【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 態(tài)栽培技術(shù)：不使用化學(xué)合成的肥料、農(nóng)藥、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、添加劑、色素等，也不采用基因工程和離子輻射技術(shù)，而是遵循三葉青的自然生長(zhǎng)規(guī)律，培肥、除草、防治病蟲害、采收和初加工，形成三葉青藥材及其產(chǎn)物安全生產(chǎn)體系。 （二）應(yīng)用和產(chǎn)業(yè) 化前景 目前三葉青高效栽培技術(shù)已經(jīng)成為三葉青產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的最大障礙，通過本項(xiàng)目的研究，獲取三葉青優(yōu)質(zhì)種質(zhì)利用技術(shù)、三葉青快速繁殖技術(shù)、三葉青容器栽培技術(shù)及三葉青套種生態(tài)栽培技術(shù)，使三葉青產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)成為可能，從而滿足市場(chǎng)對(duì)三葉青的需求，同時(shí)可減少對(duì)其野生資源和環(huán)境的破壞，并且可獲得可觀的經(jīng)濟(jì)效益，因而具有廣泛的應(yīng)用前景。 （三）預(yù)期獲取自主知識(shí)產(chǎn)權(quán) 獲取自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的三葉青繁殖和栽培技術(shù)方面專利1 項(xiàng)； 在核心期刊發(fā)表論文 3 篇以上。 五、項(xiàng)目現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)和條件 （一）現(xiàn)有工作基礎(chǔ) 項(xiàng)目組對(duì)三葉青開展了 大量前期研究工作，近四年來(lái)已對(duì)三葉青種質(zhì)篩選及高效栽培方面進(jìn)行前期研究，通過物候觀察，包括萌芽期、生長(zhǎng)期、開花期、結(jié)果期以及塊根發(fā)育期等；植物學(xué)特性觀察，包括芽、葉、花、塊根習(xí)性等；抗性、耐貯性等。 此外，還開展了田間栽培試驗(yàn)，如培養(yǎng)土配制試驗(yàn)，間套種試驗(yàn)及育苗技術(shù)等。通過觀察和試驗(yàn)，初步明確了三葉青能在山地不同海拔高度馴化栽培，而且隨著海拔的提高，夏季涼爽而春季回暖遲，有利于三葉青種塊根發(fā)育，田間生 育期明顯延長(zhǎng)，為爭(zhēng)取培育大塊根創(chuàng)造了有利條件；也明確了三葉青培育需要較大的蔭蔽度，需在蔭棚內(nèi)栽培或與喬木木混 作，適合套種和間混種。 （二）研究支撐條件 研究隊(duì)伍 課題組成員共有 6 人，其中高級(jí)職稱有 3 人，中級(jí)職稱 3人（專職試驗(yàn)員 1 人），對(duì)三葉青的種質(zhì)采集與鑒定、影響三葉青生長(zhǎng)與塊根發(fā)育的試驗(yàn)、組織擴(kuò)繁及相關(guān)栽培實(shí)驗(yàn)都能自行完成。 項(xiàng)目組成員 表 姓 名 其他信息 任全進(jìn) 職務(wù)（職稱） 講師 出生年月 19690613 從事專業(yè) 園藝 工作單位 杭州鴻越生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公 司 在本項(xiàng)目中的分工 引種馴化與品種篩選、生產(chǎn)管理 夏更壽 職 務(wù)（職稱） 高級(jí)工程師 出生年月 19660516 從事專業(yè) 園藝 工作單位 杭州鴻越生態(tài)農(nóng)業(yè)生態(tài)有限公 司 在本項(xiàng)目中的分工 生態(tài)栽培研究、田間試驗(yàn) 何國(guó)強(qiáng) 職務(wù)（職稱） 總經(jīng)理 出生年月 19750618 從事專業(yè) 園藝 工作單位 杭州鴻越生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公 