無(wú)菌室管理制度(編輯修改稿)
2024-09-04 10:01 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 3）※ 無(wú)菌及微生物限度檢查實(shí)驗(yàn)室管理藥檢文摘日期:2004811無(wú)菌及微生物限度檢查實(shí)驗(yàn)室管理一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施開(kāi)展無(wú)菌檢查及微生物限度檢查工作，首先要按照《藥品檢驗(yàn)所實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》及《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求，建立一個(gè)布局合理、使用方便、操作安全的無(wú)菌室，并且配有完善的實(shí)驗(yàn)設(shè)施和管理制度。無(wú)菌檢查、微生物限度檢查以及接種室（接種對(duì)照菌、菌種傳代）均應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)，具有危險(xiǎn)性的毒株、毒素如破傷風(fēng)梭菌、黃曲霉毒素的實(shí)驗(yàn)室需單獨(dú)使用，以便控制防止傳播。（一）無(wú)菌室1結(jié)構(gòu)與要求：無(wú)菌室不宜設(shè)在底層，防潮、防霉、采光好，遠(yuǎn)離交通干道，廁所及污染區(qū)，面積不超過(guò)10m2，高度不超過(guò)24m，由兩個(gè)緩沖間、操作間組成。操作間緩沖間之間應(yīng)有樣品傳遞窗，出入操作間和緩沖間的門不應(yīng)直對(duì)。無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)六面光滑平整，無(wú)縫隙，不起灰，不落塵，耐腐蝕，易清洗，墻壁與地面、墻壁與天花板連接處應(yīng)呈凹弧形，操作間不得安裝下水道。無(wú)菌室內(nèi)的照明燈應(yīng)嵌裝在天花板內(nèi)，采光面積要大，光照應(yīng)分布均勻，光照度不低于300勒克斯。緩沖間和操作間應(yīng)裝有紫外線殺菌燈（2－25w/m3）39。39。用于空氣消毒。紫外線波長(zhǎng)200－300nm者具有殺菌作用，其中以265－266nm殺菌作用最強(qiáng)，這與DNA的吸收光譜范圍一致，其殺菌機(jī)理可能是在細(xì)菌細(xì)胞DNA中引起胸腺嘧啶雙聚體形成，從而干擾細(xì)菌細(xì)胞DNA復(fù)制，導(dǎo)致細(xì)菌變異死亡。紫外線殺菌燈1m以內(nèi)距離殺菌效果最佳，每次開(kāi)燈照射時(shí)間為30min。應(yīng)定期檢查紫外線燈輻射強(qiáng)度，不得低于70μWcm21m距離。其缺點(diǎn)是穿透力弱，一張紙板可以阻礙光的透過(guò)，不能穿透固體物，故只能用作表面消毒及一些不耐熱或化學(xué)消毒劑物品的消毒。2溫度、濕度無(wú)菌室內(nèi)溫度和相對(duì)濕度直接影響紫外殺菌燈的殺菌效果，故溫度應(yīng)控制在25177。2℃，相對(duì)濕度40－60％。操作間或凈化工作臺(tái)的潔凈空氣應(yīng)保持對(duì)環(huán)境形成正壓，不低于49Pa。3操作間無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)安裝空氣除菌過(guò)濾層流裝置及調(diào)溫裝置。潔凈度要求：凈化工作臺(tái)潔凈度為100級(jí)，無(wú)菌室應(yīng)為10000級(jí)。操作間應(yīng)準(zhǔn)備乙醇燈（或煤氣燈），火柴，2％碘酊棉球及75％乙醇棉球、試管架、大小橡皮乳頭、砂輪、記號(hào)筆、無(wú)菌剪刀、鑷子、注射器等。微生物限度檢查無(wú)菌室操作間內(nèi)還應(yīng)有電子稱（感覺(jué)為01g，最大稱量為300g為宜），電動(dòng)勻漿儀等。4．緩沖間緩沖間內(nèi)應(yīng)有洗手盆，消毒液，無(wú)菌衣，帽，口罩，拖鞋等，緩沖間內(nèi)不應(yīng)放置培養(yǎng)箱和其他雜物。 物流緩沖操作臺(tái)人流緩沖無(wú)菌室ⅠⅡ操緩緩無(wú)菌室作沖沖臺(tái)操Ⅱ作無(wú)菌室緩臺(tái)沖Ⅰ緩沖（二）潔凈級(jí)別及檢查方法98年國(guó)家藥監(jiān)局頒布藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，把藥品生產(chǎn)潔凈區(qū)空氣潔凈度劃分為四個(gè)級(jí)別：空氣潔凈度級(jí)別表─────────────────────────────────────塵埃數(shù)／立方米活微生物數(shù)（個(gè)）潔凈級(jí)別──────────────────────────────≥05μm≥5μm浮游菌／立方米沉降菌／皿─────────────────────────────────────100級(jí)≤3500≤0≤5≤110000級(jí)≤35萬(wàn)≤2000≤100≤3100000級(jí)≤350萬(wàn)≤2萬(wàn)≤500≤10300000級(jí)≤1050萬(wàn)≤6萬(wàn)－≤15─────────────────────────────────────潔凈級(jí)別的檢查方法通常采用塵埃數(shù)及浮游菌數(shù)或沉降菌數(shù)測(cè)定法。