彗星實(shí)驗(yàn)(英語(yǔ)版)(編輯修改稿)
2025-05-01 00:48 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 治療前測(cè)得乏氧分?jǐn)?shù)。 1．32細(xì)胞的內(nèi)在敏感性影響內(nèi)在敏感性的主要因素是細(xì)胞修復(fù)DNA 損傷的能力不同。SCGE檢測(cè)DNA修復(fù)能力的原理在于：細(xì)胞經(jīng)受試物作用以后進(jìn)行孵育（DNA進(jìn)行修復(fù)），比較孵育前后DNA 遷移的變化可得出DNA的修復(fù)能力。這方面已有大量的文獻(xiàn)報(bào)道。呂長(zhǎng)興等［11］用堿性SCGE測(cè)出鼻咽癌高分化鱗癌細(xì)胞系比肺腺癌細(xì)胞系半修復(fù)時(shí)間長(zhǎng)，這與CNE1對(duì)放療更敏感（D0值?。┯休^好的對(duì)應(yīng)關(guān)系；Olive等［12］測(cè)得人淋巴細(xì)胞TK6與鼠的L178YR細(xì)胞比CHO，V79修復(fù)明顯減慢而出現(xiàn)較多的殘余損傷，從而認(rèn)為TK6與L178YR細(xì)胞系存在修復(fù)缺陷。故SCGE法可發(fā)現(xiàn)修復(fù)缺陷細(xì)胞系，預(yù)測(cè)不同腫瘤的修復(fù)能力。大量實(shí)驗(yàn)提示乳腺癌患者“彗星”法測(cè)得的成纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)能力和臨床皮膚放射反應(yīng)存在良好的相關(guān)性［13,14］。與以往的檢測(cè)DNA修復(fù)實(shí)驗(yàn)如：核酸探針法、病毒探針法比較，具有簡(jiǎn)單、快速、靈敏和不需同位素標(biāo)記等優(yōu)點(diǎn)。 1．33細(xì)胞周期在“彗星”檢測(cè)中，由于熒光染料與DNA 的結(jié)合是特異的，根據(jù)熒光強(qiáng)度可以對(duì)DNA進(jìn)行定量，從而鑒別不同周期、不同倍體的細(xì)胞。以往的一系列檢測(cè)均未能測(cè)得處于不同細(xì)胞周期的細(xì)胞對(duì)同一處理存在DNA鏈斷裂發(fā)生和重接率的差異。Olive等［12］用堿“彗星”分析DNA 損傷和細(xì)胞周期位置發(fā)現(xiàn)，測(cè)量單鏈斷裂的“彗尾”和半修復(fù)時(shí)間因細(xì)胞所處的細(xì)胞周期不同而不同。G1期的細(xì)胞半修復(fù)時(shí)間(37 s)較其他期細(xì)胞(51 s)短，故認(rèn)為“彗星”法能檢測(cè)出處于不同周期的細(xì)胞對(duì)射線修復(fù)能力的細(xì)小變化。S期的細(xì)胞用“彗星”法檢測(cè)鏈斷裂的敏感性均較其他期低，這是因?yàn)閺?fù)制產(chǎn)生的問題。S期DNA復(fù)制時(shí)形成的復(fù)制叉在堿性裂解液或電泳液時(shí)形成單鏈斷裂，所以增加了S期細(xì)胞的損傷背景。 134低劑量放射超敏感性的預(yù)測(cè)低劑量超敏感性即有些細(xì)胞在受到50 cGy照射存在敏感性增高的現(xiàn)象，這使得靶區(qū)外正常組織的生物效應(yīng)將高于以前的預(yù)測(cè)值。因傳統(tǒng)的克隆記數(shù)法不能評(píng)價(jià)100 cGy的肩區(qū)的存活變化，而SCGE具有高度敏感性，故可用于探測(cè)此現(xiàn)象。以便常規(guī)照射或三維適形放射治療時(shí)，盡量考慮野外正常組織的低劑量超敏問題以避免出現(xiàn)較嚴(yán)重的損傷。 由于“彗星”法能檢測(cè)出上述影響放射敏感性的因素，從而鑒別對(duì)射線敏感或抗拒的亞細(xì)胞群在放射生物學(xué)領(lǐng)域有重要的應(yīng)用價(jià)值。近年來(lái)隨著ATM，KU，XRCC等DNA修復(fù)相關(guān)基因功能的闡明，通過此途徑修飾細(xì)胞的輻射敏感性成為可能，而SCGE成為不可缺少的檢測(cè)工具。 14探討輻射致突變、致癌、致死效應(yīng)的機(jī)制由于SCGE可靈敏的檢測(cè)出各種DNA損傷與修復(fù)，故可用于探討輻射致突變、致癌、致死效應(yīng)具體是因?yàn)镈NA雙鏈斷裂、斷鏈重接失真，還是因?yàn)閴A基損傷或鏈間交聯(lián)等引起。用SCGE檢測(cè)著色性干皮?。╔P）患者經(jīng)uv照射后的淋巴細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其“彗星”細(xì)胞百分率較正常人淋巴細(xì)胞經(jīng)uv照射后明顯減少，提示切除修復(fù)中被切開的DNA鏈減少。是核酸內(nèi)外切酶存在缺陷。毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)（AT）患者卻對(duì)電離輻射的敏感性比正常人大3～4倍。最近用SCGE證實(shí)AT細(xì)胞除了缺乏細(xì)胞周期控制，它修復(fù)雙鏈的能力也甚微［15］，并且很不精確，DNA分子游離端重接率很差，這就提示遺傳重組方面有短缺。范康尼貧血癥（FA）為一常染色體隱性遺傳病。Djuzenova等［16］報(bào)道不同的實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立測(cè)得的FA及FA攜帶者DNA初始損傷的尾力矩都明顯增高，且30～50 min殘余損傷和半修復(fù)時(shí)間較正常人明顯增高。 2小結(jié) 在放射生物學(xué)領(lǐng)域，SCGE已非常廣泛用于各種輻射損傷的檢測(cè)、放射敏感性的預(yù)測(cè)、輻射致癌致畸致突機(jī)制的探討、輻射修飾劑的評(píng)價(jià)等多個(gè)方面，均顯示了快速、簡(jiǎn)便、靈敏等顯著的優(yōu)越性。隨著計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)的完善及某些標(biāo)準(zhǔn)的統(tǒng)一，SCGE技術(shù)將成為放射生物學(xué)研究必不可
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