司 在本項(xiàng)目中的分工 示范基地建設(shè)、產(chǎn)品試驗(yàn)示范 朱巖 職務(wù)（職稱） 教授 出生年月 19620620 從事專業(yè) 化學(xué)分析 工作單位 浙江大學(xué) 在本項(xiàng)目中的分工 化學(xué)檢驗(yàn)與品質(zhì)評(píng)價(jià) 徐明仙 職務(wù)（職稱） 副教授 出生年月 19660316 從事專業(yè) 環(huán)境分析 工作單位 杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 在本項(xiàng)目中的分工 生物產(chǎn)品試驗(yàn)、水土環(huán)境分析 研究實(shí)驗(yàn)條件 本單位具有以下實(shí)驗(yàn)設(shè)備： 擁有面積達(dá) 5000m2栽培實(shí)驗(yàn)基地。 植物生理實(shí)驗(yàn)室和組培實(shí)驗(yàn)室各一個(gè)。 生物倒置顯微鏡 XD101 一臺(tái)。 人工氣候箱 SPX250LC 三臺(tái)。 垂直超凈工作臺(tái) SWCT2FD 四臺(tái)。 立方式高壓滅菌鍋 LDZX401 二臺(tái)。 電子精密天平 BS110S 二臺(tái)。 冰箱 205L 三臺(tái)。 生化 培養(yǎng)箱 SPX2501 二臺(tái)。 普通顯微鏡五十臺(tái)。 調(diào)溫調(diào)濕箱 DR302 二臺(tái)。 培養(yǎng)皿、錐形瓶等玻璃器皿若干。 本單位具有以下試驗(yàn)條件： 公司始 2020 年，前后總投資 300 余萬(wàn)元，進(jìn)行基地建設(shè)，其中按 GMP 要求建設(shè) 20 畝的三葉青生產(chǎn)專用基地，搭建鋼架大棚 60 個(gè)，連棟大棚 8000 平方米，基地水、電、路配套。 20 畝三葉青基地大棚全部安裝地噴、霧噴、肥、水管網(wǎng)，進(jìn)行人工智能控制。公司建有 500 平方米的組培工廠一座，按年生產(chǎn)能力 80 萬(wàn)瓶設(shè)計(jì)，目前年生產(chǎn)組培苗 20 萬(wàn)瓶左右。公司已形成一個(gè)以三葉青為重點(diǎn)，其他中藥材種植為輔的特色農(nóng)業(yè)生產(chǎn)基地和中草藥生產(chǎn)的科技型企業(yè)。 另外，合作單位的分析測(cè)試中心具有許多現(xiàn)代化的儀器設(shè)備，能在實(shí)驗(yàn)室和栽培基地完成所需的各項(xiàng)研究。 六、實(shí)施方案（包括技術(shù)路線、進(jìn)度安排） 通過嚴(yán)謹(jǐn)、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)手段和方法，獲得可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，篩選出三葉青無(wú)菌培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基和環(huán)境條件；運(yùn)用生態(tài)栽培技術(shù)手段進(jìn)行三葉青高效栽培，探討三葉青快速繁殖與生態(tài)栽培的環(huán)境條件和栽培基質(zhì)；建立三葉青安全生產(chǎn)及品質(zhì)保證的技術(shù)體系。 本項(xiàng)目以三葉青種質(zhì)篩選、快速繁殖、生態(tài)栽培及活性成分分析為主線，按以下技術(shù)路線進(jìn)行研究。 課題研究采用產(chǎn)學(xué)研結(jié)合，實(shí)施課題制管理，在課題責(zé)任人負(fù)責(zé)的基礎(chǔ)上，分“課題 子課題”兩級(jí)管理，由課題責(zé)任人負(fù)責(zé)簽訂課題分級(jí)合同，并報(bào)歸口部門備案。子課題由課題組成員分工研究。 課題分解： 三葉青種質(zhì)資源收集與優(yōu)質(zhì)種質(zhì)篩選； 三葉青擴(kuò)繁與容器栽培關(guān)鍵技術(shù)； 三葉青復(fù)種高效生態(tài)栽培關(guān)鍵技術(shù)及不同栽培條件下活性成分分析。 