花藥培養(yǎng)-(1)(編輯修改稿)
2024-11-04 02:53 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 生物,第二十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。,小孢子的發(fā)育時(shí)期(sh237。qī) 單核期：?jiǎn)魏嗽缙冢瑔魏送砥冢?雙核期：雙核早期，雙核晚期； 三核期：三核型花粉植物。,泉 州 師 范 學(xué) 院生物(shēngw249。),第三十頁(yè)，共六十七頁(yè)。,小孢子不同發(fā)育時(shí)期(sh237。qī)對(duì)胚狀體和愈傷組織誘導(dǎo)率的影響,愈傷組織誘導(dǎo)(y242。udǎo)率： 葡萄為例，四分體期為15％，單核期為1％，雙核期為0。 梨四分孢子期為26.3％，單核－雙核期為40％。,泉 州 師 范 學(xué) 院生物(shēngw249。),第三十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。,不同植物種類，誘導(dǎo)愈傷組織和胚狀體發(fā)生，均有適宜的小孢子發(fā)育(fāy249。)時(shí)期,泉 州 師 范 學(xué) 院生物(shēngw249。),第三十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。,〔1〕小孢子發(fā)育的第三期〔小孢子經(jīng)二次有絲分裂形成成熟花粉〕的初期是胚胎形成的臨界期。離體培養(yǎng)時(shí)，假設(shè)小孢子的發(fā)育期超越這一時(shí)期胚狀體就不能形成。Niesch(1968)提出，小孢子的雙核期，淀粉逐漸積累(jīlěi)形成，小孢子就不能再生成植物體。,〔2〕小孢子發(fā)育的過(guò)程中，花藥內(nèi)源激素的平衡不斷(b249。du224。n)改變，隨著花粉的成熟，激素平衡變得不適合小孢子的脫分化；或者隨著花粉成熟，花粉花粉脫分化必備的物質(zhì)消耗殆盡，因此，小孢子就不能再生成植物體。,原因(yu225。nyīn),泉 州 師 范 學(xué) 院生物,第三十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。,培養(yǎng)(p233。iyǎng)花藥之前，需要制片鏡檢，確定花粉發(fā)育時(shí)期。進(jìn) 行細(xì)胞學(xué)花粉發(fā)育時(shí)期的鏡檢。,花粉(huāfěn)發(fā)育時(shí)期的檢測(cè),〔1〕壓片染色法 A、醋酸洋紅：100ml，45%醋酸水溶液參加250ml燒杯，酒精燈上加熱到沸后，慢慢參加2g洋紅粉末，再加熱10分鐘，冷卻后參加數(shù)滴2％的鐵明礬溶液(r243。ngy232。)〔2g硫酸鐵鉀或硫酸鐵銨加水至100ml〕，暗紅色即可，濾紙過(guò)濾入棕色瓶中，置冰箱保存。 B、碘－碘化鉀：1g碘、2g碘化鉀加水稀釋至100ml。,（2）壓片染色法與花器官形態(tài)特征結(jié)合法,花粉單核晚期的煙草花蕾花萼與花冠等長(zhǎng),Different flower stages as used in anther culture. Stage 2 is the optimum stage of development for use in tobacco anther culture,泉 州 師 范 學(xué) 院生物,第三十四頁(yè)，共六十七頁(yè)。,花粉植株的形態(tài)(x237。ngt224。i)發(fā)生方式？,器官發(fā)生(fāshēng)型 花粉多細(xì)胞花粉粒細(xì)胞團(tuán)〔愈傷組織〕繼代培養(yǎng)單倍體植株。 胚狀體發(fā)生型 花粉多細(xì)胞花粉粒進(jìn)一步培養(yǎng)胚壯體釋放植物體。,泉 州 師 范 學(xué) 院生物(shēngw249。),第三十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。,花粉培養(yǎng)(p233。iyǎng)過(guò)程,花粉培養(yǎng) 從花藥中游離出花粉粒，通過(guò)培養(yǎng)使花粉粒脫分 化啟動(dòng)發(fā)育為單倍體植株的技術(shù)。 特點(diǎn)(t232。diǎn): 它可以防止花藥壁、藥隔及花絲等體細(xì)胞愈傷 組織的干擾，可以獲得大量的花粉植株。,花粉的別離與純化： 別離法：自然(z236。r225。n)散落法、擠壓法、機(jī)械游離法〔磁力攪拌〕 純 化：用不同孔徑的無(wú)菌篩子除雜。 茄子用270目screen,泉 州 師 范 學(xué) 院生物,第三十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。,微室培養(yǎng)(p233。iyǎng),平培養(yǎng)：花粉在固體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，使其形 成花粉胚狀體，最終分化為植株。 液體培養(yǎng): 懸浮培養(yǎng)，通氣性差。 雙層培養(yǎng)：上液體+下固體 看護(hù)(kānh249。)培養(yǎng)：花粉濾紙固體培養(yǎng)基 微室培養(yǎng)： 條件培養(yǎng)：在花藥培養(yǎng)基中參加失活的花藥提取物。,花粉(huāfěn)培養(yǎng)的方式：,泉 州 師 范 學(xué) 院生物,第三十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。,根本(jīběn)培養(yǎng)基,植物(zh237。w249。)種類不同對(duì)培養(yǎng)基的要求不同。如：,值得一提的是培養(yǎng)基中高濃度的NH4+顯著抑制花粉愈傷組織形成(x237。ngch233。ng)。鐵對(duì)花粉胚發(fā)育很重要。,培養(yǎng)基,泉 州 師 范 學(xué) 院生物,第三十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。,植物(zh237。w249。)激素的種類和濃度,必須結(jié)合植物種類和器官發(fā)生方式(fāngsh236。)來(lái)考慮,細(xì)胞分裂素和CM促進(jìn)花粉分化成胚狀體，生長(zhǎng)素類尤其是2,4D促進(jìn)愈傷組織形成(x237。ngch233。ng)，但2,4D抑制愈傷組織分化成胚狀體。,泉 州 師 范 學(xué) 院生物,第三十九頁(yè)，共六十七頁(yè)
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