【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 化合物在強(qiáng)堿性條件下與硫代水楊酸鈉作用，在經(jīng)過鐵氰化鉀氧化，生成紅色的硫靛化合物，檢出限為10ug。硫靛反應(yīng)操作簡(jiǎn)單方便，對(duì)于體外檢材和新鮮生物檢材效果為佳，但有些檢材基質(zhì)的存在或反應(yīng)條件控制不當(dāng)時(shí)會(huì)產(chǎn)生干擾，出現(xiàn)假陽性。必須同時(shí)做空白對(duì)照及已知對(duì)照試驗(yàn)，當(dāng)反應(yīng)結(jié)果為陽性時(shí)，應(yīng)進(jìn)一步用紫外分光光度法或薄層色譜法進(jìn)行檢驗(yàn)確證。硫靛反應(yīng)不能區(qū)分氟乙酰胺和氟乙酸鈉。④有機(jī)氮化合物（毒鼠強(qiáng)、毒鼠硅）毒鼠強(qiáng)中毒癥狀：類似癲癇大發(fā)作，陣發(fā)性、強(qiáng)直抽搐為毒鼠強(qiáng)中毒的典型癥狀。檢材采取和處理：對(duì)于體液、組織等生物檢材，比較常用的提取、凈化手段包括液液萃取法、固相萃取法、固相微萃取法幾種。檢測(cè)方法：因毒鼠強(qiáng)分子結(jié)構(gòu)中含氮和硫，檢測(cè)器可選用NPD、FPD或FID進(jìn)行檢測(cè)。最適宜檢材：血液。⑤有機(jī)磷類（毒鼠磷、溴代毒鼠磷）⑥氨基甲酸酯類（滅鼠安、滅鼠晴、鼠特靈）⑦硫脲類（安妥、抗鼠靈）⑧其他（煙酰胺代謝藥滅鼠優(yōu)、維生素B6拮抗劑鼠立死、降體溫藥α氯醛糖）二、無機(jī)化合物殺鼠劑：磷化鋅、碳酸鋇、三氧化二砷、硫酸鉈磷化鋅檢測(cè)：溴化汞試驗(yàn)：磷化鋅與溴化汞反應(yīng)生成黃色的化合物，檢出限為10ug。硝酸銀試驗(yàn)：磷化鋅與硝酸銀反應(yīng)生成黑色磷化銀沉淀，檢出限為1ug。鋅的檢測(cè)：雙硫腙反應(yīng)，即在PH11時(shí)，鋅離子與雙硫腙反應(yīng)生成紅色螯合物。三、熏蒸殺鼠劑：磷化氫、氫氰酸、二硫化碳四、天然植物性殺鼠劑：紅海蔥、馬錢子、曼陀羅、烏頭氣體毒物和揮發(fā)性毒物首選方法：氣相色譜法一、氣體毒物（代表：一氧化碳）碳氧血紅蛋白（HbCO）：進(jìn)入血液中的CO與血紅蛋白中的二價(jià)鐵結(jié)合，生成碳氧血紅蛋白，使血紅蛋白失去攜氧能力，導(dǎo)致組織缺氧和二氧化碳潴留二產(chǎn)生中毒癥狀。HbCO飽和度：血液中HbCO占血紅蛋白總量的百分比。是判斷一氧化碳中毒程度的重要指標(biāo)。HbCO%=（碳氧血紅蛋白含量/血紅蛋白總量）*100%。最佳檢材：心血（體表血不準(zhǔn)確，應(yīng)取身體深部的血液）。主要檢測(cè)方法：①化學(xué)法：包括煮沸法（HbCO飽和度達(dá)30%以上時(shí)刻順利檢出）、氫氧化鈉法（血液中HbCO的飽和度大于20%時(shí)）、微量擴(kuò)散法（該方法靈敏度較高，血液中HbCO飽和度在10%以上即可檢出）；②可見光分光光度法：各種形式的血紅蛋白在可見光區(qū)都有兩個(gè)吸收帶，420nm附近的第一吸收帶是強(qiáng)吸收，摩爾吸收系數(shù)105，第二吸收帶在500~600nm的波長(zhǎng)區(qū)域，吸收系數(shù)約為第一吸收帶的十分之一。在500~600nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)，HbCO和HbO2都是雙吸收峰，HbO2的兩個(gè)最大吸收峰波長(zhǎng)分別為540nm和576nm；HbCO的兩個(gè)最大吸收波長(zhǎng)分別為538nm和568nm。Hb是單吸收峰，最大吸收波長(zhǎng)為555nm。直接測(cè)定法：血液中HbCO在第一吸收帶的最大吸收波長(zhǎng)是419nm，在此處HbO2也有吸收，可將檢血（測(cè)定時(shí)不要求準(zhǔn)確取樣）稀釋200倍后分成三份。