實驗二顯微鏡的構(gòu)造原理及使用方法(編輯修改稿)
2025-05-26 06:14 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 衍射光的光路紊亂，應(yīng)被吸收的光不能被吸收，相位該推遲的光波不能被推遲，失去相差顯微鏡的作用。由于環(huán)狀光闌的光環(huán)與物鏡相板的環(huán)孔甚小，為使二者相互對準，完全重合，必須使用合軸調(diào)中望遠鏡。 實驗步驟 ? 1. 安裝好環(huán)狀光闌和相差物鏡。 ? 2. 在明視野條件下對光，調(diào)焦。 ? 3. 拔出目鏡，插入合軸望遠鏡，用左手指固定其外筒，一邊看著望遠鏡，一邊用右手轉(zhuǎn)動內(nèi)筒升降，對準焦點叫能看到環(huán)狀光闌的亮環(huán)和相板黑環(huán)，將望遠鏡固定，升降聚光器并調(diào)節(jié)其下的螺旋，使亮環(huán)的大小與黑環(huán)一致，再旋轉(zhuǎn)聚光器兩側(cè)的條調(diào)節(jié)鈕，使光環(huán)和黑環(huán)完全重合。 ? 4. 拔出望遠鏡，插入目鏡，即可觀察。 ? 注意事項： ? 在更換不同倍率相差物鏡和不同種類的相差板時，要重新合軸調(diào)中。使用油物鏡時，聚光器上透鏡表面與栽片之間要同時上鏡油。 二、熒光顯微鏡 ? 實驗原理： ? 熒光是熒光物質(zhì)受光或其它射線時所發(fā)出的可見光，其特點是：吸收了能量即刻發(fā)光，光或其它射線停止照射時也叫立即停止發(fā)光。 ? 熒光分為兩種：自發(fā)性熒光和繼發(fā)性熒光。自發(fā)性熒光指動植物組織和細胞內(nèi)的某些成分經(jīng)短波照射后發(fā)出的微弱熒光；繼發(fā)性熒光指某些細胞成分與熒光染料結(jié)合而在照射后呈現(xiàn)出的熒光。熒光染料的種類很多，并且對年各種被檢物體表現(xiàn)出不同的親和性。 ? 熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源，經(jīng)過濾色系統(tǒng)，發(fā)出一定波長的光（紫蘭光 42mm或紫外光 365mm）做為激發(fā)光，激發(fā)標(biāo)本的熒光物質(zhì)使其發(fā)出熒光，再經(jīng)過物鏡和目鏡的放大進行觀察。 ? 熒光顯微術(shù)是生物，醫(yī)學(xué)中的重要研究手段，可以研究細胞內(nèi)的自發(fā)熒光物質(zhì)，更重要的是可以研究不同熒光探針標(biāo)記后的細胞及其化學(xué)成分。 ? 下面介紹熒光顯微鏡的構(gòu)造： ? 1. 熒光光源：一般用超高壓汞燈，它的紫外和紫蘭部分有很強的發(fā)射。 ? 2. 濾色系統(tǒng)：由激發(fā)濾光片和吸收濾光片組成。 ? 3. 激發(fā)濾光片：提供一定波長的激發(fā)光。激發(fā)光的波長根據(jù)備激發(fā)的熒光物質(zhì)而定。 ? 4. 吸收濾光片：把不需要的激發(fā)光吸收掉
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