【文章內(nèi)容簡介】 （ 4）親子鑒定、法醫(yī)學(xué)鑒定 Rh血型系統(tǒng) 一 .Rh血型抗原 : Rh基因位于人的第 1對染色體上 ,抗原有 40多種 ,與臨床密切的有 5種 ,即 D,E,C,c,e,抗原性 D＞ E＞ C＞ c＞ e. Rh陽性 :RBC含有 D抗原 . Rh陰性 :RBC不含 D抗原 . 二 .Rh血型亞型 1． Du（弱 D） :是 D抗原的變異體，為一組弱 D抗原 ,屬 Rh陽性 . 作為獻血者 ,應(yīng)輸給 Rh陽性者 作為受血者 ,應(yīng)輸入 Rh陰性血 . 形成 D的常見原因有三： ①直接遺傳； ②缺乏一個或幾個正常 D的亞單位 。 D抗原至少有 4個單位，即 Dabcd，而 Du可能缺乏其中一個或幾個； ③ C發(fā)生位置效應(yīng) 。 即 C與 D呈倒位時，可經(jīng)抑制 D的完全表現(xiàn)，如呈正常位時則沒有這抑制現(xiàn)象。 2． D(缺失型 ) 本型十分少見， D/D遺傳基因型紅細胞只有 D抗原，缺乏 C、 E、 c\e抗原。其紅細胞上 D抗原位點比一般紅細胞多，抗原活性強，能與抗 D抗體在鹽水中凝集。 3. Rhnull 此型紅細胞上測不出 Rh抗原，也沒有LW抗原，但能產(chǎn)生廣譜抗 Rh抗體，其紅細胞血清能與除 Rhnull以外所有紅細胞發(fā)生反應(yīng)。 三 .Rh系統(tǒng)抗體 各種 Rh抗原的抗體多通過輸血或妊娠等刺激后產(chǎn)生，所以為 IgG不完全抗體 .符合前述 IgG特點 . 四 .Rh血型鑒定及方法學(xué)評價 1． 酶介質(zhì)法：木瓜酶或菠蘿酶可以破壞紅細胞表面的唾液酸，使紅細胞膜失去電荷，縮小紅細胞間的距離；同時酶還可以部分地改變紅細胞結(jié)構(gòu)，使某些隱蔽的抗原得以暴露，這樣 ,不完全抗體就能使經(jīng)酶處理的 RBC在鹽水介質(zhì)中發(fā)生凝集 . 該方法靈敏性高，但操作煩瑣 ,應(yīng)用范圍窄 ,且酶試劑易失活 . 2．抗人球蛋白法：又稱 Coombs試驗。是最早用于檢查不完全抗體的方法，可用作 Rh 血型鑒定。 (1)直接 Coombs試驗 :是檢查體內(nèi)致敏 RBC的一種方法 ,用于檢查 RBC是否已被不完全抗體致敏 . 抗球蛋白血清＋ RBC懸液 看凝集否 凝集 :RBC已被不完全抗體致敏 . 不凝集 :RBC未被不完全抗體致敏 . (2).間接 Coombs試驗 : 是一種檢測血清中不完全血型抗體的方法 ,常用于血型鑒定、抗體的檢出和鑒定、輸血前交叉配血試驗以及其它特殊研究 .如 : 鑒定血型 : 標(biāo)準(zhǔn)抗 D血清＋ RBC懸液 看凝集否 凝集 :有 D,Rh(＋ )。 不凝集 : Rh(－ ). 檢查抗 D: Rh (＋ )RBC＋待測血清＋抗人 IgG 凝集否 凝集 : 抗 D(＋ )。 不凝集 :抗 D (－ ). Coombs試驗是檢查不完全抗體最可靠的方法 ,可檢測出因免疫性血型抗體引起的血型不合 ,該法還可克服因血漿蛋白紊亂或 Fg增加對正常配血的干擾 .但試劑供應(yīng)少 ,價格較貴 ,操作煩瑣 ,多用于特殊需要時 . 聚凝胺是帶有高價陽離子的多聚季氨鹽 ,溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細胞表面的負電荷，減少細胞間之排斥力，縮小了其間之距離，有利于紅細胞產(chǎn)生凝集。 該法提高了凝集反應(yīng)的速度 ,使原來在鹽水介質(zhì)中不能凝集 RBC的抗體發(fā)生凝集 ,提高反應(yīng)靈敏度 .