第三十四章抗微生物藥物和敏感性試驗(yàn)(編輯修改稿)
2025-08-28 12:48 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 懸液接種等，與 MIC測定法相同。 八、監(jiān)控抗生素的治療效果試驗(yàn) （一）血清抗菌藥物濃度測定 血清抗菌藥物濃度和抗菌藥物療效密切相 關(guān)，為保證感染組織中有效濃度，血藥濃 度應(yīng)該達(dá)到致病細(xì)菌 MIC2倍以上。但某些 抗生素治療濃度和中毒濃度相近，過高的 血藥濃度引起毒性反應(yīng)，因而監(jiān)測血清抗 菌藥物濃度十分重要。 微生物測定法 與瓊脂擴(kuò)散法原理相似。用已知含藥濃度 的紙片加到混有一定指示菌懸液濃度的傾 注平板表面， 35℃ 孵育 16－ 20h，量取抑菌 圈直徑。以抑菌圈直徑為橫坐標(biāo)，含藥濃 度為縱坐標(biāo)，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后在標(biāo)準(zhǔn) 曲線找出體液測試的抑菌圈直徑相應(yīng)的含 藥濃度。 （二）血清抗菌活性測定 體內(nèi)抗菌藥物活力的測定方法即為抑菌 力和殺菌力測定，稱為血清殺菌活力試 驗(yàn)。 本法是取感染患者血液分離的血清對感 染部位分離確證的病原菌的抑菌和殺菌 能力，為供臨床現(xiàn)用抗菌藥的療效考核 評價(jià)以及感染預(yù)后的判斷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 采用體外抑菌試驗(yàn)和體外殺菌試驗(yàn)。無肉 眼可見菌生長的血清最高稀釋管代表患者 血清的抑菌力，其菌落計(jì)數(shù)等于或小于 ％ 最初接種菌量的血清最高稀釋管代表患者 血清殺菌力。血清抑菌力／殺菌力＞ 1： 8 常提示治療方案有效。 九、自動(dòng)化儀器檢測 Viter－ ATB系統(tǒng)和 Microscan是半自 動(dòng)或全自動(dòng)細(xì)菌鑒定和藥敏系統(tǒng)，通 過系統(tǒng)中藥敏專家系統(tǒng)可報(bào)告分離菌 的藥敏結(jié)果。 第三節(jié) 細(xì)菌耐藥性和產(chǎn)生機(jī)制 一、細(xì)菌的耐藥性 對某種抗菌藥物敏感細(xì)菌變成對該藥 物耐受稱細(xì)菌耐藥性。它可分為天然耐 藥和獲得性耐藥，前者是通過染色體 DNA 突變而致，后者往往是由質(zhì)粒。噬菌體 及其他遺傳物質(zhì)攜帶外來 DNA片段導(dǎo)致產(chǎn) 生的耐藥性。 突變可由細(xì)菌自發(fā)產(chǎn)生或在 X線等物理因素 或化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)產(chǎn)生，一般只對一種或兩 種相似藥物耐藥，在細(xì)菌耐藥性上不占主 要地位。接合型質(zhì)粒通過接合方式，非接 合型質(zhì)粒通過轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)換形式產(chǎn)生 耐藥 。 二、細(xì)菌耐藥性的生物化學(xué)機(jī)制 β －內(nèi)酰胺酶，水解藥物 β －內(nèi)酰 胺環(huán)而失去抗菌活性。 ，鈍化酶有三類： ① 氨基糖著類鈍化酶 ； ②氯霉素乙酸轉(zhuǎn)移酶； ③紅霉素酶和其他滅活酶。 親和力下降 。 合產(chǎn)生耐藥性。 ，如外膜蛋白減少 和藥物外排作用等。 。 第四節(jié) 細(xì)菌耐藥性檢查方法 一、細(xì)菌耐藥性表型檢測 某些特殊菌耐藥表型檢測的方法： （一）瓊脂篩選試驗(yàn) 以單一藥物單一濃度檢測耐藥性稱耐藥篩選試 驗(yàn)，臨床上常用于對耐甲氧西林葡萄球菌、耐 萬古霉素腸球菌，對慶大霉素或鏈霉素高水平 耐藥的腸球菌。在含一定濃度測試藥物的特殊 培養(yǎng)上，點(diǎn)種 0． 5麥?zhǔn)媳葷岫戎苯泳渑渲萍?xì) 菌懸液， 35℃ 孵育 24h后觀察平板上是否有菌 落生長識要有 1個(gè)菌落生長，均視為耐藥。 （二）折點(diǎn)敏感試驗(yàn) 僅用特定抗生素濃度（敏感、中介或耐藥 折點(diǎn) MIC）而不使用測定 MIC時(shí)所用系列對 倍抗生素濃度測試細(xì)菌對藥物的敏感性稱 折點(diǎn)敏感試驗(yàn)。當(dāng)選擇區(qū)分中介和耐藥折 點(diǎn)值藥物濃度時(shí)，若兩種抗藥物濃度培養(yǎng) 基均生長可判斷為耐藥；如在兩種藥物濃 度均不生長則為敏感；僅在較低藥物濃度 培養(yǎng)基中生長提示為中介。 （三）雙相紙片試驗(yàn) 挑取在血平板上菌落，稀釋成 0． 5 麥?zhǔn)? 濃度菌液。均勻涂布于 MH平板。中央貼 上阿莫西林 /克拉維酸紙片，在距該紙片 25mm處分別貼頭孢噻肟或頭孢曲松 、頭 孢他啶和氨曲南等藥敏紙片作為指示劑， 35℃ 孵育 18h觀察結(jié)果。若指示劑在朝向 阿莫西林 /克拉維酸方向有抑菌圈擴(kuò)大的 現(xiàn)象（協(xié)同現(xiàn)象），則說明待檢菌產(chǎn)生超 廣譜 β －內(nèi)酰胺酶。 （四）自動(dòng)化儀器 自動(dòng)化儀器 Microscan有測定抗菌藥物抑 菌的 MIC值功能。 原理是先測定細(xì)菌對抗生素的 MIC值，當(dāng)頭 孢他啶與頭孢他啶十克拉維酸的 MIC比值或 頭孢噻肟與頭孢噻肟十克拉維酸的 MIC比值 大于或等于 8（即 3個(gè)對倍稀釋度）即判定 為此細(xì)菌產(chǎn)生 ESBL。 二、 β －內(nèi)酰胺酶 檢測 用接種環(huán)挑取受試菌于商品化頭孢哨噻 吩濾紙片上，于 10分鐘內(nèi)由黃色轉(zhuǎn)變?yōu)? 紅色即陽性結(jié)果，示產(chǎn)色頭孢菌素的 β －內(nèi)酰胺環(huán)被酶打開。 2 .碘淀粉測定法 用接種環(huán)挑取受試菌混于青霉素溶液中， 室溫下振搖 30分鐘。加入淀粉液后，再加 入碘液，溶液變藍(lán)，繼續(xù)振搖。若檢測菌 產(chǎn)生酶，則可水解青霉素
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