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正文內(nèi)容

呼吸道病毒7項檢測試劑(編輯修改稿)

2025-04-21 12:23 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 直至黏液層被完全去除。注意:一定要將黏液去除干凈,否則會造成非特異熒光從而影響實驗結(jié)果。⑧ mL的PBS緩沖液。⑨用移液器反復(fù)吹吸來重懸細胞沉淀,形成一個略混濁的懸液。這個懸濁液可用于直接樣本測試。直接樣本測試步驟:①在2孔或8孔板上的每孔內(nèi)滴加25 181。L的細胞懸濁液。②樣本完全風干。③在20186。C到25186。C,用預(yù)冷的100%丙酮固定細胞約5到10分鐘。注意:丙酮是易揮發(fā)、可燃性物質(zhì),使用時請遠離明火。④從丙酮中取出載玻片并風干。⑤在固定并風干的細胞上滴加一滴DFA染色試劑(如圖1),使其完全覆蓋細胞(注意:2孔或8孔板上有一孔是陰性對照孔,請勿滴加DFA染色試劑)。⑥在呼吸道病毒抗原對照板的每孔內(nèi)也要滴加DFA染色試劑??乖瓕φ瞻灏吮徊《靖腥镜募毎臀锤腥镜募毎荒芤淮涡允褂?。⑦在陰性對照孔內(nèi)滴加正常鼠丙種球蛋白試劑,使其完全覆蓋細胞。⑧將載玻片放于35186。C到37186。C的恒溫箱內(nèi)孵育15到30分鐘,為保持其濕潤最好放置于帶蓋的盒子內(nèi)。⑨用事先稀釋好的洗液漂洗染色細胞。為了更有效地洗滌,請將玻片在洗液中反復(fù)浸蘸4次左右。⑩使用新的1X洗液再洗一次。?用去離子水再洗一遍。圖在玻璃板上滴加D3 Ultra DFA染色試劑觀察實驗結(jié)果滴加2到3滴固定液,并加蓋蓋玻片(20X50 mm),要注意避免產(chǎn)生氣泡。在200倍放大熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。 D3 Ultra DFA試劑實驗結(jié)果判讀帶FITC標記的抗體在熒光顯微鏡下會呈現(xiàn)明亮的綠色,如果細胞表面存在病毒抗原,染色后就會顯綠色。在熒光顯微鏡下,感染不同病毒的細胞會呈現(xiàn)獨有的特征(如圖2)。圖顯微鏡下觀察染色細胞(注:根據(jù)不同熒光顯微鏡,背景色不一定為紅色)3.D3 Ultra DFA試劑競爭優(yōu)勢 檢驗的特異性和靈敏度檢驗的特異性: 用D3 Ultra DFA 呼吸道病毒篩查和鑒定試劑對多種細胞和微生物進行交叉反應(yīng)測試。對64種病毒、18種細胞、19種細菌均沒有交叉反應(yīng)。檢驗的靈敏度: PFU。 市場競爭主要競爭對手為西班牙Vircell公司的9項呼吸道產(chǎn)品。D3 Ultra DFA試劑與其主要有兩點不同:1. 檢測項目不同;2. 檢測原理不同Vircell產(chǎn)品檢測項目除了以上7種病毒外,還包含肺炎衣原體、支原體等原核生物檢測項目。但是,90%的感冒是由病毒引起的。如果是細菌、衣原體、支原體等感染,一般白細胞和C
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