【文章內(nèi)容簡介】 護柱再分析。也可更換保護柱。拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強保留物質(zhì)污染，可運用適當?shù)脑偕胧?。若還不行，可能是入口處堵，可以更換篩板或色譜柱。樣品溶劑不溶于流動相改變樣品溶劑，如果可能，采取流動相作為樣品溶劑D、含量高的成分峰原因解決方法樣品溶劑選擇不恰當減少樣品載量E、早出的峰變形 原因解決方法樣品溶劑選擇不恰當a、減少進樣體積b、運用低極性樣品溶劑F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解決方法柱外效應(yīng) a、調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路）b、使用小體積的流通池G、K′增加時，脫尾更嚴重原因 解決方法二級保留效應(yīng)，反相模式 a、加入三乙胺 b、加入乙酸c、加入鹽或緩沖劑d、更換一支柱子二級保留效應(yīng)，正相模 a、加入三乙胺 b、加入乙酸c、加入水 d、試用另一種方法二級保留效應(yīng)，離子對 加入三乙胺H、酸性或堿性化合物的峰拖尾原因 解決方法緩沖不合適 a、使用濃度50100mmol/L的緩沖液b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液I、額外的峰 原因 解決方法樣品中有其他組分 正常前一次進樣的洗脫峰 a、增加運行時間或梯度b、使用pH等于流動相pH的緩沖液空位或鬼峰 a、檢查流動相否純凈b、使用流動相作為樣品溶劑c、減少進樣體積J、保留時間波動原因 解決方法溫控不當 重新設(shè)定柱溫流動相組分變化 防止變化（蒸發(fā)、反應(yīng)等）色譜柱沒有平衡3在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱K、保留時間不斷變化原因 解決方法流速變化 重新設(shè)定流速泵中有氣泡 從泵中除去氣泡流動相選擇不恰當 a、更換合適的流動相b、選擇合適的混合流動相L、基本漂移原因 解決方法柱溫波動（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器較高靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。）控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器。流動相不均勻。（基線向上漂移，流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移）。使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣，使用過程中用氦氣檢測器內(nèi)流通池被污染或有氣體用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池，如有 需要，可以用1mol的硝酸（不要用鹽酸）。檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線）取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊換流通池窗。流動相配比不當或流速變化更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。柱平衡慢，物別是流動相發(fā)生變化時用中等強度的溶劑進行沖洗，更改流動相時，在分析前用1020倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)量溶劑配成檢查流動相的組成。使用高質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑。樣品中有強保留的物質(zhì)（高K′值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。使用保護柱，如有必要，在進樣之間或在分析過程中，定期用強溶劑沖洗柱子。使用循環(huán)溶劑，但檢測器未調(diào)整。重新設(shè)定基線。如循環(huán)溶劑已超階級出檢測器動力學(xué)范圍，使用新的流行動相。檢測器沒有設(shè)定在最大吸收波長。將波長調(diào)整至最大吸收波長處。M、基線噪音（規(guī)則的）原因解決方法在流動相、檢測器或泵有空氣流動相脫氣，沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣。漏液見第三節(jié)。檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。流動相混合不完全用手搖動使混合均勻合均勻或使用低粘度的溶劑溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱）減少差異或加上熱交換器在同一地線上有其他電子設(shè)備斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。