【文章內(nèi)容簡介】 乙烯；SO3H+聚苯乙烯；SO3H+H或NaH或NaH或Na4．24．35．0弱酸性陽離子交換樹脂Amberlite IRC50聚丙烯酸；聚甲丙烯酸H10．0強(qiáng)堿性陽離子交換樹脂Amberlite IRA400Amberlite IRA410Dowex 1Dowex 2季胺CH2N（CH3）2CH2CH2OH聚苯乙烯；CH2N（CH3）3CH2N（CH3）2CH2CH2OHCICICICI3．33．13．33．3弱堿性陰離子交換樹脂Amberlite IR4BAmberlite IR45Dowex 3聚胺；NHR，NR2聚苯乙烯；NHR，NR2聚苯乙烯；NHR，2NROHOHOH10．05．05．5表32 常用離子交換纖維素粉樹脂類型交換基團(tuán)化學(xué)式名稱縮寫符號強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂OCH2SO3OCH2CH2SO3磺甲基磺乙基SMSE弱酸性陽離子交換樹脂OCH2COO羥甲基CM強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂OCH2CH2N（C2H5）3三乙胺基乙基TEAE弱堿性陰離子交換樹脂OCH2CH2NH（C2H5）2OCH2CH2NH2N（CH2CH2OH）3二乙胺基乙基胺基乙基三乙醇胺DEAEAEECTEOLA（4）親水性凝膠：多聚葡萄糖凝膠為這一類物質(zhì)的代表，為一種多聯(lián)多聚葡萄糖，廣為應(yīng)用在凝膠過濾薄層色譜，商品名稱為Sephadex。根據(jù)這種凝膠的分子量，把Sephadex分為11種規(guī)格，如表33所示，一般在G10至G25不適于薄層色譜用；在G50以上可適用于薄層色譜用。粒度比柱色譜所用為細(xì)，在1040微米之間。另外生物膠P（Bio—gelP）也應(yīng)用在薄層色譜方面。（5）其他有機(jī)物質(zhì)；淀粉、蔗糖、甘露醇等有機(jī)化合物也曾用在薄層色譜上，但已少有應(yīng)用。表34 常用靜相物質(zhì)的一般性質(zhì)名稱酸堿性吸附活性分離原理硅膠氧化鋁硅藻土硅酸鎂氫氧化鈣磷酸鈣氫氧化鐵活性碳纖維素聚酰胺離子交換纖維素多聚葡萄糖膠酸性堿性中性——堿性微堿性————中性中性堿性酸性——強(qiáng)強(qiáng)無弱弱強(qiáng)強(qiáng)強(qiáng)無無無無吸附；分配吸附；分配分配吸附吸附吸附吸附吸附分配離子交換凝膠過濾第二節(jié) 粘合劑及其他附加劑根據(jù)薄層色譜的特點(diǎn)，靜相物質(zhì)通常是粘著在完全惰性的的玻璃板上，而單純的吸附劑在玻璃板上粘著是很困難的，故往往需要加入適當(dāng)?shù)恼橙珓?，增進(jìn)薄層的機(jī)械強(qiáng)度及在玻璃板上的粘著能力。另外根據(jù)其他的目的，如顯譜、分離等，又往往要在吸附劑內(nèi)加入一些必要的物質(zhì)，如熒光劑、酸堿溶液等?，F(xiàn)就一些常用的粘全劑及附加劑分別介紹如下。（一）粘合劑（1）煅制石膏：煅制石膏為薄層色譜中用得最多的一種無機(jī)粘合劑，粘全力中等。它是由含二分子結(jié)晶水的硫酸鈣（CaSO4。