【文章內(nèi)容簡介】 煮沸的無離子水中，攪動，使其充分溶解，冷卻至 58℃，過濾于棕色試劑瓶，冷卻至 26℃，加入 10ml1mol/L HCl和 偏重亞硫酸鈉（ Na2S2O5），振搖使其溶解混均，密封瓶口，置黑暗低溫（ 10℃）處， 4— 12 小時檢查，待溶液透明無色或呈淡茶色即可使用。如果發(fā)現(xiàn)仍有不同程度的紅色未褪盡，可加入 性炭不斷振搖后，在黑暗低溫（ 4℃）處靜置過夜，過濾后可以使用。 通常經(jīng)活性炭處理后的試劑著色力會減弱，所以最好不要用活性炭處理，關(guān)鍵的問題在于偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量，好的偏重亞硫酸鈉打開瓶蓋即有明顯的 SO2氣味 （ 李懋學，張敦芳， 1991） 。 漂洗液： 5ml 1mol/L HCl+5ml 10% Na2S2O5 +100ml H2O。 材料處理和染色程序 ： 1）固定材料經(jīng) 50%酒精轉(zhuǎn)入蒸餾水； 2）將材料浸入事先預熱至 60177。 1℃的 1mol/L HCl保溫 5— 15分鐘； 3）冷 1mol/L HCl洗一次； 4）浸入 Schiff試劑染色（ 10℃黑暗條件） 1— 2小時； 5）漂洗液漂 洗三次，每次 5分鐘； 6）蒸餾水洗 5— 10分鐘； 7） 45%乙酸壓片。 壓片操作及制作永久封片 1） 壓片準備和操作 植物染色體壓片法是目前國內(nèi)外最普遍采用的方法。這是一種手工技術(shù)，因此，具體的操作方法和使用的工具并無一定之規(guī)。但目的只有一個，那就是使分生組織中期分裂相細胞染色體分散開來，使我們在顯微鏡下可清晰地辨別每一染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu) （ 李懋學，張敦芳， 11 1991） 。但影響染色體分散效果的因素很多。內(nèi)因包括具體植物細胞壁的成分性質(zhì)、細胞質(zhì)的粘滯度和染色體的大?。煌庖虬ㄇ疤幚砗徒怆x的適 當與否和操作者技術(shù)的掌握。 工具包括不銹鋼尖鑷子、一支鉛筆、載玻片和蓋玻片若干。此外，還需酒精燈、雙面刮胡刀片和濾紙等。 國產(chǎn)載玻片和蓋玻片都不是很干凈，如果想得到好的結(jié)果，建議認真清洗之。方法是煮沸一鍋（鍋要干凈）蒸餾水，加入適量無酶洗衣粉，而后將載玻片一片一片放入水中浸泡半個工作日，再一片一片取出，同時用干凈紗布兩側(cè)擦洗，放自來水下流水沖洗掉洗衣粉泡沫，轉(zhuǎn)入蒸餾水浸泡，最后放入標本缸，加入 70%酒精儲存?zhèn)溆谩Ｓ弥叭〕?，用新紗布擦干放入干凈盒子中即可使用。染色體壓片用蓋玻片為 20179。 20mm2至 24179。 24mm2。很薄不能像 載玻片一樣清洗，一般是直接放入 70%酒精中浸泡適當時間，用前紗布擦干即可。操作之前應注意環(huán)境的潔凈。 在壓片時注意不能劃片，并進行敲片（是染色體盡量分散），操作過 程因人而異，熟能生巧。掌握兩個過程，首先是細胞分散（但不破裂）， 其次是染色體分散。 2）制作永久封片 a) 冰凍揭蓋片：現(xiàn)在一般使用液氮，用雙面刀片撬起蓋片，保留載片； b) 干燥：載片放入溫箱（不超過 60℃）烘干 24小時； c) 樹膠封片：生物學制片專用膠，化學試劑公司有售，滴加樹膠，加蓋新的蓋玻片； d) 干燥封固：室溫或 3045℃溫箱 （ 尤瑞麟， 2022） 。 