呼吸道病毒7項(xiàng)檢測(cè)試劑(編輯修改稿)
2025-04-21 12:23 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 直至黏液層被完全去除。注意：一定要將黏液去除干凈，否則會(huì)造成非特異熒光從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。⑧ mL的PBS緩沖液。⑨用移液器反復(fù)吹吸來重懸細(xì)胞沉淀，形成一個(gè)略混濁的懸液。這個(gè)懸濁液可用于直接樣本測(cè)試。直接樣本測(cè)試步驟：①在2孔或8孔板上的每孔內(nèi)滴加25 181。L的細(xì)胞懸濁液。②樣本完全風(fēng)干。③在20186。C到25186。C，用預(yù)冷的100%丙酮固定細(xì)胞約5到10分鐘。注意：丙酮是易揮發(fā)、可燃性物質(zhì)，使用時(shí)請(qǐng)遠(yuǎn)離明火。④從丙酮中取出載玻片并風(fēng)干。⑤在固定并風(fēng)干的細(xì)胞上滴加一滴DFA染色試劑（如圖1），使其完全覆蓋細(xì)胞（注意：2孔或8孔板上有一孔是陰性對(duì)照孔，請(qǐng)勿滴加DFA染色試劑）。⑥在呼吸道病毒抗原對(duì)照板的每孔內(nèi)也要滴加DFA染色試劑?？乖瓕?duì)照板包含了被病毒感染的細(xì)胞和未感染的細(xì)胞，只能一次性使用。⑦在陰性對(duì)照孔內(nèi)滴加正常鼠丙種球蛋白試劑，使其完全覆蓋細(xì)胞。⑧將載玻片放于35186。C到37186。C的恒溫箱內(nèi)孵育15到30分鐘，為保持其濕潤(rùn)最好放置于帶蓋的盒子內(nèi)。⑨用事先稀釋好的洗液漂洗染色細(xì)胞。為了更有效地洗滌，請(qǐng)將玻片在洗液中反復(fù)浸蘸4次左右。⑩使用新的1X洗液再洗一次。?用去離子水再洗一遍。圖在玻璃板上滴加D3 Ultra DFA染色試劑觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果滴加2到3滴固定液，并加蓋蓋玻片（20X50 mm），要注意避免產(chǎn)生氣泡。在200倍放大熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。 D3 Ultra DFA試劑實(shí)驗(yàn)結(jié)果判讀帶FITC標(biāo)記的抗體在熒光顯微鏡下會(huì)呈現(xiàn)明亮的綠色，如果細(xì)胞表面存在病毒抗原，染色后就會(huì)顯綠色。在熒光顯微鏡下，感染不同病毒的細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)獨(dú)有的特征（如圖2）。圖顯微鏡下觀察染色細(xì)胞（注：根據(jù)不同熒光顯微鏡，背景色不一定為紅色）3．D3 Ultra DFA試劑競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì) 檢驗(yàn)的特異性和靈敏度檢驗(yàn)的特異性: 用D3 Ultra DFA 呼吸道病毒篩查和鑒定試劑對(duì)多種細(xì)胞和微生物進(jìn)行交叉反應(yīng)測(cè)試。對(duì)64種病毒、18種細(xì)胞、19種細(xì)菌均沒有交叉反應(yīng)。檢驗(yàn)的靈敏度： PFU。 市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)主要競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手為西班牙Vircell公司的9項(xiàng)呼吸道產(chǎn)品。D3 Ultra DFA試劑與其主要有兩點(diǎn)不同：1. 檢測(cè)項(xiàng)目不同；2. 檢測(cè)原理不同Vircell產(chǎn)品檢測(cè)項(xiàng)目除了以上7種病毒外，還包含肺炎衣原體、支原體等原核生物檢測(cè)項(xiàng)目。但是，90%的感冒是由病毒引起的。如果是細(xì)菌、衣原體、支原體等感染，一般白細(xì)胞和C
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