2H2O）加熱120℃4小時(shí)失水而成，失水后的煅制石膏為含半分子結(jié)晶不的硫酸鈣（CaSO4。1/2H2O）。另熱過程中如如溫度過高則進(jìn)一步失水，到200℃以上則完全失水而成無水硫酸鈣，并失去可凝固性。煅制石膏與少量水結(jié)合時(shí)，逐漸硬化并膨脹。以石膏為粘合劑的吸附劑有硅膠、氧化鋁及硅藻土。石膏含量在5—15%之間。商品稱硅膠G、氧化鋁G及硅藻土G。以石膏為粘合劑的優(yōu)點(diǎn)是不與被分離化合物及顯色劑起化學(xué)反應(yīng)，并可使用腐蝕性顯色劑。其缺點(diǎn)是粘合力不強(qiáng)，薄層的機(jī)械強(qiáng)度較差，容易破裂。但這種粘合力不強(qiáng)的性質(zhì)，對于薄層的洗脫含量測定及制備薄層色譜又是有利的條件。（2）淀粉：粘合力中等，但較石膏為強(qiáng)，其據(jù)點(diǎn)是容易受到腐蝕性顯色劑和與淀粉起化學(xué)反應(yīng)的顯色劑的干擾，配制方法也比石膏麻煩。（3）其它粘合劑：聚乙烯醇、竣甲基纖維素都有可以做薄層的粘合劑。后都有的粘合力強(qiáng)，制成的薄層板機(jī)械強(qiáng)度好，耐磨，而且制備簡單。但不易取下，影響洗脫含量測定。（二）附加劑：（1）熒光物質(zhì)：在薄層色譜中，熒光猝滅法是一種常見的方法，應(yīng)用這種方法，需要在吸附劑中加入一些熒光物質(zhì)。常見的有硫化鎘、硅酸鋅等。含有熒光物質(zhì)的薄層板，在短波紫外線（254nm）照射下，產(chǎn)生綠色熒光，而被分離的化合物因熒光猝滅而產(chǎn)生綠色斑點(diǎn)。加有這種熒光物質(zhì)的薄層板，商品稱為硅膠GF254，氧化鋁GF254。此外加入羅丹明6G熒光物質(zhì)的薄層板，在長波紫外線（366nm）的照射下，板底呈藍(lán)色熒光，商品稱為硅膠GF366。（2）其它吸附劑：根據(jù)被子分離物質(zhì)的特殊需要，如增進(jìn)分離效果、提高反應(yīng)靈敏度等，可加入適當(dāng)?shù)奈絼?。如在吸附劑中加入硼酸，可以增進(jìn)碳水化合物異構(gòu)體的分離，因?yàn)榕鹚峥梢耘c這些異構(gòu)體形成絡(luò)合物；加入硝酸銀的薄層板，有助于分離不飽合化合物。又如用稀酸或稀堿代替蒸餾水制板，前者稱酸性薄層板，可以分離酸性物質(zhì)，如酚類、有機(jī)酸；后者稱堿性薄層板，可分離有機(jī)堿及有機(jī)胺。第三節(jié) 動(dòng)相溶劑薄層色譜中展開溶劑的選擇，對於成功地進(jìn)行薄層分離是非常重要的。因?yàn)樵谖絼?、被分離物質(zhì)及展開溶劑三因素中，前二者的性質(zhì)在一定條件下是固定的，所以展開溶劑的性質(zhì)將對薄層分離效果有重要影響。在用硅膠、氧化鋁及其他無機(jī)吸附劑進(jìn)行吸附薄層色譜分離時(shí)，溶劑系統(tǒng)選擇的原則與吸附柱色譜類似。其中最重要的是展開溶劑的極性。一般說來，中等極性的被分離物質(zhì)，需用中等活性的吸附劑及中等極性的展開溶劑；非極性的被分離物質(zhì)，需要用高度活性的吸附劑及非極性展開溶劑；極性的被分離物質(zhì)，用低活性的吸附劑及強(qiáng)極性的展開溶劑。