mrna差別顯示技術(shù)(編輯修改稿)
2025-08-31 22:50 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 目的 DNA，而是通過除去體系的其他 DNA，最終達(dá)到留下我們所需 DNA的目的。 基因芯片技術(shù)： 基因芯片技術(shù)也稱 DNA微陣列技術(shù)（ DNA microarray) ，實(shí)際上就是一種大規(guī) 模集成的固相雜交 ，是指在固相支持物上原位合成 (in situ synthesis)寡核苷酸或者直接將大量預(yù)先制備的 DNA探針 以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后與標(biāo)記的樣品雜交。通過對(duì)雜交信號(hào)的檢測(cè)分析，得出樣品的 遺傳信息 (基因序列及表達(dá)的信息 )。由于常用計(jì)算機(jī)硅芯片作為固相支持物，所以稱為 DNA芯片。 基因芯片 基因表達(dá)系列分析 基因表達(dá)系列分析（ SAGE）是通過 快速和詳細(xì)分析成千上萬(wàn)個(gè) EST（ express sequenced tags）來尋找出表達(dá)豐富度不同的 SAGE標(biāo)簽序列。在此方法中，通過限制性酶切可以產(chǎn)生非常短的 cDNA（ 1014bp）標(biāo)簽，并通過 PCR擴(kuò)增和連接，隨后對(duì)連接體進(jìn)行測(cè)序。 SAGE大大簡(jiǎn)化和加快了 3’端表達(dá)序列標(biāo)簽的收集和測(cè)序 . 噬菌體抗體庫(kù)技術(shù) 以噬菌體 (主要是絲狀噬菌體、 λ噬菌體和 T4噬菌體 )為載體 ,將抗體基因插入噬菌體編碼的外殼蛋白基因 PⅢ 或PⅥ 中 ,在噬菌體表面以抗體－外殼蛋白融合蛋白的形成表達(dá)。經(jīng)輔助病毒感染后 ,借助蛋白 PⅢ 的信號(hào)肽穿膜作用 ,進(jìn)入宿主外周基質(zhì) ,在正確折疊后被包裝于噬菌體尾部 ,隨后攜帶表達(dá)載體的宿主菌就會(huì)釋放出帶有抗體片段的噬菌體顆粒。此抗體可以特異性識(shí)別抗原 ,又能夠感染宿主菌進(jìn)行再擴(kuò)增 ,將 B細(xì)胞全套可變區(qū)基因克隆出來 ,組裝成噬菌體抗體的群體 ,則成為噬菌體抗體庫(kù)技術(shù) 。 雙向電泳技術(shù) 雙向電泳（ twodimensional electrophoresis）是 等電聚焦電泳 和 SDSPAGE（十二烷基磺酸鈉 — 聚丙烯酰胺凝膠電泳）的組合，即 先進(jìn)行等電聚焦電泳（按照 pI分離），然后再進(jìn)行 SDSPAGE（按照分子大小 ），經(jīng)染色得到的電泳圖是個(gè)二維分布的蛋白質(zhì)圖。第一向進(jìn)行等電聚焦，蛋白質(zhì)沿 pH梯度分離，至各自的等電點(diǎn)；隨后，再沿垂
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