塵埃數(shù)的測(cè)定：用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀測(cè)定，取樣高度離地面1米，間距052米，每個(gè)測(cè)試點(diǎn)連續(xù)采樣3－5次，儀器顯示測(cè)定結(jié)果。浮游菌數(shù)的測(cè)定，采用浮游菌測(cè)定儀。沉降菌數(shù)測(cè)定：方法：無(wú)菌室及凈化工作臺(tái)面消毒擦拭后，打開(kāi)層流凈化裝置及凈化工作臺(tái)開(kāi)關(guān)30min，將營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板3個(gè)及玫瑰紅鈉瓊脂平板3個(gè)（直徑9cm），置凈化工作臺(tái)左、中、右各1個(gè)，開(kāi)蓋暴露30min后將蓋蓋上，分別放在30－35℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h及25－28℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)72h，細(xì)菌和真菌平均菌落數(shù)小于等于1個(gè)為100級(jí)。實(shí)驗(yàn)室一旦被污染，潔凈度達(dá)不到要求，可以清洗或更換凈化工作臺(tái)過(guò)濾器，用甲醛或丙二醇、乳酸熏蒸消毒，方法：在支架上放一個(gè)燒杯（內(nèi)裝少許甲醛，8ml／平方米），下面放一個(gè)裝有少許乙醇的乙醇燈，點(diǎn)燃后，關(guān)閉門窗，乙醇用盡后燈自滅，甲醛蒸氣充滿無(wú)菌室，密閉24h。缺點(diǎn)：甲醛蒸氣易銹蝕儀器，對(duì)人有刺激，可用氨水噴霧中和，減少對(duì)人眼的刺激。二、實(shí)驗(yàn)室管理制度：為保證實(shí)驗(yàn)工作有序進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室必須制定一系列實(shí)驗(yàn)室管理制度。（一）實(shí)驗(yàn)室要求：1實(shí)驗(yàn)室環(huán)境應(yīng)清潔、衛(wèi)生、安靜，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙和飲食。2實(shí)驗(yàn)人員必須穿戴工作衣帽，工作服經(jīng)常洗滌、消毒、保持清潔。3操作前后或離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室必須用肥皂或消毒液洗手。4發(fā)生菌液污染臺(tái)面或地面，應(yīng)立即用3％甲醛或5％碳酸等消毒液由外向內(nèi)傾覆其上，1小時(shí)后再擦拭，如為破傷風(fēng)梭菌，則應(yīng)隔夜后再擦洗。5工作衣、帽、口罩受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫下使污染部位包裹在內(nèi)部，高壓滅菌后再清洗。6如有傳染性培養(yǎng)物污染手部，應(yīng)先用75％乙醇棉球擦拭，再浸入01新潔爾滅消毒液內(nèi)泡手，然后再用肥皂及清水徹底洗干凈。7接種環(huán)（針），每次使用前后，必須通過(guò)火焰滅菌，冷卻后方可接種培養(yǎng)物，接種帶有蠟質(zhì)、油質(zhì)的培養(yǎng)物或菌苔殘留多時(shí)，不應(yīng)立即在火焰上灼燒，應(yīng)先在內(nèi)焰里將油質(zhì)培養(yǎng)物烘干后再移至火焰上滅菌，以免活菌外濺污染環(huán)境及感染操作者。8帶菌的吸管應(yīng)浸泡在5％甲酚消毒液內(nèi)24h后取出清洗，帶菌的試管或培養(yǎng)物應(yīng)在121℃高壓滅菌后再取出清洗。9在接種霉菌、放線菌時(shí)應(yīng)在鋪有浸過(guò)消毒液的紗布上操作，防止孢子散落傳播。10凡帶活菌的物品，必須消毒后才能清洗，嚴(yán)禁污染下水道。（二）無(wú)菌操作要求：無(wú)菌操作是指在無(wú)菌的環(huán)境條件下，使用無(wú)菌器材，防止微生物污染的操作技術(shù)。即保持待檢樣品在操作時(shí)不被污染，又要防止被檢的微生物及陽(yáng)性對(duì)照菌在操作中
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