酶解去壁低滲法簡介 如果感覺以上步驟之后鏡檢效果不是很理想可以考慮進行低滲，起作用是幫助細胞的解離，使細胞中染色體更易分散 （ 李國珍， 1985；劉祖洞， 1987） 。 1）前低滲 經(jīng)預處理的材料，傾去預處理液，直接加入 ， 25℃左右處理30分鐘。 2）酶解去壁 吸除低滲液，加入 %的纖維素酶和果膠酶（ 1： 1）混合液， 37℃消化 10 分鐘。 3）后低滲 用同溫蒸餾水將材料輕輕清洗 2— 3次去酶，然后在雙蒸水中停留 10— 30 分鐘。 參考文獻： [1] 李懋學，張敦芳 .植物染色體研究技術(shù)， 1991 [2] 劉祖洞《遺傳學》上、下冊，高教出版社， 1990 [3] 周云龍主編 . 植物生物學（第 2版） . 北京：高等教育出版社 , 2022 [4] 楊 繼主編 . 植物生物學（第 2版） . 北京 : 高等教育出版社 , 2022 [5] 楊漢民 .細胞生物學實驗，高等教育出版社， 1997 [6] 李樹賢 .植物染色體與遺傳育種，科學教育出版 [7] 尤瑞麟 .植物學實驗技術(shù)教程 —— 組織培養(yǎng)、細胞化學和染色體技術(shù) .北京大學出版社，2022 [8] 李國珍 .染色體及其研究方法，科學出版社。， 1985 [9] 李博主編 . 生態(tài)學 .高等教育出版社 ,2022 [10] 劉祖洞 .遺傳學實驗，高教出版社， 1987 [11] 洪德元 .植物細胞分類學，科學出版社， 1990 [12] 劉永安 ,馮海生 ,陳志國等 .植物染色體核型分析常用方法概述 [J].貴州農(nóng)業(yè)科學 ,2022, 34(1):98～ 102 12 （ 二 ）成果情況 通過以上比較深入的理論學習，以及在我們實驗過程中的實踐論證，經(jīng)過幾周的不斷改良，我們初步確定了能染上很好效果的染液配方，這樣的配方配出的染液不僅可對 菊 科 風毛菊 屬 的材料有良好的效果，對其他材料比如豆科 冬麻豆、膀胱豆、黃花木、銀合歡， 桔?？扑{鐘花 、菊科 風毛菊 的種子都有良好的效果， 染色體著色深，細胞質(zhì)著色淺，對比鮮明，有利于核型分析中染色體的計數(shù)與測量，對進一步開展實驗有很好的保障。 具體配方如下： 1 卡寶品紅配制方法 1) 原液 A：稱 3g堿性品紅溶于 100ml70%酒精（此液可無限期儲存，不會變質(zhì)）。 2) 原液 B：取 10ml 原液 A 與 90ml 5%苯酚水溶液混合，置 37℃溫箱溶解 2— 4 小時（此液不穩(wěn)定，限 2周之內(nèi)使用）。 3) 原液 C：取原液 B 55ml與冰乙酸、甲醛各 6ml混合均勻 （此液也稱為苯酚品紅，也可進行染色，不過效果不好，染染得過深） 。 4) 染色液：取原液 C 20ml，加入 80ml 45%冰 乙酸和 g山梨醇混合溶解 （此液也稱為改良苯酚品紅，兩周后染色效果很好） 。 該染色液配制后為淡品紅色，如果立即使用染色較淡，放置 2 周后染色能力明顯增強，而且放置的時間越久染色效果越好。此液可在常溫下存放 2 年保持穩(wěn)定不變質(zhì)。 染色時采用滴染方法，在 應用該染色液 時 ，染色的效果與鹽酸解離有密切關(guān)系。 2 地衣紅 先配制 500ml 45%的醋酸水溶液，在電驢上加熱煮沸 ，移去火源，緩緩 （切忌緩慢，否則噴濺危險） 加入 ，攪動溶解 ,待全部投入后再煮 12min，并加入一顆生銹的鐵釘， 1min后取出。 此染液染上的細胞呈淡紅色，染色體呈深紅色，對比很良好，便于觀察。