轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)張年輝卿人韋吳俊20xx年10月21日(編輯修改稿)
2025-08-28 14:11 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 功能基因的表達(dá)進(jìn) ? 行精確的調(diào)控。而轉(zhuǎn)錄因子在基因的表達(dá)調(diào)控中起 ? 關(guān)鍵作用。 ? 二．釀酒酵母中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò) ? （一）研究方法： ? 全基因組位點(diǎn)分析 ，又稱為 全基因組結(jié)合分析（ genomewide location analysis or genomewide binding analysis）。 ? 1．步驟：甲醛固定細(xì)胞，收集，超聲裂解細(xì)胞 → 用特 ? 異的抗體進(jìn)行免疫沉淀以富集與某一蛋白交 ? 聯(lián)的 DNA片段 → 去除交聯(lián)，用連接介導(dǎo)的多 ? 聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ? （ ligationmediatedpolymerase chain reaction，LMPCR）擴(kuò)增富集的 DNA并用熒光染料（ Cy5， 紅色 ）標(biāo)記，未被免疫沉淀富集的 DNA在另一熒光染料（ Cy3，綠色 ）存在的情況下進(jìn)行 LMPCR→ 與含所有酵母基因間序列的單個(gè) DNA微陣列雜交。（ For details, please find at the following two web sites: 9/DC1。 ? 圖 1：酵母全基因組位點(diǎn)分析方法 ? 2．結(jié)果處理： singlearray error model. ? 對雜交結(jié)果進(jìn)行光密度掃描 → 得到相對結(jié)合比率，用singlearray error model去除噪聲，計(jì)算其置信值 →三次獨(dú)立試驗(yàn)結(jié)果經(jīng)加權(quán)平均處理得到該蛋白與微陣列上的每一序列的結(jié)合能力。 ? ?
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