用此法可以檢查出能引起溶血性輸血反應(yīng)的幾乎所有規(guī)則與不規(guī)則抗體，適合于各類輸血病人的配血 ,目前此法已被廣泛應(yīng)用 ,在一定程度上取代了傳統(tǒng)的抗球蛋白測定法。 ：其原理是當(dāng)降低介質(zhì)的離子強度時，可減少紅細胞外圍的離子云，促進 IgG分子在兩個紅細胞之間搭橋，使之結(jié)合。 實驗證明當(dāng)離子強度由 ，可提高抗 D抗體與 D陽性紅細胞結(jié)合率， 所以在低離子的強度鹽水中，能縮短抗原與抗體的反應(yīng)時間，并提高其靈敏度 。 ? 五 .質(zhì)量控制 12345 ? 六。臨床意義 123 ? P102 ?人類白細胞抗原 ? HLA系統(tǒng)是人類最主要的組織的相容性復(fù)合物，這些抗原不僅是白細胞特有，而且存于其它許多組織上，在調(diào)節(jié)機體免疫反應(yīng)，破壞外來靶細胞方面有重要作用。 ? HLA又稱移植抗原，通過 HLA配型能提高移植物的存活率，它作為一種遺傳標(biāo)記已用于有關(guān)疾病及人類遺傳學(xué)的研究。在臨床輸血學(xué)中，對 HLA的研究有助于提高成分輸血的療效及防止輸血反應(yīng)。 ? 總之 HLA的研究已廣泛就用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、法醫(yī)學(xué)、社會醫(yī)學(xué)等諸方面。 HLA抗原的主要分布在細胞膜上，不同細胞上抗原分子多少也不同。 HLAI類抗原分布廣泛，幾乎存在于所有有核細胞，但以淋巴細胞上密度最高。 HLAⅡ 類抗原較 Ⅰ 類范圍窄，密度最高是單核細胞，樹突狀細胞及 B淋巴細胞。 ?HLA抗體 ? HLA抗體由復(fù)雜的球蛋白構(gòu)成，含有許多抗原位點。單一的 HLA基因產(chǎn)物可有幾個抗原決定簇，可以刺激產(chǎn)生不同的同種抗體。臨床上 HLA抗體多由輸血、妊娠或器官移植等免疫機制產(chǎn)生，妊娠產(chǎn)生 HLA抗體的比例不少于 5%。 ? 根據(jù)同種表位可以把同種抗體分為二組： HLA基因產(chǎn)物反應(yīng)的抗體，這種抗體只與獨有的表位結(jié)合，這些表位是單一的 HLA等位基因產(chǎn)物。 ? HLA基因產(chǎn)物結(jié)合，這種抗體可以和結(jié)構(gòu)相似的獨有表位、或者幾種 HLA基因產(chǎn)物的共有表位相結(jié)合，產(chǎn)生血清學(xué)交叉反應(yīng)，共有表位很常見，特別是 HLAI類抗原。 HLA分型方法 1．淋巴細胞毒試驗： HLA抗原分型多用之。其原理是用已知特異性抗血清與被測定者淋巴細胞作用，在補體的協(xié)同作用下，最終陽性反應(yīng)是發(fā)生細胞毒作用，表現(xiàn)為細胞溶解破裂，從而使加入之染料如伊紅等進入死細胞而著色，可在顯微鏡下觀察判斷。進行 I類抗原分型時可用 T淋巴細胞或外周血淋巴細胞，進行 Ⅱ 類抗原分型時需用 B淋巴細胞，由于 B細胞分離方法及補體毒性各不相同， Ⅱ 類抗原分型比 Ⅰ 類抗原分型更為困難。 ? 2．混合淋巴細胞培養(yǎng)試驗：本方法多用于組織相容性方面的研究，臨床上主要用于器官移植時。其原理是當(dāng)兩個 HLAD抗原完全相同的淋巴細胞在體外培養(yǎng)時無反應(yīng)，而 HLAD抗原不完全相同的淋巴細胞混合培養(yǎng)時，則可互相刺激，從而產(chǎn)生增殖反應(yīng)。根據(jù)此原理，用已知 D抗原型別的細胞為試劑細胞，與被檢查細胞混合培養(yǎng)，就可對被檢查細胞作 HLAD定型，培養(yǎng)結(jié)果反應(yīng)性越低，移植存活率越高。