展開溶劑的選擇要考慮到被分離物質(zhì)極性的強(qiáng)弱，而這種極性與化合物結(jié)構(gòu)有相當(dāng)密切的關(guān)系。各種官能團(tuán)的極性，按下列順序遞增。CH2CH2＜CH=CH＜OCH3＜COOR＜=C=O＜CHO＜—SH＜NH2＜OH＜COOH各種溶劑的極性順序各資料介紹略有出入，表（35）供參考。為了選擇最佳的展開溶劑，通常多采用兩種或兩種以上的混合溶液劑系統(tǒng)。這種溶劑由“基礎(chǔ)溶劑”及“洗脫溶劑”二部分組成?；A(chǔ)溶液劑常用極性小的溶劑，如正已烷、石油醚、苯、四氯化碳、氯仿等；洗脫溶液劑多用極性強(qiáng)的溶液劑，如丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙脂等。表（36）為幾種常見的二元溶液劑系統(tǒng)，可以看出洗脫溶劑增加所引起的極性改變。圖34是以四氯化碳為基礎(chǔ)溶劑，乙酸乙酯為洗脫溶劑所組成的二元溶劑系統(tǒng)在按不同比例混合時(shí)，對四種有機(jī)硫代磷本酯類殺蟲劑在薄層板上分離的hRf值的影響。在用纖維素、硅藻土等進(jìn)行分配薄層色譜分析時(shí)，溶劑的選擇原則與紙色譜法相同。主要取決於被分離化合物在展開溶劑及靜相中的溶解度比，即分配系數(shù)。在用聚酰胺為吸附劑時(shí)，按在溶劑中形成氫鍵能力的強(qiáng)弱，排列溶劑順序如下：水＜乙醇＜甲醇＜丙酮＜稀堿（氫氧化銨或氫氧化鈉）＜甲酰胺＜二甲基甲酰胺薄層色譜中展開溶劑的選擇，可采用以下兩種簡單的預(yù)試法：（一） 微薄層法：用普通的顯微鏡戴玻片，涂上吸附劑，活化后在底邊點(diǎn)樣，并在染色缸中展開5厘米，取出吹干后顯色。若混合物能分離為各個(gè)單獨(dú)的色斑，則展開溶劑可用。（二） 微量圓環(huán)法：將樣品溶液點(diǎn)在薄層板上，可同時(shí)點(diǎn)數(shù)點(diǎn)，每點(diǎn)間距23厘米。再用毛細(xì)管分別吸取待試展開溶劑，依次滴加在各樣品原點(diǎn)中，干后顯色。如某種溶劑將待分離混合物形成一個(gè)個(gè)分離明顯的同心圓環(huán)，則為較合適的展開溶劑。表36混合溶劑的極性順序洗脫能力環(huán)已烷苯環(huán)已烷：乙酸乙酯（95+5）苯：乙酸乙酯（95+5）氯仿環(huán)已烷：乙酸乙酯（85+15）苯：乙酸乙酯（85+15）氯仿：丙酮（9+1）苯：甲醇（95+5）環(huán)已烷：乙酸乙酯（1+1）苯：乙醇（9+1）氯仿：丙酮（85+15）苯：乙酸乙酯（1+1）環(huán)已烷：乙酸乙酯（1+4）乙酸乙酯乙酸乙酯：甲醇（99+1）苯：丙酮（1+1）丙酮二甲基甲酰胺二甲基甲砜第四章 薄層色譜操作技術(shù)第一節(jié) 薄層板的的制備及性質(zhì)薄層板的制備是將吸附劑涂布在大小適當(dāng)?shù)拇靼迳?，形成一定厚度的薄膜。制備一定?guī)格的薄層板，是保證獲得滿意的分離效果及良好的Rf值重現(xiàn)性必不可少的條件。