【正文】 前言 生物防治是采用微生物菌株或抗菌素類物質(zhì)，通過噴灑或浸漬果實(shí)處理，以降低或防 治果實(shí)采后病害的保鮮方法。 ?? 。 ?? 。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。本實(shí)驗(yàn)通過利用酵母細(xì)胞壁組分之一幾丁質(zhì)誘導(dǎo)培養(yǎng)本實(shí)驗(yàn)室分離得到的拮抗菌株海洋酵母 Rhodosporidium paludigenum Fell amp。 作者簽名： 日期： 年 月 日 學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書 本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。 果實(shí)采后病害 物理 防治 果蔬采后病害防治物理方法主要有：熱處理；低溫冷藏 ； 微波處理；氣調(diào)；輻射處理；低壓處理。 ?? 。 ?? 酵母誘導(dǎo)培養(yǎng) 保存的酵母菌種首先在 NYDA 斜面培養(yǎng)基中進(jìn)行活化， ?? 。s multiple range tests. 類似的，在蘋果果實(shí)上， ?? 。 幾丁質(zhì)對(duì) R. paludigenum 生防機(jī)理的影響 幾丁質(zhì)對(duì) R. paludigenum 在果實(shí)傷口處生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)的影響 用 ?? 。 CK N Y D B N Y C B010203040506070Disease incidence (%)D if f erent groupsaaa 圖 33 幾丁質(zhì)培養(yǎng)后 R. paludigenum 對(duì)蘋果誘導(dǎo)抗性的增強(qiáng)效應(yīng)（發(fā)病率） 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制機(jī)理研究 16 Fig. 33 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on apples inoculated with R. paludigenum cultivation in NYDB or NYDB amended with chitin powder at % on induction of resistance to blue mold rots in apple fruit. Bars represent standard errors. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。其機(jī)理可能與激發(fā)蘋果果實(shí)傷口處組織的 POD 酶活性有關(guān)。nchez CP, Candela ME. 20xx. Effect of chitin on biological control activity of Bacillus spp. and Trichoderma harzianum against root rot disease in pepper (Capsicum annuum) plants. European Journal of Plant Pathology 109: 633–637. Akimitsu K, Isshiki A, Ohtani K, Yamamoto H, Eshel D, Prusky D. 20xx. Sugars and pH: A clue to the regulation of fungal cell walldegrading enzymes in plants. Physiological and Molecular Plant Pathology 65: 271–275. Andrews, J. H., Harris, R. F., Spear, R. N., Lau, G. W., Nordheim, E. V., 1994. Morphogenesis and adhesion of Aureobasidium pullulans. Canadian Journal of Microbiology 40: 617. Ando A, Nakamura T, Murata Y, Takagi H, Shima J. 20xx. 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Bjornberg, A., Schn252。在你們的課程或?qū)嶒?yàn)上我獲得了很多；感謝王凱老師、趙婷老師在保研時(shí)給予的指導(dǎo)和幫助。 （ 3） R. paludigenum 在 NYDB 中培養(yǎng)后的上清液沒有抑菌效力，反而有促進(jìn)效果。 ?? 。 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制機(jī)理研究 12 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后 真菌病害抑制機(jī)理研究 前言 利 ?? 。 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 8 結(jié)果 不同濃度幾丁質(zhì)對(duì) R. paludigenum 生防效力的影響 在不同濃度的 NYCB 中誘導(dǎo)培養(yǎng)后， R. paludigenum 對(duì)梨青霉病的生防效力顯著提高（圖 21 和圖 22）。 ?? 。 表 11 主要產(chǎn)胞外物質(zhì)菌株 誘導(dǎo)抗性 近 5 年來(lái)，拮抗 菌 誘導(dǎo)采后果實(shí)抗性 成為了生物防治的研究熱點(diǎn) 。 ?? 果蔬采后病害的控制方法 果蔬貯藏保鮮是果蔬生產(chǎn)減損、保值和增值的關(guān)鍵因素。 作者簽名： 日 期： 學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明 本人鄭重聲明：所呈交 的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。 Tallman（經(jīng) 英國(guó)國(guó)際微生物所菌種保存和鑒定中心 CABI Bioscience Identification Services 鑒定為 Rhodosporidium paludigenum Fell amp。