基因工程的操作過程(ppt62頁)(編輯修改稿)
2025-01-25 17:54 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ?????? __________啟動子????? 位置：基因的 _____功能：是 _______________ 識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出 ____________________ ????? 位置：基因的 _____功能：終止 _____標(biāo)記基因： _____ 受體細(xì)胞中是否含有 __________ 目的基因 首端 RNA聚合酶 mRNA 終止子 尾端 轉(zhuǎn)錄 鑒別 目的基因 上一頁 返回首頁 下一頁2 ． 基因表達(dá)載體的功能 (1) 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以 _____ 給下一代。 (2) 使目的基因 _____ 和發(fā)揮作用。 ( 二 ) 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1 ． 轉(zhuǎn)化含義： __________ 進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi) __________和 _____ 的過程。 2 ． 轉(zhuǎn)化方法 (1) 導(dǎo)入植物細(xì)胞 ① 最常用方法 _______________ ：雙子葉植物或 _____ 植物。 遺傳 表達(dá) 目的基因 維持穩(wěn)定 表達(dá) 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 裸子 上一頁 返回首頁 下一頁② 其他方法 a ．基因槍法： _____________ 。 b ．花粉管通道法。 (2) 導(dǎo)入動物細(xì)胞 ① 常用方法： __________ 技術(shù)。 ② 常用受體細(xì)胞： _____ ___ 。 單子葉植物 顯微注射 受精卵 上一頁 返回首頁 下一頁(3) 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 ① 方法 a ．用 _______ 處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中 DNA 分子的生理狀態(tài) ( 這種細(xì)胞稱為 _______________ ) 。 b ．感受態(tài)細(xì)胞吸收 _________________________ 。 ② 受體細(xì)胞：原核細(xì)胞 ( 使用最廣泛的是大腸桿菌 ) 。 ③ 原核生物的特點(diǎn)：繁殖快、多為單細(xì)胞、 __________ __ _________ 等。 Ca 2 ＋ 感受態(tài)細(xì)胞 重組表達(dá)載體 DNA分子 遺傳物質(zhì)相對較少 上一頁 返回首頁 下一頁[ 合作探討 ] 探討 1 ：用于構(gòu)建基因表達(dá)載體的質(zhì)粒為什么必須具有啟動子和終止子？啟動子和終止子與起始密碼和終止密碼是一回事嗎？ 提示： 導(dǎo)入到受體細(xì)胞的目的基因的表達(dá)需要調(diào)控序列，因此在插入目的基因的部位之前需有啟動子，之后需有終止子。不是一回事，啟動子和終止子都在 DNA 上，在遺傳信息轉(zhuǎn)錄時(shí)起作用。啟動子是啟動轉(zhuǎn)錄的開始，終止子是DNA 分子上決定轉(zhuǎn)錄停止的一段 DNA 序列，其組成單位都是脫氧核苷酸。而起始密碼子和終止密碼子都是 m RNA 上三個(gè)相鄰堿基。起始密碼子決定翻譯的開始，終止密碼子決定翻譯的停止。 上一頁 返回首頁 下一頁探討 2 ：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用了農(nóng)桿菌的什么特性？ 提示： 農(nóng)桿菌中的 Ti 質(zhì)粒上的 T D N A ( 可轉(zhuǎn)移的 DNA) 可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞的染色體 D NA 上。 探討 3 ：植物基因工程常用的受體細(xì)胞為什么可以是體細(xì)胞，而動物基因工程一般只用受精卵？ 提示： 植物體細(xì)胞的全能性較高，可經(jīng)植物組織培養(yǎng)過程形成完整植物體，因此受體細(xì)胞可以是體細(xì)胞；動物體細(xì)胞的全能性受到嚴(yán)格限制，因此動物基因工程中的受體細(xì)胞一般只用受精卵。 上一頁 返回首頁 下一頁[ 思維升華 ] 1 ． 基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程 將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，再加入適量 DNA 連接酶，形成一個(gè)重組 DNA 分子 ( 重組質(zhì)粒 ) 。構(gòu)建過程如下圖所示： 上一頁 返回首頁 下一頁2 ． 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法比較 生物類型 植物 動物 微生物 受體 細(xì)胞 體細(xì)胞 受精卵 原核細(xì)胞 常用 方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法 顯微注射技術(shù) 感受態(tài)細(xì)胞法 上一頁 返回首頁 下一頁轉(zhuǎn)化 過程 以農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法為例： 將目的基因插入 Ti 質(zhì)粒的T DN A 上 ↓ 轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中 ↓ 導(dǎo)入植物細(xì)胞 ↓ 整合到受體細(xì)胞的 DNA 上 提取含目的基 因的表達(dá)載體 ↓ 顯微注射 ↓ 受精卵發(fā)育 ↓ 具有新性 狀的個(gè)體 Ca2 ＋處理細(xì)胞 ↓ 感受態(tài)細(xì)胞 ↓ 基因表達(dá)載體與 感受態(tài)細(xì)胞混合 ↓ 感受態(tài)細(xì)胞 吸收 DNA 分子 上一頁 返回首頁 下一頁1 ． 下列關(guān)于基因表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)敘述，不正確的是 ( ) A ．需要限制酶和 DNA 連接酶 B ．必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行 C ．抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因 D ．啟動子位于目的基因的首端 上一頁 返回首頁 下一頁【解析】 基因表達(dá)載體的構(gòu)建是指目的基因與載體結(jié)合，在此過程中需用同一種限制酶切割目的基因與載體，用 DNA 連接酶將相同的末端連接起來；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是在細(xì)胞外進(jìn)行的；基因表達(dá)載體包括啟動子 ( 位于基因首端使轉(zhuǎn)錄開始 ) 、終止子、目的基因和標(biāo)記基因 ( 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，如抗生素抗性基因 ) 。 【答案】 B 上一頁 返回首頁 下一頁2 ．采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是 ( ) 【 導(dǎo)學(xué)號： 72240005 】 ① 將毒素蛋白注射到棉受精卵中 ② 將編碼毒素蛋白的 DNA 序列，注射到棉受精卵中 ③ 將編碼毒素蛋白的 DNA 序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng) ④ 將編碼毒素蛋白的 DNA 序列，與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵 A ． ①② B ． ②③ C ． ③④ D ． ①④ 上一頁 返回首頁 下一頁【解析】 本題以抗蟲棉培育為材料背景，主要考查基因操作中的第三步—— 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。導(dǎo)入目的基因必須選擇恰當(dāng)?shù)妮d體，以保證導(dǎo)入目的 基因不被受體細(xì)胞降解，并成功地實(shí)現(xiàn)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯。 【答案】 C 上一頁 返回首頁 下一頁目 的 基 因 的 檢 測 與 鑒 定 1 ． 分子水平檢測 (1) 檢測轉(zhuǎn)基因生物 DNA 上是否插入了目的基因。 方法： _________________ 技術(shù)。 (2) 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 m R NA 。 方法： ______ 雜交技術(shù)。 (3) 檢測目的基因是
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