【文章內(nèi)容簡介】 粒增多。透明帶為較均一的厚層蛋白質(zhì)膜。卵泡細(xì)胞層增厚。5）成熟卵泡：也叫Graafian卵泡。三級(jí)卵泡進(jìn)一步成熟，形成充滿卵泡液的水泡，卵泡突出于卵巢表面。卵泡體積很大。卵泡腔擴(kuò)大。此時(shí)初級(jí)卵母細(xì)胞長大成熟，核呈空泡狀，染色質(zhì)很少，核仁明顯。胞漿內(nèi)富有卵黃顆粒。排卵前即恢復(fù)并完成第一次減數(shù)分裂，結(jié)果形成大小不等的兩個(gè)細(xì)胞，大的細(xì)胞為次級(jí)卵母細(xì)胞，小的叫第一極體。透明帶變厚。極體呈卵圓形，位于透明帶與次級(jí)卵母細(xì)胞之間的卵黃周隙，只要由核質(zhì)構(gòu)成，以后逐漸退化。Graafian卵泡的卵泡壁由幾個(gè)功能細(xì)胞層構(gòu)成。最外層，為有較多纖維細(xì)胞層的外膜；向內(nèi)為內(nèi)膜層。這兩種細(xì)胞層由毛細(xì)血管網(wǎng)提供血液。外膜與內(nèi)膜層分界明顯，常合稱為卵泡膜。內(nèi)膜增厚，內(nèi)膜細(xì)胞肥大，呈圓形或多角形，類脂質(zhì)顆粒增多，細(xì)胞核為橢圓形。在內(nèi)膜層下面有一層基膜，將內(nèi)膜與最內(nèi)層細(xì)胞即顆粒細(xì)胞層分開?；ぷ柚寡芟到y(tǒng)進(jìn)入顆粒細(xì)胞層。隨著卵泡腔擴(kuò)大，顆粒細(xì)胞層變薄，包圍卵泡腔。顆粒細(xì)胞排列整齊。有時(shí)可見到細(xì)胞分裂。此外，卵丘（顆粒細(xì)胞形成的小丘）位于卵泡腔的一側(cè)。卵丘和其它顆粒細(xì)胞包裹卵母細(xì)胞。與卵母細(xì)胞直接接觸的顆粒細(xì)胞呈輻射狀排列，稱作放射冠。排卵開始時(shí)。放射冠細(xì)胞與周圍的卵泡壁顆粒細(xì)胞之間開始出現(xiàn)裂隙，彼此的聯(lián)系疏松。牛、羊、豬的卵泡在排卵前（馬排卵后）完成第一次減數(shù)分裂，形成次級(jí)卵母細(xì)胞。隨即開始第二次減數(shù)分裂，然后休止在中期（M）。受精過程才使第二次減數(shù)分裂恢復(fù)并完成。結(jié)果產(chǎn)生合子（受精卵）及第二極體。因而，牛、羊、豬、馬等家畜沒有真正的卵子存在。6）閉鎖卵泡：初級(jí)卵泡退化后，一般不留痕跡。但生長卵泡退化時(shí)，卵母細(xì)胞萎縮，透明帶皺縮塌陷，卵泡液被吸收，卵泡壁凹陷，以后結(jié)締組織侵入泡內(nèi)。（2）黃體：是排卵后的卵泡轉(zhuǎn)變成的富于血管的內(nèi)分泌器官。牛、羊、豬的黃體位于卵巢皮質(zhì)淺層突出于表面。馬的黃體則完全埋藏在卵巢深部。根據(jù)黃體發(fā)育階段而分成下列各期。1）血體期：卵泡破裂后，血液流入卵泡腔內(nèi)，形成血凝塊，也叫紅體期。2）增生期：當(dāng)破裂卵泡傷口愈合，黃體細(xì)胞增生，外觀呈黃色。黃體細(xì)胞分下列兩種：A、粒黃體細(xì)胞：來源于卵泡顆粒細(xì)胞。多分布于黃體中心，著色淺，呈多角形，體積較大，胞質(zhì)出現(xiàn)類脂質(zhì)顆粒，球形細(xì)胞核明顯。B、膜黃體細(xì)胞：來源于內(nèi)膜細(xì)胞。多分布在黃體邊緣或粒黃體細(xì)胞之間，體積小，核及胞質(zhì)著色較深。3）血管盛開期：血管與結(jié)締組織伸入黃體中心，形成花彩狀，黃體細(xì)胞清晰可見。4）成熟期：黃體增大到最高峰，黃體內(nèi)各種結(jié)構(gòu)明顯。5）白體期：黃體退化、萎縮，變成白色的痕跡。3．輸卵管組織學(xué)輸卵管從外向內(nèi)由漿膜、肌層和粘膜三層不同細(xì)胞層構(gòu)成。（1）粘膜：由上皮和固有膜構(gòu)成。粘膜形成若干初級(jí)縱襞，在壺腹內(nèi)又分出許多次級(jí)縱襞。上皮：為單層柱狀纖毛上皮。其中央為無纖毛的分泌上皮細(xì)胞。在漏斗和壺腹部的的上皮纖毛較高，向子宮逐漸變低。纖毛向子宮端顫動(dòng)，有助于卵的運(yùn)送。分泌細(xì)胞的分泌物可供卵的營養(yǎng)。固有膜：由致密的纖維性結(jié)締組織構(gòu)成。