結(jié)締組織多色染色法(編輯修改稿)
2025-07-27 08:41 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 性甲醛液，石蠟切片。 [試劑配制] (1)Ponceau39。s染色液 %Pohceau39。s(麗春紅S，上海試劑三廠)水溶液l0~15ml，苦味酸飽和水溶液85~90ml。 (2)Victoria blue39。B 染色液 Victoria blue39。B(維多利亞藍，B，上海試劑三廠) g， 70%乙醇100m1。 [染色方法] (1)組織切片脫蠟至水。 (2)70%乙醇稍洗后，入Victoria blue39。B染色液中l(wèi)5min。 (3)95%乙醇中分化數(shù)秒鐘。 (4)用蒸餾水洗2次。 (5)用Ponceau39。s染色液滴染2min。 (6)直接用無水乙醇分化與脫水。 (7)二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結(jié)果]膠原纖維呈鮮紅色，細胞核和血細胞呈綠色，肌肉呈黃色。 相關(guān)回復(fù)：作者: appo 發(fā)布日期: 20051212網(wǎng)狀纖維網(wǎng)狀纖維是網(wǎng)狀結(jié)締組織內(nèi)的一種纖維。它由網(wǎng)狀細胞所產(chǎn)生。網(wǎng)狀細胞是一種星狀多突的細胞，核大，著色較淺，核仁明顯，胞質(zhì)較豐富，胞突彼此連接形成細胞網(wǎng)架。網(wǎng)狀纖維纖細而有分支，穿行于細胞體和突之間，共同構(gòu)成網(wǎng)狀支架。這種纖維用HE染色一般不易辨識。若用銀氨溶液浸染能使纖維變成黑色，如又稱為嗜銀纖維。網(wǎng)狀纖維纖細，沒有彈性，而有韌性，能抵抗胃液的消化和弱酸的腐蝕。一、網(wǎng)狀纖維染色的應(yīng)用（1）顯示和區(qū)分癌和肉瘤（2）顯示和區(qū)分血管內(nèi)皮瘤與血管外皮瘤（3）用以鑒別淋巴細胞肉瘤與網(wǎng)狀細胞肉瘤（4）區(qū)分骨尤文氏肉瘤與骨網(wǎng)狀細胞肉瘤（5）顯示與鑒別骨異質(zhì)增生與骨化性纖維瘤（6）區(qū)分軟骨粘液纖維瘤與粘液肉瘤（7）鑒別腦膜瘤與星形細胞瘤（1）平滑肌肉瘤（2）纖維肉瘤（3）滑膜肉瘤（4）惡性神經(jīng)鞘瘤、發(fā)展及其惡性程度。（1）凝固性壞死（2）肺結(jié)核干酪樣壞死。二、網(wǎng)狀纖維染色的原理1. 氧化2. 感應(yīng)3. 浸銀4. 還原三、網(wǎng)狀纖維染色方法（1）固定 甲醛液或其他固定液（2）試劑配制 氧化銀溶液：40%氫氧化鈉 1滴半10%硝酸銀 取40%氫氧化鈉滴入10%硝酸銀溶液中立即產(chǎn)生棕褐色沉淀，逐次滴入28%氨水恰好溶化沉淀（一般3滴為宜），用蒸餾水補足20ml。（3）染色次序1）組織切片脫蠟至水。2）10%磷鉬酸，25min。3）蒸餾水沖洗，5min。4）1%硝酸鈾，5s。5）蒸餾水沖洗，10s。6）氧化銀溶液，510min。7）95%酒精速洗，12s。8）還原液還原，12s。9）蒸餾水沖洗，2min。10）%氯化金調(diào)色，220s。11）蒸餾水沖洗，5min。12）5%次亞硫酸鈉，2min。13）蒸餾水沖洗，2min。14）核固紅染細胞核，510min。15）水稍洗。16）常規(guī)無水乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。（4）染色結(jié)果網(wǎng)狀纖維呈黑色、細胞核呈紅色。彈 力 纖 維一、彈力纖維的形態(tài)特點和組成成分 彈力纖維由糖蛋白構(gòu)成，富含親水性的極性氨基酸。