【正文】 50ml，加蒸餾水定容至 1L。H2O） （ 或 ） ZnSO4 第一節(jié) 農(nóng)作物組織培養(yǎng)的意義、方法與應(yīng)用 ? 對繁殖系數(shù)低的 “名、優(yōu)、新、奇、特 ”植物品種的推廣 ， 蘭花、安祖花、馬蹄蓮、甘薯、草莓、香蕉、甘蔗、桉樹、非洲菊等經(jīng)濟(jì)植物已開始工廠化生產(chǎn) ? 植物脫毒苗木培育 脫毒后的馬鈴薯、甘薯、甘蔗、香蕉等植物可大幅度提高產(chǎn)量，改善品質(zhì) ， 蘭花、水仙、大麗花等觀賞植物脫毒后植株生長勢強(qiáng)，花朵變大，產(chǎn)花量上升，色澤鮮艷 ? 植物新品種培育 基因工程育種 （ 抗蟲棉、抗除草劑大豆、玉米 ）， 單倍體育種 煙草單育 1號 、 水稻 “中花 8號 ”、 小麥 “京花 1號 ”， 遠(yuǎn)緣雜交 幼胚早期培養(yǎng) ， 原生質(zhì)體融合技術(shù) ， 選擇細(xì)胞突變體 ? 植物種質(zhì)資源的離體保存 超低溫離體保存植物種質(zhì)，可節(jié)約大量的人力、物力和土地，還可挽救那些瀕危物種 ? 人工種子 為某些珍稀物種的繁殖以及轉(zhuǎn)基因植物、自交不親和植物、遠(yuǎn)緣雜種的繁殖提供有效的手段 第二節(jié) 棉花組織培養(yǎng) ? 一、大量元素（ 20倍）母液 (g/L) 藥品 摩爾濃度 （ M/L） 質(zhì)量濃度 （ g/L） 5L母液所 需質(zhì)量 （ g）備注 KNO3 38 190 MgSO4 (MgSO47H2O) 19/37 KH2PO4 17 CaCl2 (CaCl27H2O 20倍母液 Ⅱ CoCl2 ? 鐵鹽母液配制（所用試劑均為國藥產(chǎn)品） B5有機(jī)物配制 （所用試劑均為 sigma產(chǎn)品） 藥品 摩爾濃度 （ M/L） 質(zhì)量濃度 （ g/L） 備注 FeSO4 花粉培養(yǎng)： 是將花粉從花藥中分離出來 ,接種到人工培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，以形成花粉胚或愈傷組織進(jìn)而分化成植株的過程。 19751998共審定 26個品種。 選擇合適的供體植株 倍性鑒定或染色體加倍 ? 花藥培養(yǎng) 取材 鏡檢，根據(jù)花粉的發(fā)育時期，選取大小適宜的花蕾。 水稻花藥培養(yǎng)由接種至長出愈傷圖 ? 花粉培養(yǎng) 與花藥不同，花粉培養(yǎng)需進(jìn)行 花粉的分離與純化 及 特殊的花粉誘導(dǎo)培養(yǎng)。 小孢子純化 對上述方法獲得的小孢子混合物進(jìn)行分級過篩、梯度離心處理純化小孢子 小孢子梯度離心前后比較 梯度離心前 （小孢子形態(tài)、活力不一致） 30%蔗糖梯度離心后 （獲得均一的小孢子群體） ? 花粉培養(yǎng)方式 平板培養(yǎng) 花粉置瓊脂固化培養(yǎng)基上培養(yǎng)。 看護(hù)培養(yǎng) 利用花藥或花藥愈傷組織釋放出的活性物質(zhì)促進(jìn)花粉小孢子發(fā)育。同一物種中的不同基因型對小孢子離體誘導(dǎo)反應(yīng)差異較大。 培養(yǎng)基 三明市農(nóng)科所生物技術(shù)中心以 M N6和 NB培養(yǎng)基， 進(jìn)行了不同水稻品種材料花培觀察比較試驗， 結(jié)果從出愈率、 綠苗分化率兩者比較， 還是 M8 培養(yǎng)基較適合。 郭書巧等提出對秈粳交材料 2 mg/L 2,4D+1 mg/L NAA+ mg/L KT為最佳的激素誘導(dǎo)配比， mg/L 6BA+ mg/L KT分化效果較好。 （ 4）培養(yǎng)條件 溫度、光照、密度 染色體直接計數(shù)法 通常取根尖、莖尖等分生組織區(qū)進(jìn)行制片，直接計數(shù)染色體數(shù)目。 （ 4）雜交鑒定法 自交或測交鑒定，看后代分離情況確定二倍體植株是來自小孢子還是體細(xì)胞。 