注意 地衣紅易溶于酒精，制片不可用酒精脫水封片。 通過前期的實驗準備及展開實驗，比較相鄰屬的實驗方法，進行梯度試驗，不斷總結(jié)，得到了以下處理菊科風毛菊屬種子及 核型染色體研究的操作方案： 鑒于在實驗室的現(xiàn)有條件和空間，不能對植株進行直接栽種培養(yǎng)，所以取材不能采用植株的芽尖、莖尖等分生區(qū)旺盛的部位，而是對種子進行萌發(fā)培養(yǎng) ，這也是為了避免在同一植株上做該物種的核型研究，所用的種子來自同種不同居群，保證了得出的結(jié)論的代表性和科學性。首先將 待測種子放入培養(yǎng)皿中兩 層濾紙上，加水 至種子處于濕潤的環(huán)境，保障種子發(fā)芽時所需的水環(huán)境。然后將培養(yǎng)皿 置 于 2226℃ 的恒溫箱中萌發(fā) 培養(yǎng)， 風毛菊屬種子的萌發(fā)周期一般為 57 天， 810 天后根的長度就可達到實驗取材時所需的長度 ，然后將長度適宜的幼根 取下 ，置于處理用的瓶子內(nèi)， 室溫下 用 8羥 基喹啉處理 45 小時， 此過程要嚴格避光，確保預處理的效果。預處理之后再將材料用蒸餾 水沖洗三次， 于 4℃冰箱中卡諾氏固定液（無水乙醇： 冰 醋酸 =3： 1，現(xiàn)配現(xiàn)用 ）固定 1224 小時 ，因固定液易揮發(fā)，在處理時要換固定液 12 次 。固定好之后將材料用蒸餾水沖洗三次， 用 1mol/L 的 HCl 在 60℃下 水浴解離 1015min，解離時間的長短非常重要，直接影響著染色的效果和敲片后染色 體在細胞中的形態(tài)，所以嚴格控制好時間，時間一到馬上進行下一步的處理。解離好之后需用蒸餾水沖洗 6 次，目的是為了把殘留在根尖上的鹽酸清洗干凈，染色時才不會受鹽酸的影響，沖洗好之后用卡寶品紅染色 812 小時，就可進行壓片鏡檢了，在 光學顯微鏡下觀察， 低倍鏡下找到細胞，再換至高倍鏡下觀察，找到中期細胞， 在 100 倍油鏡下挑選分裂相清晰、染色體收縮長短適中、著絲粒明顯的細胞進行拍照，保存細胞圖片，其中間期、前期、中期、后 13 期、末期的細胞圖都要有，以便進行接下來的核型分析。并對 染色體分散良好、形態(tài)清晰 、中期細胞多 的片子 用樹脂膠片封片制成永久封片在冰箱里保存。 同時 ，在 整個 實驗進行中各個步驟所處理的時間是嚴格保證的，所以處理好一步之后就要做好下一步的準備，通常是設(shè)一個鬧鐘以提醒自己下一步的處理時間到了。 綜上所述，經(jīng)過改良的卡寶品紅可以使風毛菊屬 的材料染上很好的效果，以及經(jīng)過實驗探索得出的各個試驗操作方法，可以得到預期的實驗效果，拍到良好的核型分析圖片，對接下來的實驗有很好的指導作用。 二、 存在的問題和困難 1. 時間比較緊，周末從呈貢到本部實驗室來回花費在車上的時間長，且公交比較難擠； 2. 染液效果不佳，改良試劑花 費周期較長，主要原因是試劑比較陳舊，有些已發(fā)生變質(zhì)，造成 實驗效果 無預期的好 。 三 、有何建議和要求 1. 如果可能的話盡早將實驗室搬至呈貢校區(qū)； 2. 重新購置一批新的藥品 （比如國外產(chǎn)的地衣紅） 。 四 、學院意見 主管領(lǐng)導簽名（蓋章）： 年 月 日 最 新精 品 資料推薦 提 供全程指導服務 2022 全新精品資料 全新公文范文 全程指導寫作 –獨家原創(chuàng) 14 / 63 上文已完。下文為附加公文范文，如不需要，下載后可以編輯刪除，謝謝！ 