六、計(jì)劃進(jìn)度安排 本項(xiàng)目按照生產(chǎn)要求設(shè)計(jì)生產(chǎn)工藝，實(shí)行規(guī)范化操作，嚴(yán)格，按照科學(xué)選種、科學(xué)培育、科學(xué)用藥、科學(xué)管理等工藝技術(shù)方案，確保項(xiàng)目提供的三葉青品種好、質(zhì)量高、 效益三葉青種質(zhì)收集 種質(zhì)篩選并鑒定 三葉青快速育苗技術(shù)研究 三葉青高效復(fù)種技術(shù)研究 三葉青生態(tài)栽培模式 三葉青安全高效栽培體系與示范 總結(jié)及推廣應(yīng)用 三葉青活性成分分析與對(duì)比 好。 — 進(jìn)行優(yōu)良種質(zhì)選育。開展種源與無(wú)性系選擇，并篩選可大力推廣的高品質(zhì)優(yōu)良三葉青種苗。項(xiàng)目采用野生種子，篩選原原種，采集種子和外植體進(jìn)行人工仿野生條件下馴化栽培。 采集種子或外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)，篩選用 2— 3 個(gè)培養(yǎng)基進(jìn)行。觀察后選定最佳培養(yǎng)基進(jìn)行愈傷組織培養(yǎng)、擴(kuò)繁。 中藥材 GAP 種植準(zhǔn)備：選擇周圍無(wú)污染源土地，進(jìn)行大氣、水質(zhì)、土壤的檢測(cè)，達(dá)到環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)。（浙江省無(wú)公害蔬菜標(biāo)準(zhǔn)） 設(shè)計(jì)實(shí)施三葉青生態(tài)種植模式。 — 進(jìn)行脫離凈化 條件下的自然光煉苗。 開展三葉青種植方法和肥水管理的研究。 人工栽培三葉青與野生三葉青活性成分分析研究，確定優(yōu)質(zhì)三葉青生產(chǎn)和質(zhì)量控制指標(biāo)。 — 進(jìn)行大田栽培，培育管理。 開展三葉青培養(yǎng)土配比、適應(yīng)的有機(jī)肥料和病蟲害防治的研究。 利用優(yōu)質(zhì)三葉青質(zhì)控指標(biāo)，于花前、花期和花后等分 別測(cè)定質(zhì)量變化，使采收更合理。 三葉青生態(tài)栽培光溫濕度控制研究，確保三葉青最適生長(zhǎng)環(huán)境。 噴滴灌系統(tǒng)設(shè)施安裝，保證供水及時(shí)、安全、節(jié)能。 測(cè)土配方施肥。通過設(shè)計(jì)理想的配 方肥 (包括專用復(fù)合肥、系列專用復(fù)合肥 )，實(shí)現(xiàn)養(yǎng)分的平衡。 進(jìn)行重金屬、農(nóng)藥殘留量與微生物檢測(cè)。 三葉青優(yōu)質(zhì)品系栽培生理與光合生理研究，三葉青高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培技術(shù)體系研究。 項(xiàng)目驗(yàn)收，課題總結(jié)。 七、項(xiàng)目預(yù)算（包括經(jīng)費(fèi)來(lái)源及用途） 項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)預(yù)算如下：杭州市科技局經(jīng)費(fèi) 20 萬(wàn)元，經(jīng)費(fèi)主要用于購(gòu)買試驗(yàn)材料、試驗(yàn)外協(xié)、資料印刷、會(huì)議、調(diào)研、人員勞務(wù)、管理等。 附表： 市級(jí)科技計(jì)劃項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)概算表 項(xiàng)目名稱： 金額單位： 萬(wàn)元 序 號(hào) 概算科目名稱 合計(jì) 市財(cái)政撥款 經(jīng)費(fèi) 地方部門配套經(jīng)費(fèi) 自籌經(jīng)費(fèi) （ 1） （ 2） （ 3） （ 4） （ 5） 1 一、經(jīng)費(fèi)支出（合計(jì)） 20 20 2 設(shè)備費(fèi) 0 3 （ 1）購(gòu)置設(shè)備費(fèi) 4 （ 2）試制設(shè)備費(fèi) 5 （ 3）設(shè)備租賃費(fèi) 6 材料費(fèi) 