但在壺腹部組織較疏松，伸入皺褶內(nèi)構(gòu)成支柱。（2）肌層：分內(nèi)環(huán)肌和外縱肌兩層。兩側(cè)之間無明顯界限?？拷訉m端的肌層較厚。傘部的外縱肌消失，僅含有分散的肌細(xì)胞。（3）漿膜：為輸卵管壁最外層。漿膜基本上為結(jié)締組織。在肌層和漿膜之間有很寬的一層疏松結(jié)締組織，叫漿膜下層，其中含有卵巢和子宮血管的分支、淋巴管、神經(jīng)和縱行平滑肌。4．子宮組織學(xué)子宮壁分為三層：內(nèi)膜、肌層和外膜。（1）內(nèi)膜：由上皮和固有膜構(gòu)成。上皮：為單層的柱狀上皮。細(xì)胞有時(shí)有纖毛。無纖毛的細(xì)胞有分泌性質(zhì)。上皮陷入固有膜內(nèi)，形成子宮腺。固有膜：又叫內(nèi)膜基質(zhì)。為環(huán)形的結(jié)締組織，纖維較細(xì)，還有網(wǎng)狀纖維和網(wǎng)狀細(xì)胞，之間有各種白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞、淋巴管、血管和子宮腺。子宮腺是彎曲的分支管狀腺。管壁由單層柱狀上皮構(gòu)成，多為分泌粘液的細(xì)胞，纖毛細(xì)胞較少。管壁外有分層的結(jié)締組織鞘。（2）肌層：分厚的內(nèi)環(huán)肌和薄的外縱肌，在內(nèi)外肌層之間為血管層，其中有神經(jīng)分布。（3）外膜：為漿膜，由疏松結(jié)締組織和間皮組成。四、作業(yè)：1．通過觀察和比較，說明各種公、母畜生殖器官的形態(tài)、大小、相互關(guān)系和大體構(gòu)造以及在活體上的位置有何特點(diǎn)。2．繪出任一種公、母畜生殖器官的標(biāo)本圖。3．繪出并注明睪丸曲精細(xì)管及其所含細(xì)胞的構(gòu)造圖。4．繪出并注明卵巢組織結(jié)構(gòu)及卵泡發(fā)育各階段示意圖。實(shí)驗(yàn)三 死活精子數(shù)的測(cè)定一、目的和要求掌握死活精子染色和制作抹片的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理活精子頭部是不易著色的，鏡檢時(shí)，精子頭部是透明、無色的。而死精子則因伊紅滲入細(xì)胞質(zhì)，使整個(gè)精子頭部呈紅色。苯胺黑為背景染色，使著色的精子頭部可見。三、材料h1．精液：牛、豬或兔等任一種動(dòng)物的精液。2．藥品器械：顯微鏡、載玻片、凹玻片、搪瓷盤、滴管、擦鏡紙、紗布、試管、75%酒精、5%伊紅、1%苯胺黑。四、方法和步驟%的伊紅和1%的苯胺黑按1:1混勻，分裝于1～2ml容量的試管中（加入試管容量的1/2），并在37℃水浴中加溫，隨后加入原精液1～3滴，搖勻后再放回水浴中，3min后立即取出待用。也可將染液預(yù)熱后，將伊紅、精液及苯胺黑按照1：1：1～2的比例及順序滴入預(yù)熱的凹玻片中混勻染色。，用另一載玻片進(jìn)行推動(dòng)制成抹片，待干燥后，高倍鏡鏡檢（400倍）。抹片時(shí)，最好在35～40℃的條件下制作，而且制作過程要快。也可將制好的抹片放在37～38℃保溫箱內(nèi)干燥30～60秒。結(jié)果：活精子頭部是不易著色的，鏡檢時(shí)，精子頭部是透明、無色的。而死精子則因伊紅滲入細(xì)胞質(zhì)，使整個(gè)精子頭部呈紅色。苯胺黑為背景染色，使著色的精子頭部可見。在高倍鏡下數(shù)200或500個(gè)精子，其中分別數(shù)出死、活精子各占的百分率?；罹影俜致士偸且染踊盥矢摺；罹影俜致剩?00%五、作業(yè)計(jì)算活精子百分率，比較其與精子活率的大小并說明原因。實(shí)驗(yàn)二精子的活率和密度測(cè)定一、目的和要求掌握檢查精子密度、評(píng)定活率的方法；熟悉肉眼檢查精液品質(zhì)的方法；驗(yàn)證觀察理化因素對(duì)精子運(yùn)動(dòng)及生存能力的影響。由于目測(cè)法不夠準(zhǔn)確，所以采用精子計(jì)數(shù)的方法，測(cè)定1ml精液內(nèi)的精子數(shù)。不過要有一定經(jīng)驗(yàn)才會(huì)準(zhǔn)確。