衛(wèi)計委家庭發(fā)展科科長競聘演講稿 尊敬的各位領(lǐng)導，各位同仁： 非常感謝委黨委給我這次機會，站到這里來競聘家庭發(fā)展科科長的職位，我想這是對我過去工作的的肯定，也是對我未來工作的期望，我會好好珍惜這次機會。 今年是我從事人口計生工作的第七個年頭，想想當年，初來乍到，面對各種業(yè)務術(shù)語真是一頭霧水，聽到專業(yè)名詞看到一些藥具還會臉紅，就這樣我成為了一名計生 戰(zhàn)線的新兵，一干就是七年。這一路走來，在領(lǐng)導、同志們的關(guān)心幫助之下，通過自己的不斷學習努力，我不但逐漸的熟悉了業(yè)務，也對這份工作產(chǎn)生了感情，同時也收獲了領(lǐng)導和同志們的好評。 從事計劃生育工作以來，我一直負責宣傳教育工作，主要包括新聞宣傳、幸福家庭建設(shè)、出生人口性別比綜合治理等工作。我真的很喜歡這些工作，雖然我不是學的這個專業(yè)，但興趣是最好的老師，我去鉆研、去請教、多學多看多寫，自加壓力，自我督促，從宣教工作的門外漢成為業(yè)務能手。 而過去宣教工作中的兩項內(nèi)容 — 幸福家庭建設(shè)、性別比治理現(xiàn)劃歸家庭發(fā)展科， 再加上利益導向組成了現(xiàn)在的家庭發(fā)展科全部工作內(nèi)容。其中兩項工作都是我所從事數(shù)年、經(jīng)驗豐富且受到好評的，因此，最 新精 品 資料推薦 提 供全程指導服務 2022 全新精品資料 全新公文范文 全程指導寫作 –獨家原創(chuàng) 15 / 63 我認為，我擔任家庭發(fā)展科科長職務是有優(yōu)勢的。一是我有較強的寫作能力，我先后在中國人口報、徐州日報等媒體上發(fā)表千字以上文章5 篇，這有助于我區(qū)家庭發(fā)展工作經(jīng)驗、做法的總結(jié)、提煉、推廣；二是我對組織大型活動有豐富經(jīng)驗，我連續(xù)三年參與了區(qū) “ 家庭人口文化節(jié) ” 的策劃與實施工作。三是我對兩非案件的查處經(jīng)驗豐富，從聯(lián)合執(zhí)法現(xiàn)場查處到案件文書制作、卷宗整理歸檔，到國家兩非系統(tǒng)的案卷錄入、系統(tǒng)維護，整個流程我都非常熟悉， 自從兩非納入全市科學發(fā)展考核目標以來，我區(qū)的打擊兩非工作始終走在主城區(qū)最前列，并被列為加分項目。以上這些都是我在本職工作中任勞任怨、勤學肯干的一些積累和經(jīng)驗，也是支撐我能站在這里的競崗的信心與底氣。 如果委黨委信任我，把家庭發(fā)展科長這個職位交給我的話，我只想說，謝謝領(lǐng)導，我會好好干！如果我競聘成功，我會珍惜這來之不易的崗位，顧全大局，服從命令聽從指揮。如果我競聘成功，我會擺正自己位置，謙虛謹慎，團結(jié)科室人員努力拼搏，盡職盡責，出色完成各項任務；如果我競聘成功，我將堅決摒棄本位主義，同心同德，分工不分家， 融合融入衛(wèi)計大家庭。 各位領(lǐng)導、同志們，古人說： “ 不可以一時之得意，而自夸其能；亦不可以一時之失意，而自墜其志。 ” 競爭上崗，有上有下，無論上、下，我都將以這句話自勉，勝不驕、敗不餒，一如既往地勤奮學習、努力工作、追求夢想！ 最 新精 品 資料推薦 提 供全程指導服務 2022 全新精品資料 全新公文范文 全程指導寫作 –獨家原創(chuàng) 16 / 63 衛(wèi)計委衛(wèi)生計生委基層指導科科長競職演講稿 尊敬的各位領(lǐng)導、各位同事： 大家好！ 首先感謝委黨委給了我這個