7 測(cè)試化驗(yàn)加工費(fèi) 8 燃料動(dòng)力費(fèi) 9 差旅費(fèi) 10 會(huì)議費(fèi) 11 合作、協(xié)作研究與交流費(fèi) 12 出版 /文獻(xiàn) /信息傳播 /知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)費(fèi) 13 人員勞務(wù)費(fèi) 14 專家咨詢費(fèi) 15 1管理費(fèi) 16 1其他開支 1 二、經(jīng)費(fèi)來(lái)源（合計(jì)） 20 2 申請(qǐng)市財(cái)政經(jīng)費(fèi) 20 3 地方、部門配套撥款 4 自籌經(jīng)費(fèi) 5 （ 1）單位自有貨幣資金 6 （ 2）其他資金 八、申請(qǐng)單位概況 項(xiàng)目主持單位 是一家集科研、生產(chǎn)、銷售、技術(shù)服務(wù) 于一體的規(guī)模化專業(yè)型 農(nóng)業(yè)科技企業(yè)。 公司組建有一批技術(shù)力量雄厚，管理科學(xué)，人才精銳的活力團(tuán)隊(duì)，公司把握 現(xiàn)代農(nóng)業(yè) 產(chǎn)業(yè)發(fā)展方向，加快科技成果產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程， 努力使 產(chǎn)品技術(shù)處于同行前列。 近年 來(lái)公司一直致力于 藥賞兼用植物資源 及其系列產(chǎn)品的研制與開發(fā)工作，并應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)對(duì) 三葉青、白背三七等植物 進(jìn)行馴化和培植 ，逐步 形成產(chǎn)業(yè)化規(guī)模。 公司已建立了 藥賞兼用植物 標(biāo)準(zhǔn)化種植基地，全面開展從育種、人工繁育、仿野生有機(jī)栽培、肥料比對(duì)、現(xiàn)代炮制工藝等一系列研究，在種子收集、精心育種、克隆組培，到生態(tài)有機(jī)栽培、性狀鑒定、顯微鑒定，再到產(chǎn)品研發(fā)、質(zhì)量控制 、有效成分檢測(cè)等各個(gè)方面都取得了突破性的成果，實(shí)現(xiàn) 公司 產(chǎn)品培育種植的科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化、產(chǎn)業(yè)化 ，年銷售額在 300萬(wàn)以上。 項(xiàng)目合作單位之一 是 全國(guó)優(yōu)秀高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院， 是集產(chǎn)學(xué)研一體化，為地方經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展提供科技支撐和人才的場(chǎng)所。近幾年來(lái) ,該學(xué)院積極承擔(dān)地方多家企業(yè)、科研所等的技術(shù)服務(wù)、技術(shù)指導(dǎo)工作。擁有 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室 95 個(gè)，實(shí)訓(xùn)中心 7個(gè)，校內(nèi)生產(chǎn)性實(shí)訓(xùn)基地、校外實(shí)訓(xùn)基地 100 多個(gè)，教學(xué)儀器設(shè)備 2870 多萬(wàn)元 ；實(shí)驗(yàn)室擁有完成本項(xiàng)目研究所需的大型儀器，如 高效液相色譜 儀 、 氣 相色譜 儀 、原子吸收分光光度 計(jì)、熒光分光光度計(jì) 、冷凍高速離心機(jī)等 一批先進(jìn) 檢測(cè)設(shè)備 設(shè)施。 