最新檢測員技術(shù)工作總結(jié)優(yōu)質(zhì)(十篇)(編輯修改稿)
2025-08-14 17:05 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 于在pcr試劑配制過程中,由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被pcr核酸模板污染.(三pcr擴(kuò)增產(chǎn)物污染:這是pcr反應(yīng)中最主要最常見的污染問題,因?yàn)閜cr產(chǎn)物拷貝量 大(一般為1013拷貝/ml,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于pcr檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的pcr產(chǎn)物 污染,就可造成假陽就可形成假陽性。一個好的實(shí)驗(yàn)室,要時刻注意污染的監(jiān)測,考慮有無污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。:在建立pcr反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室及一般的檢驗(yàn)單位都應(yīng)設(shè)有pcr陽性對照,它是pcr反應(yīng)是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標(biāo)志。陽性對照要選擇擴(kuò)增度中等、重復(fù)性好,經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標(biāo)本,如以重組質(zhì)粒為陽性對照,其含量宜低不宜高(100個拷貝以下,但陽性對照尤其是重組質(zhì)粒及高濃度陽性標(biāo)本,其對檢測或擴(kuò)增樣品污染的可能性很大。因而當(dāng)某一pcr試劑經(jīng)自己使用穩(wěn)定,檢驗(yàn)人員心中有數(shù)時,在以后的實(shí)驗(yàn)中可免設(shè)陽性對照。:每次pcr實(shí)驗(yàn)務(wù)必做陰性對照。它包括①標(biāo)本對照:被檢的標(biāo)本是血清就用鑒定后的正常血清作對照。被檢的標(biāo)本是組織細(xì)胞就用相應(yīng)的組織細(xì)胞作對照。②試劑對照:在pcr試劑中不加模板dna或rna,進(jìn)行pcr擴(kuò)增,以監(jiān)測試劑是否污染。 (一合理分隔實(shí)驗(yàn)室:將樣品的處理、配制pcr反應(yīng)液、pcr循環(huán)擴(kuò)增及pcr產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進(jìn)行,特別注意樣本處理及pcr產(chǎn)物的鑒定應(yīng)與其它步驟嚴(yán)格分開。最好能劃分①標(biāo)本處理區(qū)。②pcr反應(yīng)液制備區(qū)。③pcr循環(huán)擴(kuò)增區(qū)。④pcr產(chǎn)物鑒定區(qū)。其實(shí)驗(yàn)用品及吸樣槍應(yīng)專用,實(shí)驗(yàn)前應(yīng)將實(shí)驗(yàn)室用紫外線消毒以破壞殘留的dna或rna。核酸時要十分小心，吸樣要慢，吸樣時盡量一次性完成，忌多次抽吸，以免 交叉污染或產(chǎn)生氣溶膠污染。(三預(yù)混和分裝 pcr 試劑:所有的 pcr 試劑都應(yīng)小量分裝，如有可能，pcr 反應(yīng)液應(yīng)預(yù)先配制好，然后小量分裝，20℃保存。以減少重復(fù)加樣次數(shù)，避免污染機(jī)會。另外，pcr 試劑，pcr 反應(yīng)液應(yīng)與樣品及 pcr 產(chǎn)物分開保存，不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱。(四防止操作人員污染，使用一次性手套、吸頭、小離心管應(yīng)一次性使 用。(五設(shè)立適當(dāng)?shù)年栃詫φ蘸完幮詫φ?，陽性對照以能出現(xiàn)擴(kuò)增條帶的最 低量的標(biāo)準(zhǔn)病原體核酸為宜，并注意交叉污染的可能性，每次反應(yīng)都應(yīng)有一 管不加模板的試劑對照及相應(yīng)不含有被
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