具體制備方法及有關(guān)問題分別討論如下：（一）載板：戴板應(yīng)對各種展開溶劑、化學(xué)顯色試劑以及溫度都具有穩(wěn)定性，同時(shí)又應(yīng)有一定的機(jī)械強(qiáng)度以便重復(fù)使用。常用的戴板中，以玻璃最好，一般玻璃只要表面平整光滑，厚度在2—4厘米，允差177。—。戴板大小無絕對規(guī)定，由斯塔爾推薦的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格為2020厘米、2010厘米。作為一般簡單的快速薄層分離，也可用顯微鏡戴玻片作戴板。至于制備薄層色譜，所用戴板可達(dá)20100厘米。戴板應(yīng)非常干凈，才能保證良好的粘著效果。故玻板應(yīng)先用肥皂水洗凈，再在重鉻酸洗液內(nèi)浸泡，然后清洗干凈，最后用蒸餾水淋洗，晾干后備用。玻璃板的缺點(diǎn)是不易保存。其他材料的戴板中，最常用的為塑料板。塑料戴板制備薄層板操作復(fù)雜，因此多為成品薄層板出售。其優(yōu)點(diǎn)為使用簡便，缺點(diǎn)為高溫下抗腐蝕性差。其他如不銹鋼板也有應(yīng)用。（二）吸附劑糊的配制：在選擇好適當(dāng)?shù)拇靼搴?，?yīng)根據(jù)需要，制備一定粘度的吸附劑勻漿供制備薄層板用。常用各種吸附劑糊的調(diào)制方法如下：（1）硅膠1）加石膏粘合劑：取硅膠G20克，置于玻璃乳缽中，將40毫升蒸餾水分兩次加入，第一次加入30—35毫升，充分研磨后，再加入剩余的水。迅速小心研磨，直至開始出現(xiàn)凝膠狀，立即鋪板。吸附劑的加水量和加水后的攪拌時(shí)間相當(dāng)重要，是制備薄層板成敗的關(guān)鍵。若加水量過多，則吸附劑不易膠化；過少則膠化過快造成涂布困難。攪拌時(shí)間無具體規(guī)定，一般在45—65秒左右，以吸附劑開始出現(xiàn)凝膠狀態(tài)時(shí)為佳，此時(shí)粘度增大，光澤潔白；超過此時(shí)則凝膠固化，不易涂布。目前不同廠牌及批號的吸附劑加水量及攪拌時(shí)間都有所不同，可以根據(jù)具體情況選擇最佳條件。（其他無機(jī)吸附劑如氧化鋁G、硅藻土G的制備方法與硅膠G相似）2）加淀粉粘合劑：一般是在吸附劑中加入約5%的淀粉及二倍量的水，在沸水浴上加熱，不斷攪拌至呈一定的粘稠度，進(jìn)行鋪板。3）加羥甲基纖維素粘合劑：通常取硅膠55克或氧化鋁60—80克，加1%羥甲基纖維素水溶液100毫升，調(diào)成糊狀，進(jìn)行鋪板。（2）纖維素粉1）天然纖維素粉：配成15%的纖維素水懸浮液，在電磁攪拌器上混合30—60秒鐘，纖維素粉不需加任何粘合劑，即可鋪板。2）微結(jié)晶纖維素粉：配制成15%—30%的水懸浮液，電磁攪拌器上充分混合1分鐘，即可鋪板。攪拌過久可能形成凝膠而失敗。3）乙?；w維素粉：根據(jù)纖維素乙?；某潭炔煌?，稱取適量，加95%乙醇，充分?jǐn)嚢韬箐伆?。?）聚酰胺粉取聚酰胺粉12克，加甲醇50毫升，用力充分振搖后鋪板。若加入2。5克纖維素粉及40毫升甲醇，在電磁攪拌器上混合成漿，可制成堅(jiān)固的薄層板。（4）離子交換劑1）離子交換樹脂：取5克纖維素MN300加少量水?dāng)嚢鑾追昼姡偌?0—30毫升蒸餾水，繼續(xù)攪拌，加30克Dowex50樹脂，最后加2