灰黃霉素超聲波提取工藝研究(編輯修改稿)
2025-02-02 15:00 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 稱取灰 黃霉素對(duì)照品 25mg， 25ml丙酮溶液定容，配制標(biāo)準(zhǔn)溶液 (初始濃度 )。精密量取標(biāo)準(zhǔn)溶液 2ml于 25ml容量瓶，用 95%乙醇定容。取丙酮 2ml置于 25ml容量瓶中， 95%乙醇定容，作為空白溶液。紫外光譜 200～ 400nm全波長(zhǎng)掃描，在 326nm處有最大吸收峰。 精密量取 、 、 、 、 25ml容量瓶中，用 95%乙醇定容。取丙酮 、 、 、 、 和 25ml容量瓶中，用 95%乙醇溶液定容，作為空白對(duì)照 。在 326nm處測(cè)其吸光度 A值，測(cè)定結(jié)果計(jì)算得回歸方程： A=+ r= 灰黃霉素含量測(cè)定 稱取灰黃霉素菌體 (含水 5%) 250ml燒瓶中，加入丙酮50ml，磁力攪拌回流提取三次，每次 1h。測(cè)得菌體中灰黃霉素含量為 %。 灰黃霉素超聲波提取影響因素考查 (1)超聲提取溶劑 文獻(xiàn)報(bào)道［ 3， 9］灰黃霉素易溶于二甲基甲酰胺、二氯乙烷 (以上溶解度約為 10%～ 12%w/v)，可溶于丙酮、氯仿、乙醇 (在丙酮中溶解度為 %，氯仿為 %，乙醇為 %)，不溶于水和石油醚?？紤]到二甲基甲酰胺價(jià)格較高，二氯乙烷毒性較大，本實(shí)驗(yàn)主要選取丙酮、氯仿及 95%乙醇為超聲提取溶劑。 稱取灰黃霉素菌體 5g，共 3份，分別用丙酮、氯仿、 95%乙醇 50ml溶解，超聲條件設(shè)定為：功率 400W，單次輻射時(shí)間 3s，提取時(shí)間40min，室溫下進(jìn)行提取，分別測(cè)定灰黃霉素溶液的吸光度，提取率分別為 %、 %和 %。由于丙酮對(duì)灰黃霉素的提取率較高，因此本實(shí)驗(yàn)選取丙酮作為超聲提取溶劑。 (2)溶劑用量 稱取灰黃霉素菌體 5g，共 6份，分別用 1 1 20倍量丙酮溶解，超聲波條件不變。分別測(cè)定灰黃霉素溶液的吸光度，計(jì)算提取率。溶劑 4倍量時(shí)，提取液中結(jié)晶析出太多，故舍去該實(shí)驗(yàn)點(diǎn)。如 ，在溶劑倍量為 16時(shí)有最大提取率。考慮到用較少的溶劑得到較高的提取率，本實(shí)驗(yàn)確定溶劑倍量為 10。 (3)超聲波提取功率 稱取灰黃霉素菌體 5g，共 3份，分別用丙酮50ml溶解，超聲波條件設(shè)定為：功率分別為 200、 300和 400W，單次輻射時(shí)間 3s，提取時(shí)間 40min，室溫下進(jìn)行提取。分別測(cè)定灰黃霉素溶液的吸光度，計(jì)算提取率。如 ，在超聲功率為 300W時(shí)有最大提取率。 (4)超聲波提取時(shí)間 稱取灰黃霉素菌體 5g，用丙酮 50ml溶解，超聲波條件設(shè)定為：功率 400W，單次輻射時(shí)間 3s，間歇
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