【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 煮沸的無(wú)離子水中，攪動(dòng)，使其充分溶解，冷卻至 58℃，過(guò)濾于棕色試劑瓶，冷卻至 26℃，加入 10ml1mol/L HCl和 偏重亞硫酸鈉（ Na2S2O5），振搖使其溶解混均，密封瓶口，置黑暗低溫（ 10℃）處， 4— 12 小時(shí)檢查，待溶液透明無(wú)色或呈淡茶色即可使用。如果發(fā)現(xiàn)仍有不同程度的紅色未褪盡，可加入 性炭不斷振搖后，在黑暗低溫（ 4℃）處?kù)o置過(guò)夜，過(guò)濾后可以使用。 通常經(jīng)活性炭處理后的試劑著色力會(huì)減弱，所以最好不要用活性炭處理，關(guān)鍵的問(wèn)題在于偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量，好的偏重亞硫酸鈉打開(kāi)瓶蓋即有明顯的 SO2氣味 （ 李懋學(xué)，張敦芳， 1991） 。 漂洗液： 5ml 1mol/L HCl+5ml 10% Na2S2O5 +100ml H2O。 材料處理和染色程序 ： 1）固定材料經(jīng) 50%酒精轉(zhuǎn)入蒸餾水； 2）將材料浸入事先預(yù)熱至 60177。 1℃的 1mol/L HCl保溫 5— 15分鐘； 3）冷 1mol/L HCl洗一次； 4）浸入 Schiff試劑染色（ 10℃黑暗條件） 1— 2小時(shí)； 5）漂洗液漂 洗三次，每次 5分鐘； 6）蒸餾水洗 5— 10分鐘； 7） 45%乙酸壓片。 壓片操作及制作永久封片 1） 壓片準(zhǔn)備和操作 植物染色體壓片法是目前國(guó)內(nèi)外最普遍采用的方法。這是一種手工技術(shù)，因此，具體的操作方法和使用的工具并無(wú)一定之規(guī)。但目的只有一個(gè)，那就是使分生組織中期分裂相細(xì)胞染色體分散開(kāi)來(lái)，使我們?cè)陲@微鏡下可清晰地辨別每一染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu) （ 李懋學(xué)，張敦芳， 11 1991） 。但影響染色體分散效果的因素很多。內(nèi)因包括具體植物細(xì)胞壁的成分性質(zhì)、細(xì)胞質(zhì)的粘滯度和染色體的大??；外因包括前處理和解離的適 當(dāng)與否和操作者技術(shù)的掌握。 工具包括不銹鋼尖鑷子、一支鉛筆、載玻片和蓋玻片若干。此外，還需酒精燈、雙面刮胡刀片和濾紙等。 國(guó)產(chǎn)載玻片和蓋玻片都不是很干凈，如果想得到好的結(jié)果，建議認(rèn)真清洗之。方法是煮沸一鍋（鍋要干凈）蒸餾水，加入適量無(wú)酶洗衣粉，而后將載玻片一片一片放入水中浸泡半個(gè)工作日，再一片一片取出，同時(shí)用干凈紗布兩側(cè)擦洗，放自來(lái)水下流水沖洗掉洗衣粉泡沫，轉(zhuǎn)入蒸餾水浸泡，最后放入標(biāo)本缸，加入 70%酒精儲(chǔ)存?zhèn)溆?。用之前取出，用新紗布擦干放入干凈盒子中即可使用。染色體壓片用蓋玻片為 20179。 20mm2至 24179。 24mm2。很薄不能像 載玻片一樣清洗，一般是直接放入 70%酒精中浸泡適當(dāng)時(shí)間，用前紗布擦干即可。操作之前應(yīng)注意環(huán)境的潔凈。 在壓片時(shí)注意不能劃片，并進(jìn)行敲片（是染色體盡量分散），操作過(guò) 程因人而異，熟能生巧。掌握兩個(gè)過(guò)程，首先是細(xì)胞分散（但不破裂）， 其次是染色體分散。 