要求同學(xué)們一定要熟練掌握此法，它是目前許多簡單而實(shí)用方法的基礎(chǔ)。二、材料和儀器1．精液：牛、豬或兔等任一種動(dòng)物的精液。2．藥品器械：顯微鏡、顯微鏡保溫箱（或顯微鏡恒溫臺(tái)）、載玻片、蓋玻片、搪瓷盤、溫度計(jì)、滴管、擦鏡紙、紗布、試管、75%酒精、5%伊紅、1%苯胺黑、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、計(jì)數(shù)器、95%酒精、乙醚、％和3%NaCl、保溫瓶、藥棉等。三、內(nèi)容和方法（一）精子密度的檢查（顯微鏡觀測(cè)法）及活率評(píng)分1．檢查精子的密度：取一小滴精液于潔凈的載玻上，蓋上潔凈的蓋玻片，使精液分散成均勻的一薄層，不得有氣泡存留，也不能使精液外流或溢出于蓋玻片上。置于顯微鏡下放大100倍觀察，按下列等級(jí)評(píng)定其密度。密——在整個(gè)視野中精子的密度很大，彼此之間空隙很小，看不清各個(gè)精子個(gè)體運(yùn)動(dòng)的情況。每毫升精液含精子數(shù)約在10億個(gè)以上。登記時(shí)以“密”字。中——精子之間空隙明顯，精子彼此之間的距離約有一個(gè)精子的長度，有些精子的活動(dòng)情況清楚可見。這種精液的密度評(píng)為“中”，每毫升所含精子數(shù)約2～10億個(gè)之間。登記時(shí)以“中”字。稀——視野中精子稀疏、分散，精子之間的空隙超過一個(gè)精子的長度。這種精液每毫升所含精子數(shù)在2億以下。登記時(shí)以“稀”字。2．評(píng)定精子的活率：必須于采精后立刻在25℃左右的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，最好在37℃保溫箱內(nèi)或加熱的載物臺(tái)上進(jìn)行。在評(píng)定精子活率的同時(shí)也可以測(cè)定精子的密度。用玻璃棒蘸取一滴原精液或經(jīng)稀釋的精液（馬、豬精液的精子密度低，不須稀釋；而牛、羊精液的密度大，%氯化鈉溶液稀釋，其溫度須與精液密度相近），滴在潔凈的載玻片上，蓋上潔凈的蓋玻片，其間充滿精液，不存留氣泡。也可滴在蓋玻片上翻放于凹玻片的凹窩上。置于顯微鏡下，放大250～400倍檢查。注意顯微鏡的載物臺(tái)須放平，最好是在暗視野中觀察。精子活動(dòng)有三種類型：直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)、旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)和原地?cái)[動(dòng)。評(píng)價(jià)精子活率是根據(jù)直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)的多少而定。精子活率＝100%分子也可用“總精子數(shù)非直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)表示。目前評(píng)定精子活率等級(jí)的方法有兩種：十級(jí)制——在顯微鏡視野中估算直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子所占全部精子的百分?jǐn)?shù)。直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子為100%；90%。以此類推。五級(jí)制——全部精子都呈直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)，屬于“5”級(jí)；絕大多數(shù)呈直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)（約80%）為“4”級(jí)；前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子略多于半數(shù)者（約60%）為“3”級(jí)；