【文章內容簡介】 粒增多。透明帶為較均一的厚層蛋白質膜。卵泡細胞層增厚。5）成熟卵泡：也叫Graafian卵泡。三級卵泡進一步成熟，形成充滿卵泡液的水泡，卵泡突出于卵巢表面。卵泡體積很大。卵泡腔擴大。此時初級卵母細胞長大成熟，核呈空泡狀，染色質很少，核仁明顯。胞漿內富有卵黃顆粒。排卵前即恢復并完成第一次減數分裂，結果形成大小不等的兩個細胞，大的細胞為次級卵母細胞，小的叫第一極體。透明帶變厚。極體呈卵圓形，位于透明帶與次級卵母細胞之間的卵黃周隙，只要由核質構成，以后逐漸退化。Graafian卵泡的卵泡壁由幾個功能細胞層構成。最外層，為有較多纖維細胞層的外膜；向內為內膜層。這兩種細胞層由毛細血管網提供血液。外膜與內膜層分界明顯，常合稱為卵泡膜。內膜增厚，內膜細胞肥大，呈圓形或多角形，類脂質顆粒增多，細胞核為橢圓形。在內膜層下面有一層基膜，將內膜與最內層細胞即顆粒細胞層分開?；ぷ柚寡芟到y(tǒng)進入顆粒細胞層。隨著卵泡腔擴大，顆粒細胞層變薄，包圍卵泡腔。顆粒細胞排列整齊。有時可見到細胞分裂。此外，卵丘（顆粒細胞形成的小丘）位于卵泡腔的一側。卵丘和其它顆粒細胞包裹卵母細胞。與卵母細胞直接接觸的顆粒細胞呈輻射狀排列，稱作放射冠。排卵開始時。放射冠細胞與周圍的卵泡壁顆粒細胞之間開始出現裂隙，彼此的聯系疏松。牛、羊、豬的卵泡在排卵前（馬排卵后）完成第一次減數分裂，形成次級卵母細胞。隨即開始第二次減數分裂，然后休止在中期（M）。受精過程才使第二次減數分裂恢復并完成。結果產生合子（受精卵）及第二極體。因而，牛、羊、豬、馬等家畜沒有真正的卵子存在。6）閉鎖卵泡：初級卵泡退化后，一般不留痕跡。但生長卵泡退化時，卵母細胞萎縮，透明帶皺縮塌陷，卵泡液被吸收，卵泡壁凹陷，以后結締組織侵入泡內。（2）黃體：是排卵后的卵泡轉變成的富于血管的內分泌器官。牛、羊、豬的黃體位于卵巢皮質淺層突出于表面。馬的黃體則完全埋藏在卵巢深部。根據黃體發(fā)育階段而分成下列各期。1）血體期：卵泡破裂后，血液流入卵泡腔內，形成血凝塊，也叫紅體期。2）增生期：當破裂卵泡傷口愈合，黃體細胞增生，外觀呈黃色。黃體細胞分下列兩種：A、粒黃體細胞：來源于卵泡顆粒細胞。多分布于黃體中心，著色淺，呈多角形，體積較大，胞質出現類脂質顆粒，球形細胞核明顯。B、膜黃體細胞：來源于內膜細胞。多分布在黃體邊緣或粒黃體細胞之間，體積小，核及胞質著色較深。3）血管盛開期：血管與結締組織伸入黃體中心，形成花彩狀，黃體細胞清晰可見。4）成熟期：黃體增大到最高峰，黃體內各種結構明顯。5）白體期：黃體退化、萎縮，變成白色的痕跡。3．輸卵管組織學輸卵管從外向內由漿膜、肌層和粘膜三層不同細胞層構成。（1）粘膜：由上皮和固有膜構成。粘膜形成若干初級縱襞，在壺腹內又分出許多次級縱襞。上皮：為單層柱狀纖毛上皮。其中央為無纖毛的分泌上皮細胞。在漏斗和壺腹部的的上皮纖毛較高，向子宮逐漸變低。纖毛向子宮端顫動，有助于卵的運送。分泌細胞的分泌物可供卵的營養(yǎng)。固有膜：由致密的纖維性結締組織構成。但在壺腹部組織較疏松，伸入皺褶內構成支柱。（2）肌層：分內環(huán)肌和外縱肌兩層。兩側之間無明顯界限?？拷訉m端的肌層較厚。傘部的外縱肌消失，僅含有分散的肌細胞。（3）漿膜：為輸卵管壁最外層。漿膜基本上為結締組織。在肌層和漿膜之間有很寬的一層疏松結締組織，叫漿膜下層，其中含有卵巢和子宮血管的分支、淋巴管、神經和縱行平滑肌。4．子宮組織學子宮壁分為三層：內膜、肌層和外膜。（1）內膜：由上皮和固有膜構成。上皮：為單層的柱狀上皮。細胞有時有纖毛。無纖毛的細胞有分泌性質。上皮陷入固有膜內，形成子宮腺。固有膜：又叫內膜基質。為環(huán)形的結締組織，纖維較細，還有網狀纖維和網狀細胞，之間有各種白細胞和巨噬細胞、淋巴管、血管和子宮腺。子宮腺是彎曲的分支管狀腺。管壁由單層柱狀上皮構成，多為分泌粘液的細胞，纖毛細胞較少。管壁外有分層的結締組織鞘。（2）肌層：分厚的內環(huán)肌和薄的外縱肌，在內外肌層之間為血管層，其中有神經分布。（3）外膜：為漿膜，由疏松結締組織和間皮組成。四、作業(yè)：1．通過觀察和比較，說明各種公、母畜生殖器官的形態(tài)、大小、相互關系和大體構造以及在活體上的位置有何特點。