[工學(xué)]花藥和花粉培養(yǎng)(編輯修改稿)
2024-11-09 19:55 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 （ 3）花粉培養(yǎng)方法 ? 液體培養(yǎng) 花粉濃縮液 含有 2倍培養(yǎng)密度的花粉懸浮液 固培 40℃ 熔化 等體積 含有單倍培養(yǎng)密度的花粉培養(yǎng)液 薄層 用蠟封 細(xì)胞團(tuán) 平板 培養(yǎng) 花粉平板培養(yǎng)示意圖 平板培養(yǎng)（ plate cultivation method) 平板培養(yǎng)（續(xù)） ? 植板率 = 100% ? Nitsch 等（ 1973）先后將曼陀羅和煙草花粉放在平板上培養(yǎng)，形成了胚，進(jìn)而分化成單倍體小植株 ? 優(yōu)點(diǎn)：便于對(duì)單個(gè)細(xì)胞標(biāo)記觀察 每個(gè)平板上接種的細(xì)胞數(shù)目 每個(gè)平板上形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù)目 花藥 花粉粒 細(xì)胞團(tuán) 固體培養(yǎng)基 潤濕的濾紙 ? Sharp等（ 1972）培養(yǎng)番茄花粉，形成了細(xì)胞無性系 看護(hù)培養(yǎng) (nurse cultivation method) 微室懸滴培養(yǎng)法 （ microchamber culture method) 花藥消毒 花藥裂開花粉散落 懸浮液5080粒/滴 蓋玻片 置于凹穴載玻片上 石蠟封片 細(xì)胞團(tuán) 靜置 一夜 收集 懸浮 1 滴 翻轉(zhuǎn) 25℃ 轉(zhuǎn)動(dòng) ? Kamega等用此法用甘藍(lán) 芥藍(lán)的 F1代成熟花粉培養(yǎng)獲得成功 ? 優(yōu)點(diǎn) 便于觀察 ? 缺點(diǎn) 培養(yǎng)基太少，水分易蒸發(fā)，培養(yǎng)基成分會(huì)發(fā)生變化，影響花粉細(xì)胞進(jìn)一步發(fā)育 條件培養(yǎng) (conditioned medium method) ? 在合成的培養(yǎng)基中加入失活的花藥提取物，接入花粉進(jìn)行培養(yǎng) ? 失活花藥的提取物中含有促進(jìn)花粉發(fā)育的物質(zhì)，有利于花粉培養(yǎng)成功 ? 目前，此法用的較多 花藥 +培養(yǎng)基 取出花藥，沸水，殺死細(xì)胞 研碎 離心 上清液無菌過濾 添加入培養(yǎng)基 培養(yǎng) 花粉植株 1周 花粉萌動(dòng) 液體培養(yǎng) ? 花粉懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng) ? 置于搖床上震蕩，使其處于良好的通氣狀態(tài) （ 1）培養(yǎng)方法 ? 瓊脂固體培養(yǎng)法 培養(yǎng)基中加入 %瓊脂，呈半固體狀態(tài)，花藥 1/3浸入培養(yǎng)基中而不沉沒為宜 液體培養(yǎng)法 ? 直接將花藥接入呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基中 注意事項(xiàng) 通氣狀況 少量加液體培養(yǎng)基成一薄層，使花藥浮于液面，與空氣接觸 加入聚蔗糖，增加比重，使花藥不下沉浮于液面上 及時(shí)轉(zhuǎn)移沉入底部的長大的愈傷組
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1