泵脈沖在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器液相色譜培訓(xùn)講義(十二)作者：轉(zhuǎn)載自：發(fā)布日期：2007522N、基線噪音（不規(guī)則的）原因解決方法漏液見第三節(jié)。檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查檢測器流通池是否漏液。流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成檢查流動相的組成。流動相各溶劑不相溶選擇互溶的流動相檢測器內(nèi)有氣泡斷開檢測器的記錄儀的電源，檢查并更正。系統(tǒng)內(nèi)有氣泡用強極性溶液沖冼系統(tǒng)檢測器內(nèi)有氣泡沖洗檢測器，在檢測器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器流通池污染（即使是極少的污染物也會產(chǎn)生噪音。）用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流動池檢測器燈能量不足更換燈色譜柱填料流失或阻塞更換色譜柱流動相混合不均勻或混合器工作不正常維修或更換混合器，在流動相不走梯度時，建議不使用泵的混合裝置。O、峰變寬原因解決方法流動相組成變化重新制備新的流動相流動相流速太低調(diào)節(jié)流速漏液（特別是在柱子和檢測器之間）3見第三節(jié)。檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及正常的噪音。如果必要更換密封。檢測器設(shè)定錯誤更改檢測器參數(shù)設(shè)置a、柱子過載b、檢測器響應(yīng)時間過長或池體積過大c、柱子與檢測器之間的管路太長或管路內(nèi)徑大d、模數(shù)轉(zhuǎn)換頻率過低a、小體積進樣，稀釋樣品b、減少響應(yīng)時間或使用更小的流通池c、”的管路d、將模數(shù)轉(zhuǎn)換頻率增大緩沖液離子強度太低增加離子強度保護柱污染或失效更換保護柱色譜柱污染或失效，塔板數(shù)降低更換同樣類型的色譜柱。柱頭污染或塌陷更換柱子呈現(xiàn)兩個或多個未被完全分離的峰選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果1柱溫過低或柱溫不均勻1選擇設(shè)計合理的柱溫設(shè)備,提高柱溫。1檢測器響應(yīng)時間太大1使用較小的響應(yīng)時間P、分離度降低原因解決方法流動相污染或變質(zhì)（引起保留時間變化）重新配制流動相保護柱或分析柱取下保護柱再分析，也可更換保護柱，若問題仍然存在，可能是柱子被強留物質(zhì)污染，再生色譜柱，若問題仍然存在,更換色譜柱。Q、所有的峰面積都變小/變大原因解決方法檢測器衰減設(shè)定過高/低減少/增加衰減的設(shè)定檢測器響應(yīng)時間太大設(shè)定較小的響應(yīng)時間進樣量太少/過多增大/減小進樣量輸出連接不當使用正確的連接十、色譜柱工作程序（分析柱）須建立檔案才能啟用。，原則上一根色譜柱只能用于同類物質(zhì)的分析。，應(yīng)在色譜柱前加同種填料和規(guī)格的保護柱（預(yù)柱），就應(yīng)該標明方向，不可倒過來使用。（預(yù)柱或分析柱）的連接、分析柱與管路的連接，總的原則是要盡量避免死體積的增大。因而，在擰緊螺絲前一定要把不連接管盡量往柱子里塞。在使用通用接頭時，即使在擰緊的過程中也要注意邊塞邊擰，以免在擰動的過程中，管子松開。預(yù)柱與分析柱的連接管應(yīng)盡量短。，要注意不能擰得太緊，以免螺絲尖端的一截管子和金屬刃環(huán)變形。不同公司的柱子的柱頭不一樣，插進去的管子的深度、刃環(huán)的角度也不一樣，因而不銹鋼接頭不能通用。，柱內(nèi)徑越大，可用的流速越大；填料顆粒越細，可用的流速越小。：以硅膠為載體的色譜柱，應(yīng)在2～，～，其它色譜柱參照說明書的規(guī)定。，（或用無鹽流動相）過渡。,樣品分析完成后,一般應(yīng)用流動相繼續(xù)沖洗60mL以上，再根據(jù)樣品成分的溶解性質(zhì)，選用合適的純有機溶劑或水沖洗，必要時測定柱效。，先用相應(yīng)的無鹽流動相沖洗60mL以上，再用水沖洗100mL以上，再根據(jù)樣品成分的溶解性質(zhì)，選用合適的純有機溶劑沖洗，必要時測定柱效。：如果沒有時間測定柱效，應(yīng)保證柱壓恢復(fù)正常；而且，在254nm處檢測基線，20分鐘內(nèi)保持平穩(wěn)。：如果預(yù)柱太臟，應(yīng)該單獨沖洗，以免污染分析柱，國產(chǎn)的預(yù)柱必要時可以用長時間的倒沖的方法把臟物沖洗：Phenomenex公司的預(yù)柱不能倒沖，如果預(yù)柱洗不干凈，交由儀器管理人員處理，新預(yù)柱的柱壓一般在100psi以下，如果柱壓變得很大，應(yīng)考慮預(yù)柱已經(jīng)變臟、被堵塞了。，必要時用稠環(huán)芳烴測定柱效（不帶預(yù)柱），如果發(fā)現(xiàn)柱效下降，或分離度變差，必須查找原因，采用合適的溶劑進一步?jīng)_洗柱子，直到基本恢復(fù)正常。