2）制作永久封片 a) 冰凍揭蓋片：現(xiàn)在一般使用液氮，用雙面刀片撬起蓋片，保留載片； b) 干燥：載片放入溫箱（不超過(guò) 60℃）烘干 24小時(shí)； c) 樹(shù)膠封片：生物學(xué)制片專用膠，化學(xué)試劑公司有售，滴加樹(shù)膠，加蓋新的蓋玻片； d) 干燥封固：室溫或 3045℃溫箱 （ 尤瑞麟， 2022） 。 酶解去壁低滲法簡(jiǎn)介 如果感覺(jué)以上步驟之后鏡檢效果不是很理想可以考慮進(jìn)行低滲，起作用是幫助細(xì)胞的解離，使細(xì)胞中染色體更易分散 （ 李國(guó)珍， 1985；劉祖洞， 1987） 。 1）前低滲 經(jīng)預(yù)處理的材料，傾去預(yù)處理液，直接加入 ， 25℃左右處理30分鐘。 2）酶解去壁 吸除低滲液，加入 %的纖維素酶和果膠酶（ 1： 1）混合液， 37℃消化 10 分鐘。 3）后低滲 用同溫蒸餾水將材料輕輕清洗 2— 3次去酶，然后在雙蒸水中停留 10— 30 分鐘。 參考文獻(xiàn)： [1] 李懋學(xué)，張敦芳 .植物染色體研究技術(shù)， 1991 [2] 劉祖洞《遺傳學(xué)》上、下冊(cè)，高教出版社， 1990 [3] 周云龍主編 . 植物生物學(xué)（第 2版） . 北京：高等教育出版社 , 2022 [4] 楊 繼主編 . 植物生物學(xué)（第 2版） . 北京 : 高等教育出版社 , 2022 [5] 楊漢民 .細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社， 1997 [6] 李樹(shù)賢 .植物染色體與遺傳育種，科學(xué)教育出版 [7] 尤瑞麟 .植物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)教程 —— 組織培養(yǎng)、細(xì)胞化學(xué)和染色體技術(shù) .北京大學(xué)出版社，2022 [8] 李國(guó)珍 .染色體及其研究方法，科學(xué)出版社。， 1985 [9] 李博主編 . 生態(tài)學(xué) .高等教育出版社 ,2022 [10] 劉祖洞 .遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)，高教出版社， 1987 [11] 洪德元 .植物細(xì)胞分類學(xué)，科學(xué)出版社， 1990 [12] 劉永安 ,馮海生 ,陳志國(guó)等 .植物染色體核型分析常用方法概述 [J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué) ,2022, 34(1):98～ 102 12 （ 二 ）成果情況 通過(guò)以上比較深入的理論學(xué)習(xí)，以及在我們實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的實(shí)踐論證，經(jīng)過(guò)幾周的不斷改良，我們初步確定了能染上很好效果的染液配方，這樣的配方配出的染液不僅可對(duì) 菊 科 風(fēng)毛菊 屬 的材料有良好的效果，對(duì)其他材料比如豆科 冬麻豆、膀胱豆、黃花木、銀合歡， 桔梗科藍(lán)鐘花 、菊科 風(fēng)毛菊 的種子都有良好的效果， 染色體著色深，細(xì)胞質(zhì)著色淺，對(duì)比鮮明，有利于核型分析中染色體的計(jì)數(shù)與測(cè)量，對(duì)進(jìn)一步開(kāi)展實(shí)驗(yàn)有很好的保障。 具體配方如下： 1 卡寶品紅配制方法 1) 原液 A：稱 3g堿性品紅溶于 100ml70%酒精（此液可無(wú)限期儲(chǔ)存，不會(huì)變質(zhì)）。 2) 原液 B：取 10ml 原液 A 與 90ml 5%苯酚水溶液混合，置 37℃溫箱溶解 2— 4 小時(shí)（此液不穩(wěn)定，限 2周之內(nèi)使用）。 