中藥青蒿的代謝工程(編輯修改稿)
2025-02-04 01:09 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 nd Hind Ⅲ. Nos/p NPTⅡ Nos/t CaMV35S/p gfp coding seq. Nos/t RB LB Hind Ⅲ Sma Ⅰ Sac Ⅰ 14 異源法呢基焦磷酸合酶 (FPS)對(duì)青蒿發(fā)根中 青蒿素生物合成的調(diào)控 AcetylCoA HMGCoA MVA IPP FPP Artemisinin FPS 轉(zhuǎn)基因發(fā)根的 Southern檢測(cè) 轉(zhuǎn)基因發(fā)根的 Northern檢測(cè) pBIFDS植物表達(dá)載體的構(gòu)建 轉(zhuǎn)基因發(fā)根青蒿素含量檢測(cè) 轉(zhuǎn)基因青蒿發(fā)根 15 異源法呢基焦磷酸合酶 (FPS)對(duì)青蒿素生物合成的調(diào)控 轉(zhuǎn)基因青蒿植株 轉(zhuǎn)基因植株的 Southern檢測(cè) 轉(zhuǎn)基因植株青蒿素含量檢測(cè) AcetylCoA HMGCoA MVA IPP FPP Artemisinin FPS pBIFDS植物表達(dá)載體的構(gòu)建 轉(zhuǎn)基因植株的 Northern檢測(cè) 16 內(nèi)源法呢基焦磷酸合酶 (FPS)基因 對(duì)青蒿素生物合成的調(diào)控 A. 分子量標(biāo)準(zhǔn) B. 細(xì)胞全蛋白 C. 硫酸銨分級(jí)沉淀 D. Qepharose純化 29KDa 97KDa 68KDa 43KDa 18KDa A B C D 不同方法純化的蛋白 AaFPS1的 MichaelisMenton 17 轉(zhuǎn) FPS基因青蒿 轉(zhuǎn) FPS基因青蒿的 Southern雜交 轉(zhuǎn) FPS基因青蒿的 Northern雜交 0102030405060708090100CK F4 F6 F18FPS enzyme activity (nmol/h/mg protein)轉(zhuǎn)基因青蒿的 FPS酶活性分析 01CK F4 F6 F18artemisinin content (%, DW)轉(zhuǎn)基因青蒿的青蒿素含量 內(nèi)源法呢基焦磷酸合酶 (FPS)基因 對(duì)青蒿素生物合成的調(diào)控 18 lacl ori kan ADS pETADS (7032bp) T7 terminator T7 promoter Xho I Bam HI ATG ADS原核表達(dá)載體的構(gòu)建 ADS的 SDS/PAGE分析 Mr 1 2 3 4 43 55 66 220 96 36 ADS體外催化產(chǎn)物 GCMS檢測(cè) 12 13
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