【文章內容簡介】 其是聚四氟乙烯 (po1ytetranuoroe thylene， PTFE)容器 。 ? 4． 使用勻漿器 、 搖床和超聲處理器時 ， 應該用一個結實透明的塑料箱覆蓋設備 ， 并在用完后消毒 。 可能的話 ， 這些儀器可在生物安全柜內覆蓋塑料罩進行操作 。 ? 5． 操作結束后 ， 應在生物安全柜內打開容器 。 ? 6． 應對使用超聲處理器的人員提供聽力保護 。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 組織研磨器的使用 ? 1． 使用玻璃研磨器時應戴手套 ， 并用一塊具有吸收性的軟物包住研磨器 。 塑料 (聚四氟乙烯 )研磨器更加安全 。 ? 2． 操作和打開組織研磨器時應當在生物安全柜內進行 。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 冰箱與冷柜的維護和使用 ? 1． 冰箱 、 低溫冷柜和干冰柜應當定期除霜和清潔 ，應清理出所有在儲存過程中破碎的安瓿和試管等物品 。 清理時應戴厚橡膠手套并進行面部防護 ， 清理后要對內表面進行消毒 。 ? 2． 儲存在冰箱內的所有容器應當清楚地標明內裝物品的學名 、 儲存日期和儲存者的姓名 。 未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄 。 ? 3． 應當保存一份凍存物品的清單 。 ? 4．除非采用有效防爆措施，否則冰箱內不能放置易燃溶液并冰箱門上應明確標示。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 裝有凍干感染性物質安瓿的開啟 ? 當打開裝有凍干物的安瓿時必須小心 ， 因為其內部可能處于負壓 ， 瞬間進入的空氣可能使一些物質擴散進入空氣 。 安瓿應該在生物安全柜內打開 ，建議按下列步驟打開安瓿： ? 1． 首先清除安瓿外表面的污染 。 ? 2． 如果管內有棉花或纖維塞 ， 可以在管上靠近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡 。 ? 3． 用一團酒精浸泡的棉花將安瓿包起來以保護雙手 ，然后手持安瓿從標記的銼痕處打開 。 ? 4． 將頂部小心移去并按污染物處理 。 ? 5． 如果塞子仍然在安瓿上 ， 用消毒鑷子除去 。 ? 6．緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物，避免出現(xiàn)泡沫。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 裝有感染性物質安瓿的儲存 ? 裝有感染性物質的安瓿不能浸入液氮中 ， 因為這樣會造成有裂痕或密封不嚴的安瓿在取出時破碎或爆炸 。 如果需要低溫保存 ， 安瓿應當儲存在液氮上面的氣相中 。 此外 ， 感染性物質應儲存在低溫冰柜或干冰中 。 當從冷凍儲存器中取出安瓿時 ， 實驗室工作人員應當進行眼睛和手的防護 。 以這種方式儲存的安瓿在取出時應對外表面進行消毒 。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 樣品的收集 、 標記和運輸 ? 1． 始終遵循常規(guī)預防措施；所有操作均要戴手套 ? 2． 應當由受過培訓的人員來采集病人或動物的血樣 。 ? 3． 在靜脈抽血時 ， 應當使用一次性的安全的抽真空設備取代傳統(tǒng)的針頭和注射器 ， 因為這樣可以使血液直接采集到帶塞的運輸管和／或培養(yǎng)管中 。 用完后自動廢棄針頭 。 ? 4．裝有樣品的試管應置于適當容器中運至實驗室，在實驗室內部轉運也應這樣說明書應當分開放置在防水袋或信封內。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 玻璃器皿和 “ 銳器 ” ? 1． 盡可能用塑料制品代替玻璃制品 。 只能用實驗室級別 (硼硅酸鹽 )的玻璃 ， 任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應丟棄 。 ? 2． 不能將皮下注射針作為移液管使用 。 可以使用鈍頭導管 。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 用于顯微觀察的薄膜和涂片 ? 用于顯微觀察的血液 、 唾液和糞便樣品在固定和染色時 ， 并不必殺死涂片上的所有微生物和病毒 。應當用鑷子拿取這些東西 ， 恰當儲存 ， 并經清除污染和／或高壓滅菌后再丟棄 。 ? 自動化儀器 (超聲處理器 、 渦旋混合器 ) ? 1． 為了避免液滴和氣溶膠的擴散 ， 這些儀器應采用封閉型的 。 ? 2． 排出物應當收集在封閉的容器內進一步高壓滅菌和／或廢棄 。 ? 3，在每一步完成后應根據(jù)操作指南對儀器進行消毒。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 組織 ? 