3) 原液 C：取原液 B 55ml與冰乙酸、甲醛各 6ml混合均勻 （此液也稱為苯酚品紅，也可進(jìn)行染色，不過(guò)效果不好，染染得過(guò)深） 。 4) 染色液：取原液 C 20ml，加入 80ml 45%冰 乙酸和 g山梨醇混合溶解 （此液也稱為改良苯酚品紅，兩周后染色效果很好） 。 該染色液配制后為淡品紅色，如果立即使用染色較淡，放置 2 周后染色能力明顯增強(qiáng)，而且放置的時(shí)間越久染色效果越好。此液可在常溫下存放 2 年保持穩(wěn)定不變質(zhì)。 染色時(shí)采用滴染方法，在 應(yīng)用該染色液 時(shí) ，染色的效果與鹽酸解離有密切關(guān)系。 2 地衣紅 先配制 500ml 45%的醋酸水溶液，在電驢上加熱煮沸 ，移去火源，緩緩 （切忌緩慢，否則噴濺危險(xiǎn)） 加入 ，攪動(dòng)溶解 ,待全部投入后再煮 12min，并加入一顆生銹的鐵釘， 1min后取出。 此染液染上的細(xì)胞呈淡紅色，染色體呈深紅色，對(duì)比很良好，便于觀察。注意 地衣紅易溶于酒精，制片不可用酒精脫水封片。 通過(guò)前期的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及展開(kāi)實(shí)驗(yàn)，比較相鄰屬的實(shí)驗(yàn)方法，進(jìn)行梯度試驗(yàn)，不斷總結(jié)，得到了以下處理菊科風(fēng)毛菊屬種子及 核型染色體研究的操作方案： 鑒于在實(shí)驗(yàn)室的現(xiàn)有條件和空間，不能對(duì)植株進(jìn)行直接栽種培養(yǎng)，所以取材不能采用植株的芽尖、莖尖等分生區(qū)旺盛的部位，而是對(duì)種子進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng) ，這也是為了避免在同一植株上做該物種的核型研究，所用的種子來(lái)自同種不同居群，保證了得出的結(jié)論的代表性和科學(xué)性。首先將 待測(cè)種子放入培養(yǎng)皿中兩 層濾紙上，加水 至種子處于濕潤(rùn)的環(huán)境，保障種子發(fā)芽時(shí)所需的水環(huán)境。然后將培養(yǎng)皿 置 于 2226℃ 的恒溫箱中萌發(fā) 培養(yǎng)， 風(fēng)毛菊屬種子的萌發(fā)周期一般為 57 天， 810 天后根的長(zhǎng)度就可達(dá)到實(shí)驗(yàn)取材時(shí)所需的長(zhǎng)度 ，然后將長(zhǎng)度適宜的幼根 取下 ，置于處理用的瓶子內(nèi)， 室溫下 用 8羥 基喹啉處理 45 小時(shí)， 此過(guò)程要嚴(yán)格避光，確保預(yù)處理的效果。預(yù)處理之后再將材料用蒸餾 水沖洗三次， 于 4℃冰箱中卡諾氏固定液（無(wú)水乙醇： 冰 醋酸 =3： 1，現(xiàn)配現(xiàn)用 ）固定 1224 小時(shí) ，因固定液易揮發(fā)，在處理時(shí)要換固定液 12 次 。固定好之后將材料用蒸餾水沖洗三次， 用 1mol/L 的 HCl 在 60℃下 水浴解離 1015min，解離時(shí)間的長(zhǎng)短非常重要，直接影響著染色的效果和敲片后染色 體在細(xì)胞中的形態(tài)，所以嚴(yán)格控制好時(shí)間，時(shí)間一到馬上進(jìn)行下一步的處理。