臍血干細胞的生產(chǎn)與作用臍血干細胞的生產(chǎn)與作用生產(chǎn)生物技術及應用(編輯修改稿)
2025-05-01 23:51 本頁面
【文章內容簡介】 研究和臨床實踐顯示臍血移植優(yōu)勢明顯［2］。對于臍血等成體干細胞移植的臨床應用前景，國際醫(yī)學權威雜志(TheNewEn．glandJournalofMedicine))和(Blood))雜志曾對此做過全面的綜述“]。UCBT現(xiàn)階段可治療的疾病血色素與血液異常巨細胞缺乏性血小板減少癥(AMT)，再生障礙性貧血，先天性血球細胞缺乏癥，鐮狀細胞性貧血，地中海性貧血，Blackfan—Diamond貧血，Evan綜合征，F(xiàn)ancon貧血，Kostmann綜合征疾病急性淋巴細胞性白血病(ALL)，急性骨髓性白血病(AML)，急性非淋巴細胞性白血病(ANL)，慢性淋巴細胞性白血病(CLL)，慢性骨髓細胞性白血病(CML)，年青型骨髓單核細胞性白血病(JML)，骨髓發(fā)育不良綜合征(MDS)，多發(fā)性骨髓瘤。體性腫瘤腦瘤，何杰金病，非何杰金淋巴瘤，Ew。ng肉瘤，生殖細胞腫瘤，神經(jīng)母細胞瘤,卵巢癌，小細胞性肺癌，睪丸癌。先天性代謝性缺陷腦白質腎上腺營養(yǎng)不良癥，淀粉樣變性，巴爾．淋巴球綜合征，先天性角化不良，家族性噬紅細胞性淋巴組織細胞增生癥，Gaucher疾病，Gunter疾病，Hunter綜合征，Hurler綜合征，遺傳性神經(jīng)元蠟樣脂褐質沉著癥，Krabbe疾病(嬰兒遺傳性腦白質萎縮)，Langerhan細胞組織細胞增生癥，Lesch—Nyhan疾病，骨硬化病(骨質石化病)，白細胞黏著缺乏癥。免疫缺陷病變腺嘌呤去氨酵素缺乏(ADA)，慢性肉芽腫疾病(CGD)，嚴重性聯(lián)合免疫缺陷疾病(SCIDs)，X一性連鎖性淋巴組織增生疾病(KLP)，Wiskott．Aldrich癥候。自體免疫疾病多發(fā)性硬化癥，風濕性關節(jié)炎，紅斑性狼瘡［3］?，F(xiàn)在庫存分離干細胞最廣泛的方法是HES（羥乙基淀粉）沉淀分離法［4］。可以有效的去除多余紅細胞，保留絕大多數(shù)的有核細胞。從而達到臨床應用的標準。而冷凍主要是往分離后的臍血中加入DMSO和右旋糖苷配置的防凍液后迅速把溫度降低至零下180℃并轉移至液氮罐中保存。［4］器材5ml，10ml，15ml，20ml,30ml,50ml的注射器，EP管，10ml軟試管，100ml轉移袋，50ml冷凍袋，止血鉗，滅菌剪刀，超凈工作臺，血漿夾，熱合機，電子秤，酒精燈，碘酒，75%酒精，醫(yī)用棉簽，細菌培養(yǎng)瓶，HES，離心機，天平步驟第一步離心 把血液放入超凈工作臺中。用止血鉗夾住皮管，并用碘酒擦拭要剪開的部位擦拭完后用酒精脫碘。用滅菌剪刀剪開止血鉗上部的皮管，取1ml的血液用做有核細胞的讀數(shù)和血型檢測。抽取HES打入血液中，抽取的量約為血液總量的五分之一。把混合后的血液轉移至100ml轉移袋中，放入離心機中離心7分鐘，離心的時候袋口部位朝下以利于離心后抽去紅細胞。第二步離心，走離心機中取出血液，取的時候盡量避免震蕩以免破壞分層。血液分離后分為三層，上層為透明狀的血漿，中層為半透明的紅細胞與有核細胞的混合體，下層為沉淀的紅細胞。用止血鉗夾住轉移袋頂端并掛在超凈臺的頂部使其懸空。用止血鉗夾住皮管，按無菌抄作規(guī)范剪開止血鉗下部，抽去沉淀的紅細胞，抽去的量最少是加入HES的量。熱合剪開部位放入離心機中離心21分鐘。去除多余血漿， 走離心機中取出血液，取的時候盡量避免震蕩以免破壞分層。這步離心后分為三層，上層為透明狀的血漿，中層為有核細胞層，下層為剩余紅細胞與有核細胞的混合層。把離心后的血液放入血漿夾中，緩慢夾緊以避免有核細胞的騰起所造成的損失。用止血鉗夾住皮管，按無菌操作剪開皮管，緩慢打開止血鉗放出多余氣體。用注射器抽取15ml血漿打入細菌培養(yǎng)瓶中檢測是否染菌。抽去多余血漿只留下32ml的血液。用無塵布輕輕擦拭轉移袋外部，把內部貼壁的有核細胞擦下。有
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