1． 組織樣品應當采用福爾馬林固定 。 小塊樣品 ， 如針頭活檢樣品 ， 能夠在幾個小時內固定和消毒 ， 但是較大樣品則可能需要幾天時間 。 ? 2．應當避免冰凍切片。如果必須進行冰凍切片，應當罩住冰凍機，操作者要戴安全防護罩 (面具 )。清除污染時，儀器的溫度要升至 20~C。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 生物安全實驗室消毒與滅活 ? 消毒和滅菌的基本常識對于實驗室生物安全是至關重要的。生物安全中關于清除污染的特殊要求要根據(jù)實驗工作的類型和所操作感染性物質的特性來決定。因此，有必要利用已知的普通信息來確立更具體的和標準化的程序，以滿足某些特殊實驗室中各種不同生物危害水平的需求。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 清除局部環(huán)境的污染 ? 需要聯(lián)合應用液體和氣體消毒劑來清除實驗室空間 、 用具和設備的污染 。 清除表面污染時可以使用次氯酸鈉 (Na0C1)溶液；含有 1％ 有效氯的溶液適于普通的環(huán)境衛(wèi)生設備 ， 但是當處理高危環(huán)境時 ， 建議使用高濃度 (5g／ L)溶液 。 用于清除環(huán)境污染時 ， 含有 3％ 過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品 ?？梢酝ㄟ^加熱多聚甲醛或煮沸福爾馬林所產生的甲醛蒸氣熏蒸來清除房間和儀器的污染 。 產生甲醛蒸氣 。 前 ， 房間的所有開口 (如門窗等 )都應用密封帶或類似物加以密封 。 熏蒸應當在室溫不低于 21℃ 且相對濕度 70 ％ 的條件下進行清除污染時氣體需要與物體表面至少接觸 8小時 。 熏蒸后 ， 該區(qū)域必須徹底通風后才能允許人員進入 。 在通風之前需要進入房間時 ， 必須戴適當?shù)姆蓝久婢?。 可 以采用氣態(tài)的碳酸氫銨來中和甲醛 。 已有報道 ， 可采用過氧化氫溶液的氣霧熏蒸污染的空間 ， 但對此還需要進一步的研究 。 ? 注：甲醛是一種危險和有刺激性的氣體，并懷疑有致癌性。應使用具有供氣系統(tǒng)的全面罩式防毒面具。操作時應當采用“雙人”制。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 生物安全柜污染的清除 ? 清除 I級和 Ⅱ 級生物安全柜的污染時 ， 應當將適量的多聚甲醛 (空氣中的終濃度達到 0． 8％ )放在電熱板或電熱盤上 (在生物安全柜外進行控制 )。 然后在生物安全柜內放置第二個放有比多聚甲醛多 10 ％的碳酸氫銨的加熱板或盤 。 第二個盤上覆蓋一個能夠從遠處將其移走的蓋子 (如連接一個能夠從生物安全柜外拉動的繩子 )， 從而盡量減少對甲醛氣體的提前中和 。 如果相對濕度低于 70 ％ ， 在使用強力膠帶[如 “ 管道密封膠帶 ” (ducttape)]密封前部封閉板前 ， 還要在安全柜內部放置一個開口的盛有熱水的容器 。 如果前部沒有封閉板 ， 則可以用重型塑料布(heavy gaugeplastic， heeting)粘貼覆蓋在前部以保證氣體不會泄漏進入房間 。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 打開多聚甲醛盤的加熱開關， 1小時后或多聚甲醛完全蒸發(fā)后關閉。讓生物安全柜靜置過夜。移去第二個盤子的蓋后打開加熱開關，讓碳酸氫銨揮發(fā)。然后，關閉開關并啟動安全柜讓碳酸氫銨氣體循環(huán) 1小時。移去前封閉板 (或塑料布 )后就可以使用生物安全柜了。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 洗手／清除手部污染 ? 接觸生物危害性材料時 ， 必須戴合適的手套 。 但是這并不能代替實驗室人員需要經常地 、 徹底地洗手 。接觸過生物危害性材料和動物后 、 使用過衛(wèi)生間后 、離開實驗室前以及吃東西前都必須洗手 。 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 大多數(shù)情況下 ， 用普通的肥皂和水徹底沖洗對于清除手部污染就足夠了 。 但在高度危險的情況下 ， 建議使用殺菌肥皂 。 手要完全抹上肥皂 ， 搓洗至少 10秒鐘 ， 用干凈水沖洗后再用干凈的紙巾或毛巾擦干(如果有條件 ， 也推薦使用暖風干手器 )。 ? 推薦使用腳控或肘控的水龍頭 。 如果沒有安裝 ， 應使用紙巾或毛巾關上水龍頭以防止再度污染洗凈的手 。 如上所述 ， 如果沒有條件徹底洗手或洗手不方便 ， ? 應該用酒精擦手來清除雙手的輕度污染 生物安全實驗室微生物操作技術規(guī)范 ? 加熱滅菌和消毒 ? 加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段