解離好之后需用蒸餾水沖洗 6 次，目的是為了把殘留在根尖上的鹽酸清洗干凈，染色時(shí)才不會(huì)受鹽酸的影響，沖洗好之后用卡寶品紅染色 812 小時(shí)，就可進(jìn)行壓片鏡檢了，在 光學(xué)顯微鏡下觀察， 低倍鏡下找到細(xì)胞，再換至高倍鏡下觀察，找到中期細(xì)胞， 在 100 倍油鏡下挑選分裂相清晰、染色體收縮長(zhǎng)短適中、著絲粒明顯的細(xì)胞進(jìn)行拍照，保存細(xì)胞圖片，其中間期、前期、中期、后 13 期、末期的細(xì)胞圖都要有，以便進(jìn)行接下來(lái)的核型分析。并對(duì) 染色體分散良好、形態(tài)清晰 、中期細(xì)胞多 的片子 用樹(shù)脂膠片封片制成永久封片在冰箱里保存。 同時(shí) ，在 整個(gè) 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中各個(gè)步驟所處理的時(shí)間是嚴(yán)格保證的，所以處理好一步之后就要做好下一步的準(zhǔn)備，通常是設(shè)一個(gè)鬧鐘以提醒自己下一步的處理時(shí)間到了。 綜上所述，經(jīng)過(guò)改良的卡寶品紅可以使風(fēng)毛菊屬 的材料染上很好的效果，以及經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)探索得出的各個(gè)試驗(yàn)操作方法，可以得到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)效果，拍到良好的核型分析圖片，對(duì)接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)有很好的指導(dǎo)作用。 二、 存在的問(wèn)題和困難 1. 時(shí)間比較緊，周末從呈貢到本部實(shí)驗(yàn)室來(lái)回花費(fèi)在車上的時(shí)間長(zhǎng)，且公交比較難擠； 2. 染液效果不佳，改良試劑花 費(fèi)周期較長(zhǎng)，主要原因是試劑比較陳舊，有些已發(fā)生變質(zhì)，造成 實(shí)驗(yàn)效果 無(wú)預(yù)期的好 。 三 、有何建議和要求 1. 如果可能的話盡早將實(shí)驗(yàn)室搬至呈貢校區(qū)； 2. 重新購(gòu)置一批新的藥品 （比如國(guó)外產(chǎn)的地衣紅） 。 四 、學(xué)院意見(jiàn) 主管領(lǐng)導(dǎo)簽名（蓋章）： 年 月 日 最 新精 品 資料推薦 提 供全程指導(dǎo)服務(wù) 2022 全新精品資料 全新公文范文 全程指導(dǎo)寫(xiě)作 –獨(dú)家原創(chuàng) 14 / 63 上文已完。下文為附加公文范文，如不需要，下載后可以編輯刪除，謝謝！ 衛(wèi)計(jì)委家庭發(fā)展科科長(zhǎng)競(jìng)聘演講稿 尊敬的各位領(lǐng)導(dǎo)，各位同仁： 非常感謝委黨委給我這次機(jī)會(huì)，站到這里來(lái)競(jìng)聘家庭發(fā)展科科長(zhǎng)的職位，我想這是對(duì)我過(guò)去工作的的肯定，也是對(duì)我未來(lái)工作的期望，我會(huì)好好珍惜這次機(jī)會(huì)。 今年是我從事人口計(jì)生工作的第七個(gè)年頭，想想當(dāng)年，初來(lái)乍到，面對(duì)各種業(yè)務(wù)術(shù)語(yǔ)真是一頭霧水，聽(tīng)到專業(yè)名詞看到一些藥具還會(huì)臉紅，就這樣我成為了一名計(jì)生 戰(zhàn)線的新兵，一干就是七年。這一路走來(lái)，在領(lǐng)導(dǎo)、同志們的關(guān)心幫助之下，通過(guò)自己的不斷學(xué)習(xí)努力，我不但逐漸的熟悉了業(yè)務(wù)，也對(duì)這份工作產(chǎn)生了感情，同時(shí)也收獲了領(lǐng)導(dǎo)和同志們的好評(píng)。 