rnai技術(shù)與應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-08-10 14:33 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 動物體的正常生長，只有在病毒或其它dsRNA誘導(dǎo)情況下才產(chǎn)生siRNA，作為miRNA的完善和補充；（3） miRNA在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達，推測在翻譯水平也起作用，而siRNA為轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達調(diào)控；（4） Dicer酶對兩類RNA的加工過程，miRNA為不對稱性，僅來自含莖－環(huán)結(jié)構(gòu)RNA前體的一側(cè)臂，剩余部分很快降解，而這種不對稱性不存在于而siRNA加工過程中 具體可用于以下幾個方面： 1 基因功能分析 基因敲除技術(shù)需要較長時間去永久性的關(guān)閉某個基因的表達，而RNAi技術(shù)則可在一周內(nèi)、甚至2天內(nèi)可控性的關(guān)閉10個基因。RNAi技術(shù)還具有一個優(yōu)勢，能同時封閉多個基因或基因家族，用于研究mRNA差別剪接形成的異構(gòu)體，甚至在基因組水平上構(gòu)建針對基因組的RNAi表達載體，用于研究基因之間的相互作用和進行基因功能的高通量篩查。使用RNAi技術(shù)在那些低等生物中基因組功能測定都已基本結(jié)束。在哺乳動物和人類基因的功能研究中，Harborth等利用脂質(zhì)體及質(zhì)粒分別將編碼核纖層蛋白β1或βNUP15GAS4ARC2胞質(zhì)動力蛋白、蛋白激酶cdkβ或γ肌動蛋白以及非必須結(jié)構(gòu)基因emerin和zyxin的siRNA轉(zhuǎn)染到Hela、SS6細胞和大鼠FFR成纖維細胞內(nèi)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)上述基因的功能表現(xiàn)與以往使用基因剔除法獲得的信息一致。Sui等應(yīng)用DNA載體體外構(gòu)建目的基因的siRNA，包括外源綠色熒光蛋白、內(nèi)源LaminA、LaminC、cdk2和dnmt1基因，轉(zhuǎn)染Hela、H122C33A、U2OS細胞，結(jié)果顯示siRNA對目的基因的抑制作用均在86%以上。 2 研究信號傳導(dǎo)通路的新途徑 聯(lián)合利用傳統(tǒng)的缺失突變技術(shù)，RNAi技術(shù)可以很容易地確定復(fù)
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