現代生物科技專題訓練(編輯修改稿)
2025-05-04 03:45 本頁面
【文章內容簡介】 出目的基因兩側被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端。 。(3)pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點，現將經BamHI處理后的質粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復 鍵，成功的獲得了重組質粒。說明 。(4)為了檢測上述重組質粒是否導入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現型是 ，圖三結果顯示，多數大腸桿菌導入的是 。23．降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學機構為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA，過程如下圖。在此過程中發(fā)現，合成較長的核苷酸單鏈易產生缺失堿基的現象。分析回答下列問題：（1）Klenow酶是一種________酶，合成的雙鏈DNA有________個堿基對。（2）獲得的雙鏈DNA經EcoRⅠ（識別序列和切割位點G↓AATTC）和BamHⅠ（識別序列和切割位點G↓GATCC）雙酶切后插入到大腸桿菌質粒中，篩選含重組質粒的大腸桿菌并進行DNA測序驗證。①大腸桿菌是理想的受體細胞，這是因為它_________________________。②設計EcoRⅠ和BamHⅠ雙酶切的目的是___________________________。③要進行重組質粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質粒中含有_______________。（3）經DNA測序表明，最初獲得的多個重組質粒，均未發(fā)現完全正確的基因序列，最可能的原因是_______________。（4）上述制備該新型降鈣素，運用的現代生物工程技術是____________________。24．蘇云金桿菌（Bt）能產生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖（為抗氨芐青霉素基因），據圖回答下列問題。（1）將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應管中有 種DNA片段。（2）圖中②表示 HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得 種重組質粒；如果換用Bst l與BamHⅠ酶切，目的基因與質粒連接后可獲得 種重組質粒。 （3）目的基因插入質粒后，不能影響質粒的 。（4）圖中③的Ti質粒調控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的T—DNA導人植物細胞，并防止植物細胞中 對T—DNA的降解。（5）已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞 。 （6）生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的 基因頻率的增長速率。25. 人體細胞內含有抑制癌癥發(fā)生的P53基因，生物技術可對此類基因的變化進行檢測。（1）目的基因的獲取方法通常包括________和________。（2）上圖表示從正常人和患者體內獲取的P53基因的部分區(qū)域。與正常人相比，患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出發(fā)生改編的堿基對，這種變異被稱為________。（3）已知限制酶E識別序列為CCGG,若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P53基因部分區(qū)域（見上圖），那么正常人的會被切成________個片段，而患者的則被切割成長度為________對堿基和_
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