從事計(jì)劃生育工作以來(lái)，我一直負(fù)責(zé)宣傳教育工作，主要包括新聞宣傳、幸福家庭建設(shè)、出生人口性別比綜合治理等工作。我真的很喜歡這些工作，雖然我不是學(xué)的這個(gè)專業(yè)，但興趣是最好的老師，我去鉆研、去請(qǐng)教、多學(xué)多看多寫(xiě)，自加壓力，自我督促，從宣教工作的門(mén)外漢成為業(yè)務(wù)能手。 而過(guò)去宣教工作中的兩項(xiàng)內(nèi)容 — 幸福家庭建設(shè)、性別比治理現(xiàn)劃歸家庭發(fā)展科， 再加上利益導(dǎo)向組成了現(xiàn)在的家庭發(fā)展科全部工作內(nèi)容。其中兩項(xiàng)工作都是我所從事數(shù)年、經(jīng)驗(yàn)豐富且受到好評(píng)的，因此，最 新精 品 資料推薦 提 供全程指導(dǎo)服務(wù) 2022 全新精品資料 全新公文范文 全程指導(dǎo)寫(xiě)作 –獨(dú)家原創(chuàng) 15 / 63 我認(rèn)為，我擔(dān)任家庭發(fā)展科科長(zhǎng)職務(wù)是有優(yōu)勢(shì)的。一是我有較強(qiáng)的寫(xiě)作能力，我先后在中國(guó)人口報(bào)、徐州日?qǐng)?bào)等媒體上發(fā)表千字以上文章5 篇，這有助于我區(qū)家庭發(fā)展工作經(jīng)驗(yàn)、做法的總結(jié)、提煉、推廣；二是我對(duì)組織大型活動(dòng)有豐富經(jīng)驗(yàn)，我連續(xù)三年參與了區(qū) “ 家庭人口文化節(jié) ” 的策劃與實(shí)施工作。三是我對(duì)兩非案件的查處經(jīng)驗(yàn)豐富，從聯(lián)合執(zhí)法現(xiàn)場(chǎng)查處到案件文書(shū)制作、卷宗整理歸檔，到國(guó)家兩非系統(tǒng)的案卷錄入、系統(tǒng)維護(hù)，整個(gè)流程我都非常熟悉， 自從兩非納入全市科學(xué)發(fā)展考核目標(biāo)以來(lái)，我區(qū)的打擊兩非工作始終走在主城區(qū)最前列，并被列為加分項(xiàng)目。以上這些都是我在本職工作中任勞任怨、勤學(xué)肯干的一些積累和經(jīng)驗(yàn)，也是支撐我能站在這里的競(jìng)崗的信心與底氣。 如果委黨委信任我，把家庭發(fā)展科長(zhǎng)這個(gè)職位交給我的話，我只想說(shuō)，謝謝領(lǐng)導(dǎo)，我會(huì)好好干！如果我競(jìng)聘成功，我會(huì)珍惜這來(lái)之不易的崗位，顧全大局，服從命令聽(tīng)從指揮。如果我競(jìng)聘成功，我會(huì)擺正自己位置，謙虛謹(jǐn)慎，團(tuán)結(jié)科室人員努力拼搏，盡職盡責(zé)，出色完成各項(xiàng)任務(wù)；如果我競(jìng)聘成功，我將堅(jiān)決摒棄本位主義，同心同德，分工不分家， 融合融入衛(wèi)計(jì)大家庭。 各位領(lǐng)導(dǎo)、同志們，古人說(shuō)： “ 不可以一時(shí)之得意，而自夸其能；亦不可以一時(shí)之失意，而自墜其志。 ” 競(jìng)爭(zhēng)上崗，有上有下，無(wú)論上、下，我都將以這句話自勉，勝不驕、敗不餒，一如既往地勤奮學(xué)習(xí)、努力工作、追求夢(mèng)想！ 最 新精 品 資料推薦 提 供全程指導(dǎo)服務(wù) 2022 全新精品資料 全新公文范文 全程指導(dǎo)寫(xiě)作 –獨(dú)家原創(chuàng) 16 / 63 衛(wèi)計(jì)委衛(wèi)生計(jì)生委基層指導(dǎo)科科長(zhǎng)競(jìng)職演講稿 尊敬的各位領(lǐng)導(dǎo)、各位同事： 大家好！ 首先感謝委黨委給了我這個(gè)