項(xiàng)目合作單位之二 是本省的一所省部共建綜合性大學(xué)，其與本課題相關(guān)的條件基礎(chǔ)包括：建有浙江省新藥創(chuàng)制科技服務(wù)平臺(tái)、浙江省制藥科技創(chuàng)新基地（即浙江省重中之重學(xué)科－總建設(shè)經(jīng)費(fèi) 4000萬(wàn)）、國(guó)家中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)（浙江）基地－現(xiàn)代中藥制劑研究中心、擁有浙江省制藥工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、制藥工程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、國(guó)家綠色化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地（藥物綠色合成方向）等良好的學(xué)科及科研平臺(tái)。擁有“制藥工程”、“生物化工”和“環(huán)境工程”等 3 個(gè)浙江省“重中之重”學(xué)科，擁有“生物化工” 、“藥物化學(xué)”等 3 個(gè)博士點(diǎn)。 目前已投入建設(shè)經(jīng)費(fèi) 2020 萬(wàn)元，現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)用房 1300 多平方。擁有系列先進(jìn)的儀器設(shè)備，如傅立葉變換紅外光譜儀、液 質(zhì)聯(lián)用儀、 400 兆核磁共振儀、高效液相色譜儀、氣相色譜儀、旋光光度儀、紫外分光光度計(jì)、數(shù)字式熔點(diǎn)儀等；擁有較完備的用于中藥分離制備和衍生化研究的各種儀器材料，并擁有了各型常規(guī)制備色譜、中壓制備色譜、各型葡聚糖凝膠色譜（ DEAE、 Sephdex）、反相制備色譜（ RP RP18），高效液相色譜、逆流色譜和組合快速制備色譜；制劑實(shí)驗(yàn)室擁有的儀器設(shè)備如智能溶出試驗(yàn)儀、片 劑硬度計(jì)、粉碎機(jī)、片劑脆碎檢查儀、濕法混合制粒機(jī)、微型顆粒機(jī)、單沖壓片機(jī)、無(wú)級(jí)變速包衣機(jī)等，藥理實(shí)驗(yàn)室擁有的儀器設(shè)備如熒光 酶標(biāo)儀、 Uv1601 分光光度計(jì)、高速離心機(jī)、超速離心機(jī)、 CO2培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)等。 九、項(xiàng)目負(fù)責(zé)人及主要參加人員的簡(jiǎn)歷 課題組成員為 老 中青年學(xué)者，年齡結(jié)構(gòu)合理。其中 高級(jí)職稱 3 人， 中級(jí) 3 人，有豐富的研究經(jīng)歷，對(duì) 野生 資源的調(diào)查與收集、引種栽培、 種源對(duì)比試驗(yàn)，有效成分分析 及推廣等 均能自行完成。 項(xiàng)目負(fù)責(zé)人 ，高級(jí)工程師。從事中藥化學(xué)研究與生物制 藥工作。主要從事 藥用植物中生物活性成分的提取分 離 等基礎(chǔ)研究工作。主持、參加?。ú浚?、市 (廳 )級(jí)等科研項(xiàng)目 3項(xiàng)，發(fā)表論文 20 余篇，其中在國(guó)外雜志上發(fā)表論文三篇，被 SCI收錄五篇、 EI收錄一篇、一級(jí)期刊二篇。 項(xiàng)目主要參加人員之一 已經(jīng)從事 20余年的色譜分離研究工作，已經(jīng)發(fā)表相關(guān)的論文一百五十多篇，其中五十余篇被 SCI 收錄（ 30 余篇論文影響因子大于 3），大部分是第一作者或通訊作者，研究成果曾獲得日本化學(xué)會(huì)離子色譜成就獎(jiǎng)，化工部科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)，浙江省科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)和浙江省青年科技獎(jiǎng)， 2020 年入選“浙江省新世紀(jì) 151 人才工程”第二層次，現(xiàn)為中國(guó)分析儀器學(xué)會(huì)常 務(wù)理事，離子色譜專業(yè)委員會(huì)副主任委員、浙江省微量元素與健康研究會(huì)副理事長(zhǎng)，《色譜》、《生命科學(xué)儀器》雜志編委，也是《 Journal of Chromatography A》、《 Talanta》、《 Journal