工業(yè)用溶菌酶行業(yè)標準簡要編制說明(編輯修改稿)
2025-05-11 06:53 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 標準草稿中酶活測定方法等同轉化FCC的方法，但實驗室在驗證時發(fā)現(xiàn)直接按FCC方法，無法獲得酶活測定結果，測定底物濃度與儀器初始濃度存在不匹配的問題，且實驗過程中必須規(guī)定相關細節(jié)才能保證實驗結果的準確、一致性。因此，本標準中的酶活測定方法參照FCC的測定方法做適當調(diào)整，具體調(diào)整如下：——測定用底物：為了保證酶活測定的準確性及一致性，必須指定測定用底物，其中JECFA指定使用ATCC4689溶壁微球菌，底物配制時按干菌粉給出配制方法及初始底物溶液吸光值；FCC直接指定Sigma M3700，或同等分析效果的產(chǎn)品。作為一般企業(yè)或質(zhì)檢機構ACTT4689菌種購進手續(xù)繁瑣，且存在被告知為國內(nèi)限制購入產(chǎn)品而無法購得的可能。Sigma M3700為ACTT4689的活菌制品，價格昂貴，且為一次性使用產(chǎn)品，對于企業(yè)連續(xù)測定成本較高。為了便于標準發(fā)布后測定方法的有效執(zhí)行，起草組委托食發(fā)院菌種中心引進ACTT4689菌種，并接種培養(yǎng)配制成不同濃度，配合起草組各實驗室進行FCC方法的有效轉化。起草過程中有關單位提出，菌種的接種培養(yǎng)及稀釋度的控制專業(yè)性較強，如果直接要求菌種中心提供合適濃度的菌懸液，又存在運輸困難且由于運輸、儲存條件的變化造成菌液不穩(wěn)定的情況。因此，本標準制定也考慮自制標準測定用菌粉的可能。經(jīng)實驗比對，文本給出ACTT4689編號及對應CICC菌種編號，同時考慮給出CICC菌粉編號。日本也是制定本國菌種編號及標準酶編號?！孜锶芤海篎CC以空氣調(diào)分光光度計零點，底物溶液的吸光度，177。，～；本標準以磷酸鹽緩沖液調(diào)分光光度計零點，然后測定底物溶液的吸光度，177?！富盍y定步驟：增加“，方可開始測定”，確保底物溶液的穩(wěn)定且沒有受到溶菌酶的污染；增加“反應1min后穩(wěn)定，計算時忽略最初1min的讀數(shù)”，以保證酶活測定在有效的線性范圍內(nèi)，保證酶活測定的準確性。附表1：國內(nèi)外溶菌酶質(zhì)量規(guī)格指標對照表項目 標準本標準
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