彈性蛋白提供彈力纖維的彈性，它是一種不溶性蛋白質(zhì)，當用弱堿處理纖維結(jié)締組織時，其仍然存在。三分之一為甘氨酸，11% 為脯氨酸。與膠原纖維不同處為其氨基酸組成中約95%屬于非極性疏水氨基酸，鎖鏈賴氨酸(Desmosine)和異鎖鏈賴氨素(lsodesmosine)是彈性蛋白所特有，它們起著共價交聯(lián)的作用。 近年來，電鏡下看到組織培養(yǎng)的平滑肌細胞可以合成彈力纖維的兩種成分。在沒有平滑肌細胞存在時，可能由纖維母細胞形成。彈力纖維廣泛分布于身體各處，特別是在皮膚、血管、壁、韌帶、氣管、支氣管、肺泡、耳廓和腺體的導(dǎo)管處等最為豐富。彈力纖維由兩種成分組成，即集合束的彈力微纖維(由糖蛋白形成)和均質(zhì)狀的彈力蛋白。 彈力纖維在常規(guī)染色中難以區(qū)別于其他纖維，只有用特殊染色方法，才能清晰地顯示出來。近來學(xué)者研究認為，彈力纖維系統(tǒng)是由彈力纖維、前彈力纖維和耐酸纖維等三種纖維構(gòu)成，這三種纖維的分布、走行和組織化學(xué)均不相同。耐酸纖維用一般的彈力纖維染色法其著色很淡，前彈力纖維著色也不夠深，但如經(jīng)強氧化后醛品紅或間苯二酚品紅法則可把彈力纖維系統(tǒng)中的三種纖維同時顯示出來。 二、彈力纖維染色的應(yīng)用 (一)顯示皮膚組織中彈刀纖維的變化 在皮膚組織病變中，特別是真皮內(nèi)的彈力纖維， 時常發(fā)生改變，出現(xiàn)增生、卷曲、變性、崩解等，做彈力纖維形成聚集成堆的束狀、團塊狀及不規(guī)則狀。見于以下病變①彈力纖維??；②彈力纖維增多癥；③彈力過度性皮膚；④皮膚疏松；⑤皮膚環(huán)狀肉芽腫；⑥肢端角化的彈力纖維變性；⑦硬皮病。(二)顯示與判定心血管疾病 彈力纖維是心臟和血管的主要成公之一。 (1)顯示及鑒別心內(nèi)膜彈力纖維增生癥與心內(nèi)膜心肌纖維化。這兩種病變時心內(nèi)膜中的彈力纖維和膠原纖維會出現(xiàn)異常增多，在HE染色中兩者的病理變化甚為相似。因此，需要特殊染色加以顯示與鑒別。 (2)顯示動脈粥樣硬化時硬化斑塊底部的內(nèi)彈力板崩解，斷裂乃至消失情況。 (3)顯示與觀察梅毒性主動脈炎時動脈中層彈力纖維發(fā)生灶性破壞的程度。 (4)顯示高血壓時小動脈彈力纖維顯著增生以及形成多層的病變特點。(5)用于無脈癥，顯示在大動脈血管申層彈力纖維密集排 列，彈力層增厚。(6)顯示老年人動脈變性：動脈的彈力板變性、增厚、斷裂、崩解等現(xiàn)象。 （三）視察某些病變中的彈刀纖維是否增生與破壞 如慢性支氣管炎、肺氣腫、原發(fā)性或繼發(fā)性腎固縮等，均可導(dǎo)致彈力纖維縱行。散亂、斷裂、破壞和增生，形成碎片或顆粒。(四)顯示與鑒別腫瘤組織 (1)彈力纖維瘤 在彈力纖維瘤體的纖維組織中，有許多球狀或顆粒狀變化的彈力纖維。在HE染色中容易忽略，但用彈力纖維染色，能清晰見到瘤體內(nèi)豐富的彈力纖維球。 (2)乳腺癌 見于導(dǎo)管和血管壁周圍，這種現(xiàn)象多合并在硬癌和浸潤性小葉癌上。如彈力纖維染色法證明在導(dǎo)管癌上，伴隨出現(xiàn)彈力纖維增生，可證明是早期浸潤癌。 三、各種染色方法 l、Verhoeff鐵蘇木素染色法 媒染劑三氯化鐵和碘配成的蘇木素染色液，即Verhoeff鐵碘蘇木素對彈力纖維有染色力，但沒有選擇性，它既可染彈力纖維，也可染細胞核和膠原纖維等。通過“染料的分散度和組織的結(jié)構(gòu)密度”以達到分辨不同組織的目的。如彈力纖維和細胞核的結(jié)構(gòu)密度都是比較致密的，鐵蘇木素染液的粒子比較容易地分散到狹孔的彈力纖維或細胞核的間隙中，蘇木素粒子在狹孔的彈力纖維中比
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