本人授權(quán) 大學(xué)可以將 本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。低溫冷藏技術(shù)已經(jīng)在部分地區(qū)得到實(shí)際運(yùn)用，熱殺菌和輻照殺菌也是目前報(bào)道比較多的方法。 抗生素名稱 產(chǎn)生菌株 針對(duì) 病原菌 蒿屬香豆素、東莨菪亭 無(wú)名假絲酵母 (C. famata) 指狀青霉 毒性蛋白 (killer protein) 畢赤酵母屬 (Pichia sp.) 抗細(xì)菌物質(zhì) 羅倫隱球酵母 （ C. laurentii） 熒光假單胞菌、 Staphylococcus aureus 揮發(fā)性物質(zhì) 乳酸克魯維酵母 (Kluyveromyces lactis) 擴(kuò)展青霉 圖表在文中一定要有引用，且圖表緊隨文字描述之后 五號(hào)宋體加粗居中 三線表 哈爾濱工業(yè)大學(xué) 工學(xué) 學(xué)士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 4 表 12 采后拮抗 菌 對(duì)果實(shí)抗性的誘導(dǎo)及對(duì)抗性相關(guān)反應(yīng)的刺激 果實(shí) 拮抗菌 備注 蘋果 出芽短梗霉 C. saitoana 刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、葡聚糖酶和 POD 誘導(dǎo)抗性，并刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶 分泌 ?1,3葡聚糖酶 柚子 柑橘 C. oleophila 誘導(dǎo)抗性，并刺激果實(shí)乙烯、 PAL, 幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶、積累植保素等 刺激果實(shí)硫還原蛋白基因表達(dá) 刺激幾丁質(zhì)酶 cDNA 的表達(dá) 刺激 ?1,3內(nèi)葡聚糖酶基因表達(dá) 草莓 出 芽短梗霉 誘導(dǎo)抗性 櫻桃 番茄 膜 醭畢赤酵母 刺激果實(shí) POD，降低 CAT 和 SOD，提高總蛋白，增強(qiáng) 33和 47kDa 蛋白 刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶 桃 、梨、棗、蘋果 羅倫隱球酵母 誘導(dǎo)果實(shí)抗性；刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶、 POD和 PAL 活性 刺激果實(shí) ?1， 3葡聚糖酶基因表達(dá) 表 13 主要產(chǎn)抗生素菌株 抗生素名稱 產(chǎn)生菌株 作用對(duì)象 病原菌 伊枯草菌素 枯草芽孢桿菌 B3 核果類水果 M. fructicola 吡咯菌素 洋蔥假單胞菌 (P. cepacia) LT412W 梨果 、柑橘 核果類水果 擴(kuò)展青霉、灰葡萄 孢 丁香霉素 E 丁香假單胞桿菌 ESC10 和 ESC11（ BioSave） 檸檬 吡喃酮 木霉 草莓、蘋果 灰葡萄孢 拮抗菌生理調(diào)控及機(jī)理的研究 近年來(lái)，隨著拮抗菌和病原菌之間 的 細(xì)胞學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究的不斷深入發(fā)展，研究者發(fā)現(xiàn) 通過調(diào)節(jié)采后拮抗酵母的生理代謝機(jī)制可能是增強(qiáng)其拮抗能力的有效途徑之一（ Janisiewicz 和 Korsten, 20xx） 。 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 7 病原菌培養(yǎng)和孢子懸浮液的制備 病原菌 病原菌為擴(kuò)展青霉（ Penicillium expansum）， ?? 。 C ont rol A B C D E020406080100bcccbbDIsease incidence (%)T reat m enta C ont A B C D E048121620bbbbbLesion diameter (mm)T reat m enta 圖 23 不同濃度幾丁質(zhì)培養(yǎng)后 第 5 天 R. paludigenum 對(duì)蘋果青霉病的生防效果 注： A: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum。 幾丁質(zhì)處理后 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)誘導(dǎo)抗性的影響 參照 de Capdeville 等 （ 20xx）、 Droby 等 （ 20xx） 和 El Ghaouth 等 （ 20xx）的方法進(jìn)行蘋果果實(shí)傷口系統(tǒng)抗性的誘導(dǎo)試驗(yàn)。s multiple range test. CK N Y D B N Y C B024681012Lesion diameter (mm)D i f f erent groupsaaa 圖 34 幾丁質(zhì) 誘導(dǎo)后 R. paludigenum 對(duì)蘋果 抗性的增強(qiáng)效應(yīng)（病斑直徑） Fig. 34 Severity of blue mold decay caused by Penicillium expansum on apples inoculated with R. paludigenum cultivation in NYDB or NYDB amended with chitin powder at % on induction of resistance to blue mold rots in apple fruit. Bars represent standard errors. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。 本實(shí)驗(yàn)的后續(xù)研究及展望 本論文僅對(duì)幾丁質(zhì)誘導(dǎo)后， R. paludigenum 酵母的生防活性、最佳誘導(dǎo)條件 誘導(dǎo)機(jī)理，包括促進(jìn)酵母菌生長(zhǎng)、分泌抗菌物質(zhì)和誘導(dǎo)抗性等進(jìn)行了初步研究。rer, J., 1993. Inhibition of the growth of grain storage moulds in vitro by the yeast Pichia anomala (Hansen)