crispr操作系統(tǒng)(原理)(編輯修改稿)
2025-08-03 11:46 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 acer序列）對應(yīng)的互補序列。crRNA導(dǎo)向序列的兩側(cè)是相鄰重復(fù)序列區(qū)域。在I型和III型系統(tǒng)中，初始CRISPR轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物會被CRISPR特異性核酸內(nèi)切酶（Cas6 或 Cas5d）在重復(fù)序列位點內(nèi)切割。在許多I型系統(tǒng)中，重復(fù)序列是回文結(jié)構(gòu)的，Cas6可以穩(wěn)定連接在crRNA 339。端莖環(huán)上。而在III型系統(tǒng)中，Cas6短暫與CRISPRRNA連接，crRNA的 339。端會被未知的核酸酶進一步處理。CRISPRRNA的加工在II型系統(tǒng)中依賴于包含一個與重復(fù)序列互補序列的反式作用 crRNA (tracrRNA)。這些雙鏈的區(qū)域在Cas9存在時可以被RNaseIII加工，靶向干擾需要tracrRNA和 crRNA的同時存在。II型系統(tǒng)中的這兩個RNAs可以融合成一個sgRNA，目前，II型系統(tǒng)是我們研究的“火力”較為集中的系統(tǒng)，而Cas9已經(jīng)變成了在多種細胞類型和組織中靶向基因編輯的強大工具。第三階段：靶向干擾（Target Interference）成熟的crRNAs指導(dǎo)Cas蛋白到互補靶標，靶序列由特異
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