【文章內(nèi)容簡介】 B AabB AAbb Aabb ab aAbB aabB aAbb aabb 例子： 二倍體供體植株基因型為 AaBb，若要從后代中選擇基因?yàn)?AAbb的純合單株 單倍體方法 ： AAbb出現(xiàn)的概率為 1/4。 單倍體 二倍體 AB AABB aB aaBB Ab AAbb ab aabb 供體親本AaBb 花培 ，對育種學(xué)及遺傳基礎(chǔ)研究都有很重要的意義。 四 .前景展望 改進(jìn)，有可能最終消除或大大減少花培藥養(yǎng)基因型的限制。 ，可以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化，外源基因在后代中不易丟失或發(fā)生致命的突變，是很有前途的研究領(lǐng)域。 1999，美國洛克菲勒基金會的 Toneeson在 Science 撰文指出， 現(xiàn)代生物技術(shù)育種的兩大支柱是基因工程育種和與分子標(biāo)記相結(jié)合的加倍單倍體育種（ DH育種）， 后者效率高，成本低，特別適合于發(fā)展中國家的國情。 第四節(jié) 玉米組織培養(yǎng) 主要內(nèi)容： ? 植物組織培養(yǎng)的意義 . ? 玉米組織培養(yǎng)的目的 . ? 研究進(jìn)展 . ? 目前玉米組織培養(yǎng)的主要方法 . 植物組織培養(yǎng)的意義 ? 植物組織培養(yǎng)可以生產(chǎn)大量的優(yōu)良無性系 . ? 細(xì)胞融合可打破種屬間的界限，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性障礙 . ? 可獲得單倍體、三倍體及其它多倍體、非整倍體 . ? 組織培養(yǎng)的植物細(xì)胞也成為在細(xì)胞水平上分析研究的理想材料 . 玉米組織培養(yǎng)的目的 ? 玉米組織培養(yǎng)的目的是讓外植體能夠高頻率地誘導(dǎo)出愈傷組織，建立高效 的體細(xì)胞再生體系 ，為玉米遺傳轉(zhuǎn)化和細(xì)胞工程研究創(chuàng)造有利條件 。 玉米組織培養(yǎng)的研究回顧 ? Larue在 1949年用甜玉米的胚乳作外植體 ， 首次誘出玉米愈傷組織 ， 但未獲得再生植株 。 ? 1975年， Green和 Phillips首次用 A188的幼胚作外植體 ， 誘導(dǎo)出二倍 體 愈傷組織 ，并再生得 到第一株無性系植株。 玉米組織培養(yǎng)的研究現(xiàn)狀 ? 現(xiàn)在已經(jīng)能從多種外植體中誘導(dǎo)出愈傷組織，并再生出植株。例如：幼胚、花 藥、幼穗等，其中幼胚是最易誘導(dǎo)，也是目前最常用的外植體。 玉米組織培養(yǎng)的主要方法（簡介） 玉米花粉和花藥組織培養(yǎng) 玉米花粉和花藥的培養(yǎng)一般可獲取單倍體植物，有利于促進(jìn)玉米遺傳育種工作的有效進(jìn)展。 玉米莖尖和根尖離體培養(yǎng) 玉米植株的根尖和莖尖分生組織具有良好的分化性能。玉米莖尖和根尖離體培養(yǎng)有利于促進(jìn)完整玉米植株的生長 ,并且在取材上不受季節(jié)限制。 玉米幼胚的組織培養(yǎng) 玉米幼胚屬于二倍體， 且分生能力較強(qiáng)。幼胚是最易誘導(dǎo)， 也是目前最常用的外植體， 但幼胚取材的時(shí)間受到嚴(yán)格的季節(jié)限制。 玉米幼胚組織培養(yǎng)的全過程 準(zhǔn)備工作 ? 接種室消毒 ? 準(zhǔn)備誘導(dǎo)培養(yǎng)基（ N6+肌醇 +L脯氨酸+蔗糖 30g/L+瓊脂 7g/L+水解酪蛋白+2,4D2mg/mL) ? 滅菌 外體消毒及挑幼胚 75%酒精擦玉米外層葉片 至超凈工作臺，用 75%酒精擦玉米外層葉片，剝一層擦一層至完 用刀去掉 1/3玉米籽粒 挑幼胚 接種到準(zhǔn)備好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上 （暗培養(yǎng)） 繼代 ? 