一份通入足量空氣使HbCO全部轉(zhuǎn)化成HbO2，得到HbCO飽和度為0%的血樣，在419nm處測(cè)得吸光度A0；一份通入CO制備使飽和度為100%的血樣，在相同條件下測(cè)得吸光度A100；另一份直接測(cè)定吸光度Ax；可按公式計(jì)算出檢血中HbCO的飽和度， HbCO% = （AxA0）/（A100/A0）*100%。雙波長(zhǎng)吸光度比值法（還原法）：一氧化碳中毒血經(jīng)Na2S2O4還原后血中只含有HbCO和Hb兩種組分，其吸收光譜是HbCO和Hb的加和。在第二吸收帶HbCO的最大吸收波長(zhǎng)之一是538nm；Hb的最大吸收波長(zhǎng)是555nm。隨著血中HbCO飽和度的增大，555nm處的吸光度減小，而538nm處的吸光度增大。538nm與555nm處的吸光度之比A538/A555也隨著HbCO飽和度的增高而增大，且有近似直線的關(guān)系，故可用后面公式計(jì)算血液中HbCO的飽和度，HbCO% = [（A538/A555）x ——（A538/A555）0] / [（A538/A555）100 ——（A538/A555）0]*100%。二、揮發(fā)性毒物（代表：乙醇）揮發(fā)性毒物：具有較高蒸汽壓，分子量小且能夠隨水蒸氣蒸餾的物質(zhì)。特點(diǎn)：能夠利用其自身的揮發(fā)性從檢材中分離出來。主要分離方法：①蒸餾法；②微量擴(kuò)散法；③驅(qū)氣與抽氣法；④頂空氣相色譜法（HS/GC）：一個(gè)密閉的系統(tǒng)中（頂空瓶），控制一定溫度使氣液兩相達(dá)到平衡，揮發(fā)性物質(zhì)在氣相中的濃度與其在液相中的濃度有一定比值。液相中的濃度高，氣相中的濃度也高。提高溫度可增大揮發(fā)性物質(zhì)在氣相中的濃度。抽取平衡體系中的氣體，注入氣相色譜，同時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照進(jìn)行分析。氰化物（氫氰酸）定性檢測(cè)主要方法：普魯士藍(lán)法，其原理是利用氫氰酸易揮發(fā)的特性。加酸使其從檢材中逸出，CN分別與Fe2+和Fe3+反應(yīng)生成普魯士藍(lán)。其反應(yīng)過程為：CN+H+→HCN↑，6HCN+Fe2++6OH→Fe（CN）46+6H2O，4Fe3++3Fe（CN）46→Fe4[Fe（CN）6]3（普魯士藍(lán)）適用于胃內(nèi)容物的鑒定。氫氰酸為“苦杏仁”氣味。 定性+定量主要方法：頂空氣相色譜（HS/GC/ECD）；衍生化試劑：氯胺T。乙醇（重點(diǎn)）：①Etg一定是服用乙醇產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物且代謝速度相對(duì)較慢，故可用于乙醇的檢測(cè)。②采血加氟化鈉利于保存。③人體玻璃體液不易受腐敗影響，可防止腐敗產(chǎn)生一算的干擾。④主要分析方法：頂空氣相色譜法，檢測(cè)器FID。⑤，測(cè)出乙醇的峰面積Ax（或峰高h(yuǎn)x）和內(nèi)標(biāo)物的峰面積AIX（或峰高h(yuǎn)IX）。再取一定量空白模擬檢材，加入已知量的乙醇，按同樣的方法加入內(nèi)標(biāo)物并檢測(cè)，測(cè)出標(biāo)準(zhǔn)乙醇峰面積As（或峰高h(yuǎn)s）和標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)標(biāo)物峰面積AIS（或峰高h(yuǎn)IS）。根據(jù)模擬檢材中加入標(biāo)準(zhǔn)乙醇的相對(duì)含量Cs和以上所測(cè)得的數(shù)據(jù)可有公式求得檢材中乙醇的相對(duì)含量：檢材中乙醇的相對(duì)含量 = [（AX/AIX）/（As/AIS）]*Cs金屬毒物（metal toxicant）：是指能夠引起急、慢性中毒的金屬單質(zhì)及其化合物。