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構(gòu)象性蛋白質(zhì)芯片的制造原理(留存版)

2025-09-08 10:30上一頁面

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【正文】 度揭示生命活動(dòng)過程的精細(xì)機(jī)制,并成批地進(jìn)行功能克隆新基因或?qū)⒐聝夯蚺c確定的生物學(xué)功能聯(lián)系起來;另一方面為臨床診斷、預(yù)后評(píng)價(jià)提供全新的標(biāo)準(zhǔn)和模式,為新藥設(shè)計(jì)提示準(zhǔn)確的靶分子而且提供快速廉價(jià)的分析手段。DNA芯片和蛋白質(zhì)芯片芯片是這方面的最明顯的跡象。生物技術(shù)與計(jì)算機(jī)技術(shù)的融合使我們逐漸看到了這個(gè)希望。其實(shí)驗(yàn)結(jié)果是表達(dá)基因組在發(fā)育或病理活動(dòng)中動(dòng)態(tài)功能信息的,因此理論上,有10,000個(gè)基因的人類基因組可在一張芯片上、一次雜交反應(yīng)中觀察到其在目的細(xì)胞的實(shí)際表達(dá)狀態(tài),包括表達(dá)與否,表達(dá)豐度,而且兩種相關(guān)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)可在同一張片子上同時(shí)做出來,便于在最小實(shí)驗(yàn)誤差情況下比較二者細(xì)微差異。他們用熒光標(biāo)記蛋白,ATP標(biāo)記的激酶底物,都可與膜上的蛋白進(jìn)行反應(yīng)。接下來是等離子體噴鍍處理(radiofrequency glowdischarge plasma deposition),向其上噴鍍C3F6之類的多聚氟化物,相互交聯(lián)并與噴鍍表面的有機(jī)成分交聯(lián),產(chǎn)生一個(gè)光滑的而且在化學(xué)上和機(jī)械上穩(wěn)定的膜?,F(xiàn)在很難想象如果沒有文庫(無論是基因組文庫,cDNA文庫,還是產(chǎn)生新一代抗體工程的抗體庫),現(xiàn)代生物學(xué)會(huì)是個(gè)什么狀況;同樣,實(shí)現(xiàn)了庫的有序化、微型化、可方便檢測(cè)的Array又是怎樣引起了或?qū)⒁鹫麄€(gè)生物界的震撼甚至進(jìn)而整個(gè)社會(huì)面貌的改觀。 10. Kathryn Senior,F(xiàn)ingerprinting disease with protein chip arrays, MOLECULAR MEDICINE TODAY, AUGUST 1999 (VOL. 5),326327。我們還可以將它應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)中,真正實(shí)現(xiàn)用一小片試紙、一小塊芯片,從一滴血(體液)里判斷患者者疾病狀況的夢(mèng)想。 Buddy 。在膜表面覆蓋一層與氨基反應(yīng)的試劑使之通過與蛋白質(zhì)的氨基末端或賴氨酸殘基交聯(lián)反應(yīng)而固定于膜上。這種技術(shù)的特點(diǎn)是微量化、大規(guī)模、并行化和高度自動(dòng)化處理感興趣的生物樣品,精細(xì)地研究組織細(xì)胞基因表達(dá)情況,了解各種狀態(tài)下分子結(jié)構(gòu)變異和分子病理過程,并為尋找合適的醫(yī)藥或疫苗,提供了極大的便利。摘要:本文簡單回顧了生物芯片的一般原理和現(xiàn)狀,沿著生物文庫、陣列的思路線索,著重討論了構(gòu)象性蛋白質(zhì)芯片研制的必要性、可能性和原理線條。除了人的遺傳信息以外,還有其它生物尤其是模式生物(Model Organism)已經(jīng)或正在被大規(guī)模測(cè)序解密,如大腸桿菌,啤酒酵母,美麗隱桿線蟲,以及中國和日本科學(xué)家攻關(guān)的水稻基因組計(jì)劃。應(yīng)用大規(guī)模排陣和分子雜交的思想成功地制造出DNA芯片,應(yīng)用類似的思想也可以制造蛋白質(zhì)芯片(protein chip),聯(lián)合DNA芯片可以完整地檢測(cè)特定組織細(xì)胞基因的表達(dá)情況。 另外,抗原抗體反應(yīng)是目前所知生物識(shí)別最特異的類型
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