2．繪出任一種公、母畜生殖器官的標本圖。3．繪出并注明睪丸曲精細管及其所含細胞的構造圖。4．繪出并注明卵巢組織結構及卵泡發(fā)育各階段示意圖。實驗三 死活精子數的測定一、目的和要求掌握死活精子染色和制作抹片的方法。二、實驗原理活精子頭部是不易著色的，鏡檢時，精子頭部是透明、無色的。而死精子則因伊紅滲入細胞質，使整個精子頭部呈紅色。苯胺黑為背景染色，使著色的精子頭部可見。三、材料h1．精液：牛、豬或兔等任一種動物的精液。2．藥品器械：顯微鏡、載玻片、凹玻片、搪瓷盤、滴管、擦鏡紙、紗布、試管、75%酒精、5%伊紅、1%苯胺黑。四、方法和步驟%的伊紅和1%的苯胺黑按1:1混勻，分裝于1～2ml容量的試管中（加入試管容量的1/2），并在37℃水浴中加溫，隨后加入原精液1～3滴，搖勻后再放回水浴中，3min后立即取出待用。也可將染液預熱后，將伊紅、精液及苯胺黑按照1：1：1～2的比例及順序滴入預熱的凹玻片中混勻染色。，用另一載玻片進行推動制成抹片，待干燥后，高倍鏡鏡檢（400倍）。抹片時，最好在35～40℃的條件下制作，而且制作過程要快。也可將制好的抹片放在37～38℃保溫箱內干燥30～60秒。結果：活精子頭部是不易著色的，鏡檢時，精子頭部是透明、無色的。而死精子則因伊紅滲入細胞質，使整個精子頭部呈紅色。苯胺黑為背景染色，使著色的精子頭部可見。在高倍鏡下數200或500個精子，其中分別數出死、活精子各占的百分率?；罹影俜致士偸且染踊盥矢?。活精子百分率＝100%五、作業(yè)計算活精子百分率，比較其與精子活率的大小并說明原因。實驗二精子的活率和密度測定一、目的和要求掌握檢查精子密度、評定活率的方法；熟悉肉眼檢查精液品質的方法；驗證觀察理化因素對精子運動及生存能力的影響。由于目測法不夠準確，所以采用精子計數的方法，測定1ml精液內的精子數。不過要有一定經驗才會準確。要求同學們一定要熟練掌握此法，它是目前許多簡單而實用方法的基礎。二、材料和儀器1．精液：牛、豬或兔等任一種動物的精液。2．藥品器械：顯微鏡、顯微鏡保溫箱（或顯微鏡恒溫臺）、載玻片、蓋玻片、搪瓷盤、溫度計、滴管、擦鏡紙、紗布、試管、75%酒精、5%伊紅、1%苯胺黑、血細胞計數板、計數器、95%酒精、乙醚、％和3%NaCl、保溫瓶、藥棉等。三、內容和方法（一）精子密度的檢查（顯微鏡觀測法）及活率評分1．檢查精子的密度：取一小滴精液于潔凈的載玻上，蓋上潔凈的蓋玻片，使精液分散成均勻的一薄層，不得有氣泡存留，也不能使精液外流或溢出于蓋玻片上。置于顯微鏡下放大100倍觀察，按下列等級評定其密度。密——在整個視野中精子的密度很大，彼此之間空隙很小，看不清各個精子個體運動的情況。每毫升精液含精子數約在10億個以上。登記時以“密”字。中——精子之間空隙明顯，精子彼此之間的距離約有一個精子的長度，有些精子的活動情況清楚可見。這種精液的密度評為“中”，每毫升所含精子數約2～10億個之間。登記時以“中”字。稀——視野中精子稀疏、分散，精子之間的空隙超過一個精子的長度。這種精液每毫升所含精子數在2億以下。登記時以“稀”字。2．評定精子的活率：必須于采精后立刻在25℃左右的實驗室內進行，最好在37℃保溫箱內或加熱的載物臺上進行。在評定精子活率的同時也可以測定精子的密度。用玻璃棒蘸取一滴原精液或經稀釋的精液（馬、豬精液的精子密度低，不須稀釋；而牛、羊精液的密度大，%氯化鈉溶液稀釋，其溫度須與精液密度相近），滴在潔凈的載玻片上，蓋上潔凈的蓋玻片，其間充滿精液，不存留氣泡。也可滴在蓋玻片上翻放于凹玻片的凹窩上。置于顯微鏡下，放大250～400倍檢查。注意顯微鏡的載物臺須放平，最好是在暗視野中觀察。精子活動有三種類型：直線前進運動、旋轉運動和原地擺動。評價精子活率是根據直線前進運動精子數的多少而定。精子活率＝100%分子也可用“總精子數非直線前進運動精子數表示。目前評定精子活率等級的方法有兩種：十級制——在顯微鏡視野中估算直線前進運動精子所占全部精子的百分數。直線前進運動的精子為100%；90%。以此類推。五級制——全部精子都呈直線前進運動，屬于“5”級；絕大多數呈直線前進運動（約80%）為“4”級；前進運動精子略多于半數者（約60%）為“3”級；