生物檢材的前處理方法：金屬毒物進(jìn)入機(jī)體后，與蛋白質(zhì)等形成牢固的結(jié)合物，因此生物檢材中的金屬毒物難以直接提取、分離和檢測(cè)。通常需要經(jīng)過有機(jī)質(zhì)破壞，使之轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)化合物。有機(jī)質(zhì)破壞是金屬毒物檢測(cè)的特點(diǎn)：經(jīng)過氧化分解等方法將檢材中的有機(jī)質(zhì)破壞并去除，使金屬毒物轉(zhuǎn)化為可溶性的金屬無機(jī)化合物的過程。分為：干法和濕法。有機(jī)質(zhì)破壞的要求：a、徹底分解有機(jī)物。b、金屬損失最少。c、不引入干擾金屬。d、剩余試劑易于除盡。濕法有機(jī)質(zhì)破壞的硝酸硫酸法：硫酸的作用：a、脫水。b、保持酸的濃度。c、提高反應(yīng)溫度。改良的硝酸硫酸法中最常添加的氧化劑：有硝酸、硫酸、高氯酸、過氧化氫、高錳酸鉀等，其中以強(qiáng)氧化劑硝酸最為常用。干法有機(jī)質(zhì)破壞：a、由于汞具有揮發(fā)性，故熔融法不適于汞檢材的有機(jī)質(zhì)破壞 無升華現(xiàn)象（Bi，Ag） 還原反應(yīng)（陽性反應(yīng)）→ 無沉淀As，金黃色沉淀sbReinsch試驗(yàn) 銅絲的升華試驗(yàn)→ （安碧比林碘化鉀試驗(yàn)） 沉淀物的檢驗(yàn) Hg（加入碘粒，紅色碘化汞）金屬毒物預(yù)實(shí)驗(yàn)：Reinsch試驗(yàn)：是經(jīng)典的金屬毒物篩選方法，未經(jīng)機(jī)體吸收、代謝的體外檢材可直接進(jìn)行，經(jīng)過體內(nèi)過程的生物檢材經(jīng)有機(jī)質(zhì)破壞后得到的檢液也可進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)。原理是：在適當(dāng)酸度的含水體系中，以純銅作為還原劑，將還原電位比銅高的金屬化合物還原成金屬單質(zhì)沉積于銅的表面，觀察銅表面呈現(xiàn)出的沉積金屬的特殊顏色來識(shí)別。用銅作還原劑的優(yōu)點(diǎn)是銅的還原電位較高，可排除還原電位比銅低的各種金屬的干擾。砷：灰色至灰黑色；汞：淺銀白色至亮銀色。結(jié)果的鑒別與確認(rèn)：砷：四面體或八面體結(jié)晶；汞：大小不等，可反射光而不透明的球形汞珠。砷化合物①首選濕法有機(jī)質(zhì)破壞（濕法有機(jī)質(zhì)破壞一般在濃強(qiáng)酸，加入各種氧化劑并加熱破壞消除有機(jī)物）。②Gutzeit法：砷化氫能與銀、汞、金等生成有色的產(chǎn)物，可用于各類檢材中微量砷的檢測(cè)。試劑可用硝酸銀、氯化汞、溴化汞、氯化金等。硝酸銀與砷化氫生成黃色砷化銀，遇水析出金屬銀而呈黑色。常用的是溴化汞，它與砷化氫生成黃色→棕色→黑色的產(chǎn)物。AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3（黃色）AsH3+2As(HgBr)3→3AsH(HgBr)2（棕色）AsH3+As(HgBr)3→3HBr+As2Hg3（黑色）③AgDDC比色法：二乙基二硫代氨基甲酸銀在有機(jī)堿溶液中與砷化氫反應(yīng)，生成紅色產(chǎn)物，對(duì)可見光有寬吸收帶，可在氯仿等有機(jī)溶劑中于510nm附近用比色法測(cè)定。汞及其化合物：①常溫下唯一的液態(tài)金屬，②體內(nèi)分布以腎最高，③檢測(cè)方法：雙硫腙汞分光光度法（pH1~2）；鉛的雙硫腙分光光度法（~）。水溶性無機(jī)毒物：①檢材處理：水浸法，透析法。