準(zhǔn)備繼代培養(yǎng)基 (N6+水解酪蛋白 +L脯氨酸 +甘露醇 20g/L+蔗糖 30g/L+瓊脂 +2,4D1mg/ml) ? 誘導(dǎo)兩次后，轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基每 7天繼代一次，直至出透明、黃色、堅(jiān)硬的愈傷組織，可用于轉(zhuǎn)化 （一般繼代三次 ） 轉(zhuǎn)化 ? 侵染培養(yǎng)（ 2225℃ ，暗培養(yǎng) 3天） ? 恢復(fù)培養(yǎng)（暗培養(yǎng) 3天） ? 篩選培養(yǎng) ? 分化培養(yǎng) ? 生根培養(yǎng) ? 壯苗 移栽及管理 ? 移栽前，應(yīng)對移栽用的基質(zhì)進(jìn)行滅菌。 ? 移栽前，可將培養(yǎng)物不開口移到自然 光照下鍛煉 23天，然后再開口練苗 12天，以適應(yīng)將來自然濕度的條件。 ? 玉米組培苗移栽時(shí)首先應(yīng)把根部的培養(yǎng)基清洗干凈，以免受細(xì)菌或真菌污染而影響幼苗生長。 ? 移栽 玉米莖尖組織培養(yǎng)的全過程 準(zhǔn)備工作 ? 接種室消毒 ? 準(zhǔn)備培養(yǎng)基（ MS+蔗糖 30g/L+瓊脂 ) ? 滅菌 玉米種子消毒 a)在 500ml三角瓶中裝入 200— 300粒玉米種子 b)用 75%酒精清洗 8min c)%升汞 5min d)無菌水洗 2遍 e)加入無菌水靜置 8h f)%升汞 8min g)無菌水洗 5遍 h)裝入鈑盒 i)28℃ 暗培養(yǎng) 3天 接種 ? 取出培養(yǎng)三天后的種子，接種到 MS固體培養(yǎng)基中，根向下伸入培養(yǎng)基中，芽向上，芽萌發(fā)得不太好的繼續(xù)放進(jìn)飯盒中再培養(yǎng)。 ? 接種到 MS固體培養(yǎng)基中的芽放回 28℃ 暗培養(yǎng) 34天。 玉米莖尖轉(zhuǎn)化 ? 取出 MS固體培養(yǎng)基中的芽放在無菌濾紙上 ? 切根 ? 鑷子夾胚軸，在莖尖處用刀尖切半邊。 ? 在莖尖生長點(diǎn)劃一小口。 ? 轉(zhuǎn)化后，接種于 MS培養(yǎng)基中，進(jìn)行暗培養(yǎng) 。 移栽及其管理 培養(yǎng) 3—5天后，將其移栽至至花盆中，其 中注意事項(xiàng)與前面的相同。后期的管理也于前者相近。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 第五節(jié) 馬鈴薯的脫毒培養(yǎng) 目的要求 : (1)掌握馬鈴薯脫毒培養(yǎng)的大致過程， 了解馬鈴薯脫毒苗的鑒定方法 。 (2)掌握馬鈴薯的生物學(xué)習(xí)性： (3)熟悉微型薯的生產(chǎn)過程 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 微型薯 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 馬鈴薯是一種全球性的重要經(jīng)濟(jì)作物。適應(yīng)性廣，營養(yǎng)價(jià)值高，耐貯藏適運(yùn)輸，既是一種重要的糧食作物也是一種調(diào)節(jié)市場供應(yīng)的重要蔬菜。馬鈴薯原產(chǎn)于拉丁美洲，當(dāng)被發(fā)現(xiàn)可以食用后，很快傳到世界各地，成為栽培很廣的一種作物。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 但是， 當(dāng)發(fā)現(xiàn)從外地引種栽培 1~2個(gè)周期后，明顯發(fā)現(xiàn)產(chǎn)量降低，植株變矮，并有卷葉的現(xiàn)象產(chǎn)生，經(jīng)檢測證明這是由于病毒引起的退化現(xiàn)象。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 危害馬鈴薯的病毒有 17種之多，如 X病毒、 S病毒、 Y病毒、 M病毒