(ɡuǎnɡ pǔ)β內酰胺酶（ESBLs）,ESBLs是指由質粒介導的能水解(shuǐjiě)青霉素類、頭孢菌素類和單環(huán)?內酰胺類氨曲南的一類酶； ESBLs不能水解頭霉素類和碳青霉烯類藥物，能被克拉維酸、舒巴坦和他唑巴坦等?內酰胺酶抑制劑所抑制； ESBLs主要見于大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，此外也見于腸桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬、沙雷菌屬等其他腸桿菌科細菌、不動桿菌、銅綠假單胞菌。,第四十三頁，共八十一頁。,超廣譜(ɡuǎnɡ pǔ)β內酰胺酶（ESBLs）,紙片法，出現(xiàn)以下一種情況即可懷疑該菌株產生(chǎnshēng)ESBL （篩選陽性）： 頭孢泊肟≤17mm 頭孢他啶≤22mm 頭孢噻肟≤27mm 頭孢曲松≤25mm 氨曲南 ≤27mm,第四十四頁，共八十一頁。,超廣譜(ɡuǎnɡ pǔ)β內酰胺酶（ESBLs）,紙片法（表型確認試驗） 頭孢他啶和頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟和頭孢噻肟/克拉維酸。 任一復方制劑(zh236。j236。)的抑菌圈直徑與相應單藥抑菌圈直徑相差≥5mm時，即可判斷該菌產ESBL。,第四十五頁，共八十一頁。,超廣譜(ɡuǎnɡ pǔ)β內酰胺酶（ESBLs）,稀釋(xīsh236。)法，出現(xiàn)以下一種情況即可懷疑該菌株產生ESBL： 頭孢他啶或頭孢噻肟或頭孢曲松或氨曲南MIC≥2mg /mL 或頭孢泊肟MIC≥8mg /mL,第四十六頁，共八十一頁。,超廣譜(ɡuǎnɡ pǔ)β內酰胺酶（ESBLs）,稀釋法（表型確認試驗） 頭孢他啶和頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟和頭孢噻肟/克拉維酸。 任何一組酶抑制劑復方(f249。fāng)制劑的MIC值比相應單藥的MIC降低3個稀釋度者即可判定該菌為產ESBL菌株。,第四十七頁，共八十一頁。,AmpC酶的特征(t232。zhēng),AmpC酶是在革蘭陰性菌中發(fā)現(xiàn)的由染色體或質粒介導的水解頭孢菌素的Ⅰ型β內酰胺酶，可分為誘導酶和非誘導酶。 與ESBLs不同的是，AmpC酶對三代頭孢菌素耐藥但對四代頭孢菌素敏感且不被酶抑制劑克拉維酸所抑制，但其酶活性可被氯唑西林(xī l237。n)和硼酸抑制。,第四十八頁，共八十一頁。,AmpC酶的檢測(jiǎn c232。)方法,頭孢西丁三維試驗(sh236。y224。n)是檢測AmpC酶的經典方法； 除此之外，還有以硼酸化合物為抑制劑檢測肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌的AmpC酶、AmpC Disk、頭孢西丁瓊脂基礎法等。,第四十九頁，共八十一
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