單倍體 二倍體 AB AABB aB aaBB Ab AAbb ab aabb 供體親本AaBb 花培 ，對育種學(xué)及遺傳基礎(chǔ)研究都有很重要的意義。 第四節(jié) 玉米組織培養(yǎng) 主要內(nèi)容： ? 植物組織培養(yǎng)的意義 . ? 玉米組織培養(yǎng)的目的 . ? 研究進(jìn)展 . ? 目前玉米組織培養(yǎng)的主要方法 . 植物組織培養(yǎng)的意義 ? 植物組織培養(yǎng)可以生產(chǎn)大量的優(yōu)良無性系 . ? 細(xì)胞融合可打破種屬間的界限，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性障礙 . ? 可獲得單倍體、三倍體及其它多倍體、非整倍體 . ? 組織培養(yǎng)的植物細(xì)胞也成為在細(xì)胞水平上分析研究的理想材料 . 玉米組織培養(yǎng)的目的 ? 玉米組織培養(yǎng)的目的是讓外植體能夠高頻率地誘導(dǎo)出愈傷組織，建立高效 的體細(xì)胞再生體系 ，為玉米遺傳轉(zhuǎn)化和細(xì)胞工程研究創(chuàng)造有利條件 。例如：幼胚、花 藥、幼穗等，其中幼胚是最易誘導(dǎo)，也是目前最常用的外植體。 玉米幼胚的組織培養(yǎng) 玉米幼胚屬于二倍體， 且分生能力較強(qiáng)。 ? 玉米組培苗移栽時首先應(yīng)把根部的培養(yǎng)基清洗干凈，以免受細(xì)菌或真菌污染而影響幼苗生長。 ? 在莖尖生長點劃一小口。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 第五節(jié) 馬鈴薯的脫毒培養(yǎng) 目的要求 : (1)掌握馬鈴薯脫毒培養(yǎng)的大致過程， 了解馬鈴薯脫毒苗的鑒定方法 。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 但是， 當(dāng)發(fā)現(xiàn)從外地引種栽培 1~2個周期后，明顯發(fā)現(xiàn)產(chǎn)量降低，植株變矮，并有卷葉的現(xiàn)象產(chǎn)生，經(jīng)檢測證明這是由于病毒引起的退化現(xiàn)象。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 法國 Morel和他的同事們，1955年從患病馬鈴薯植株中選取到了無病植株，為治療作物病毒開辟了新途徑。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 （ 3）葉 馬鈴薯先出土的葉是初生葉，全緣，心臟形。種子小。地上莖葉生長溫度為 17~21℃ ，25℃ 以上時生長不良，葉變小，超過 30℃ 和 7℃ 以下莖葉停止生長， 1℃ 時受凍。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 馬鈴薯生產(chǎn)中普遍存在有種性退化問題，表現(xiàn)為植株長勢衰弱，株形矮化，分枝變少，薯塊變小，產(chǎn)量逐降低，造成退化的原因和學(xué)說多種，綜合而言，主要是薯塊生長錐細(xì)胞發(fā)生階段性衰老而導(dǎo)致種性退化，而病毒和細(xì)菌病害的侵染，以及肥水、營養(yǎng)條件不良等都會加劇其退化程度。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 因此，采用組織培養(yǎng)技術(shù)，通過一定良種繁殖體系，生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種薯，是保證馬鈴薯高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的一項有效措施。造成如此大的差別，最主要的因素就是種薯質(zhì)量差，品種布局不合理。 八五 期間，農(nóng)業(yè)部在全國范圍內(nèi)設(shè)立了 6個馬鈴薯原原種基地建設(shè)和種薯生產(chǎn)項目，初步形成了脫毒草種薯生產(chǎn)體系。