②亞硝酸鹽：檢測(cè)方法：亞硝酸鹽弱酸性條件下與“對(duì)氨基苯磺酸”生成重氮化合物，再與“α萘胺”或“鹽酸萘基乙二胺”起耦合反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色偶氮染料，在一定濃度范圍內(nèi)顏色深淺與亞硝酸鹽的含量成正比。測(cè)定波長(zhǎng)520nm，線性范圍為1~10ug/ml。分離度(resolution；R)：又稱分辨率。是相鄰兩色譜峰保留時(shí)間之差與兩色譜峰峰寬均值之比。一般認(rèn)為Rs，兩峰完全基線分離。分配色譜法：原理是利用被分離組分在固定相或流動(dòng)相中的溶解度差別而實(shí)現(xiàn)分離。溶質(zhì)分子在固定相中溶解度越大，或在流動(dòng)相中溶解度越小，則K越大。在LLC中K主要與流動(dòng)相的性質(zhì) (種類與極性) 有關(guān)；在GLC中K與固定相極性和柱溫有關(guān)。法醫(yī)毒物分析試題 一、單項(xiàng)選擇題（本大題共 15 小題，每小題 1 分，共 15 分） ，在每小題列出的四個(gè)備選項(xiàng)中只有一個(gè)是符合題目要求的，請(qǐng)將其代碼填寫在題后的括號(hào)內(nèi)。錯(cuò)選、多選或未選均無分。 1. 普魯士藍(lán)反應(yīng)是用于下列哪一項(xiàng)檢驗(yàn)的常用方法（A） A. 氰化物 B. 砷化物 C. 一氧化碳 D. 硫化氫 2. 在毒物分析檢驗(yàn)中直接應(yīng)用光譜法常常受到限制，其主要原因是（C） A. 直接應(yīng)用光譜法無法定量 B. 直接應(yīng)用光譜法檢測(cè)需要對(duì)照品，而其他方法不用 C. 毒物分析檢材往往很復(fù)雜，而光譜法本身不具有分離能力 D. 光譜法所需儀器極其昂貴 3. 在法醫(yī)毒物分析中研究和鑒定的主要任務(wù)是（C） A. 毒物的性質(zhì) B. 毒物進(jìn)入體內(nèi)的途徑 C. 毒物的定性定量分析 D. 中毒的方式 4. 紫外分光光度法中，鑒別不同物質(zhì)的主要依據(jù)是（A） A. 紫外吸收光譜不同 B. 密度不同 C. 分子量不同 D. 顏色不同 5. 懷疑砷、汞等金屬毒物急性中毒時(shí)，可直接分離檢驗(yàn)體外檢材的方法是（B） A. 二氯化鈀顯色反應(yīng) B. 雷因許試驗(yàn) C. 光譜法 D. 顯微結(jié)晶試驗(yàn) 6. UV光譜圖中縱坐標(biāo)和橫坐標(biāo)的意義分別是（C） A. 吸收度、時(shí)間 B. 時(shí)間、波長(zhǎng) C. 吸收度、波長(zhǎng) D. 波長(zhǎng)、吸收度 7. 在毒物分析工作中，為了排除陰性干擾物的存在和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)是否可靠，常需進(jìn)行（B） A. 空白對(duì)照試驗(yàn) B. 已知對(duì)照試驗(yàn) C. 驗(yàn)證試驗(yàn) D. 篩選試驗(yàn) 8. 檢材已腐敗，用溴化汞試紙檢驗(yàn)砷或磷化鋅時(shí)，要干擾反應(yīng)的是（C)A. 氫氰酸 B. 溴化汞 C. 硫化氫 D. 砷化氫 9. 砒霜屬于（B） A. 揮發(fā)性毒物 B. 金屬毒物 C. 氣體毒物 D. 有機(jī)毒物 10. 下面哪一條不符合選作隨行參比標(biāo)準(zhǔn)物的要求（B )A. 母體結(jié)構(gòu)與待測(cè)物的不同 B. 與待測(cè)物屬同一類毒物 C. 與待測(cè)物有相似的紫外吸收 D. A、B、C項(xiàng)都不符合 11. 檢識(shí)敵敵畏和敵百蟲可用（C） A. 硫酸銅反應(yīng) B. 間苯三酚硫酸反應(yīng) C. 間苯二酚－氫氧化鈉反應(yīng) D.