：樣品：100mL（+聯(lián)苯3mg+萘20mg+菲30mg）測定波長：254nm；流動相：85%甲醇水；進樣量：5μL。：反相色譜柱應(yīng)保存在50%以上的甲醇/乙腈中，正相色譜柱應(yīng)保存在正已烷中，存放達半年時要重新沖洗，以免溶劑揮發(fā)，柱床變形。：分析完成后應(yīng)作記錄。 ：由反相到正相，依次用水、甲醇異丙醇正已烷沖洗；由正相到反相的轉(zhuǎn)換，依次用正已烷異丙醇甲醇水沖洗。（不帶預(yù)柱）上升，應(yīng)查找原因，采用合適的溶劑（如甲醇、乙腈、四氫呋喃、氯仿、異丙醇、乙醚等）進一步?jīng)_洗柱子，直到柱效、柱壓恢復(fù)正常。如果還不行，可以把柱子倒過來沖洗，不過須沖洗比較長的時間，因為柱床重新平衡需要一定的時間，倒過來沖洗，應(yīng)倒著使用，不用再倒回去使用，以免又需再次平衡柱床（當然，倒著用一段時間后，如果柱壓又上升了，還可以倒回去沖洗、使用）。每倒轉(zhuǎn)一次，應(yīng)重新測定柱效。：色譜柱的報廢沒有具體的時間，有些色譜柱已不能用于測定某一物質(zhì)了，但用于測另外的物質(zhì)卻可能還很好。一般經(jīng)過多次維修，柱壓仍太高時，可以報廢。用稠環(huán)芳烴測得柱效測得柱效和分離度達不到，經(jīng)過沖洗、修理仍無改善時，也可以報廢。注意事項：反相柱不能用純水沖洗，流動相中有機相的比例必須在5%以上。液相色譜培訓(xùn)講義(十三)作者：轉(zhuǎn)載自：發(fā)布日期：2007522第十二章 液相色譜儀器故障及排除方法第一節(jié) 故障分類、識別與排除表本書中故障排除表的編排按照故障現(xiàn)象的分類（包括整機、部件、色譜圖、引起原因等）加以整理，在許多情況下可能有重復(fù)描述的，這是因為一種故障癥狀的出現(xiàn)，往往是由許多原因造成，可以從色譜圖中得到信息，也可以從各部件的運轉(zhuǎn)情況推測，直至操作者應(yīng)運用自己的全部知識與經(jīng)驗進行綜合分析、推斷、并通過各種可能的嘗試，作出正確的判斷。為了更加直觀地快速判斷問題所在。本章中，盡量用各種圖表形式。表121 系統(tǒng)流路問題造成的基線故障排除方法癥狀可能原因解決方法不規(guī)則的噪聲(產(chǎn)生于系統(tǒng)流路)檢測器流通池內(nèi)有較大氣泡排氣泡，清洗檢測池或在檢測器廢液排放口加適當?shù)幕貕赫{(diào)節(jié)器；在檢測器廢液排放回壓不規(guī)則的噪聲(產(chǎn)生于系統(tǒng)流路)流路中有少量氣泡排氣泡（為預(yù)防氣泡，流動相要脫氣或通氦氣）系統(tǒng)不穩(wěn)定或沒達到化學(xué)平衡使系統(tǒng)所有部件（如柱和檢測器）有適當時間獲得穩(wěn)定和化學(xué)平衡；如果使用自動梯度洗脫，要有足夠的平衡時間獲得好的再現(xiàn)性；如使用離子對試劑，在首次使用時需要足夠的時間和溶劑體積，色譜柱才能達到足夠的平衡。流動相被污染不使用這些流動相并且：（1）清洗貯液器，過濾器（6mol/L HNO3）水（重復(fù)三次）。甲醇/換溶劑入口過濾器（2）建議用HPLC級試劑（3）沖洗并重新平衡系統(tǒng)檢測器流通池漏移開檢測器蓋子檢查泄漏，如果看不到，按下面步聚進行：（1）用可溶性好的非緩沖液溶劑清洗檢測器，然后用甲醇清洗（2）通氦氣或氦氣，慢慢將檢測池吹干檢測器流通池漏監(jiān)測基線噪聲，如果噪聲消失，表明檢測池內(nèi)部漏，需修理/更檢測池規(guī)則的噪聲(產(chǎn)生于系統(tǒng)流路)檢測器流通池漏監(jiān)測基線噪聲，如果噪聲消失，表明檢測池內(nèi)部漏，需修理/更換檢測池色譜柱被污染為證明可能的原因更換系統(tǒng)的色譜柱或使用一根同類的被證明性能好的色譜柱換流動相監(jiān)測基線如果問題仍然存在可能由于：（1） 溶劑的性質(zhì)（如不互溶）（2） 流動相被玷污（3） 保護柱或管路過濾器被玷污表122 檢測器電路引起的基線噪聲故障排除方法癥狀可能原因解決方法無規(guī)則噪聲(產(chǎn)生于檢測器)檢測器沒有穩(wěn)定檢測器燈應(yīng)有適當時間穩(wěn)定（直到基線穩(wěn)定）燈故障(產(chǎn)生于檢測器)檢測器燈檢測器平衡時間的變化取決于使用的檢測器種類和參數(shù)（如波長、靈敏度、電壓/電流等）按檢測器說明書檢查器可以調(diào)證燈能量以補償量損失無規(guī)則噪聲(產(chǎn)生于檢測器)檢測池被污染參見檢測故障排除檢測器電路問題檢測器故障，與供應(yīng)商聯(lián)系檢測器與數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)信號線連接不好將連接線接好檢測器接地不好使用專用的、有屏蔽的信號線周圍使用設(shè)備的影響使用單獨電源，遠離有強電磁波、強磁場的設(shè)備數(shù)據(jù)處理裝置靈敏度設(shè)置太靈敏調(diào)到靈敏度合適的位置有規(guī)則期（分或秒）噪聲（產(chǎn)生于檢測器）周圍設(shè)備的影響周圍使用設(shè)備的影響參見上述“不規(guī)則的