【正文】 記完全解答（根據(jù)輔導班,歷年真題,藥大內(nèi)部資料整理）選擇題出題點：20種氨基酸 各自的特點和堿基蛋白質(zhì)，核酸變性的特點測定蛋白質(zhì)含量與分子量的方法原理各類連接鍵，結構穩(wěn)定的鍵二級結構特點PI的計算，氨基酸解離分析分析方法原理：凝膠層析，電泳，離子交換等單抗，多糖，疾病原因酶活力，比活力，Km，(非)競爭性抑制 動力學效應代謝：限速酶，場所，轉(zhuǎn)運，重要聯(lián)系點代謝物抑制劑，呼吸鏈，限速酶過程：EMP,TCA,尿素循環(huán)，β氧化血漿脂蛋白種類作用名詞解釋蛋白質(zhì)等電點生物活性喪失是蛋白質(zhì)變性的主要特征。如果變性條件不劇烈，這種變性作用是可逆的，說明蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結構的變化不大?？梢奃NA變性是在一個很窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生的?？梢园阉鼈兿胂鬄橛烧郫B的條狀紙片側(cè)向并排而成,每條紙片可看成是一條肽鏈, 稱為β折疊股或β股(β－strand),肽主鏈沿紙條形成鋸齒狀,處于最伸展的構象,氫鍵主要在股間而不是股內(nèi)。它是利用丙烯酰胺和雙丙烯酰胺在催化劑的作用下聚合成大分子的凝膠物。 單抗，多糖，疾病原因單克隆抗體：動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系，重排后具有不同基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。粒系細胞和巨核細胞也都有形態(tài)上的改變和成熟細胞數(shù)量的減少。比活是酶純度的測量。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。 抑制劑對反應速度的影響　　凡是能降低酶促反應速度，但不引起酶分子變性失活的物質(zhì)統(tǒng)稱為酶的抑制劑。酶的激活劑大多數(shù)是金屬離子，如K+、Mg2+、Mn2+等，唾液淀粉酶的激活劑為Cl。凡分子大小和電荷與膜上孔狀結構相適應的溶質(zhì)皆可濾過轉(zhuǎn)運，轉(zhuǎn)運的動力為生物膜兩側(cè)的流體靜壓梯度差和滲透壓差。前者是將細胞表面的顆粒物轉(zhuǎn)運入細胞的過程。呼吸鏈使這些能量逐步釋放，有利于形成ATP和維持跨膜電勢。細胞色素aa3以復合物形式存在，又稱細胞色素氧化酶，是最后一個載體，將電子直接傳遞給氧。（脂肪酸的β氧化，基本過程： 丁酰CoA經(jīng)最后一次β氧化：生成2分子乙酰CoA 。蛋白質(zhì)變性（denaturation）:生物大分子的天然構象遭到破壞導致其生物活性喪失的現(xiàn)象。特定核酸分子的Tm值與其G＋C所占總堿基數(shù)的百分比成正相關，兩者的關系可表示為：?Tm=＋*(G+C)%一定條件下(相對較短的核酸分子)，Tm值大小還與核酸分子的長度有關，核酸分子越長，Tm值越大；另外，溶液的離子強度較低時，Tm值較低，融點范圍也較寬，反之亦然，因此DNA制劑不應保存在離子強度過低的溶液中。同一平面的堿基在二條主鏈間形成堿基對。tRNA的三葉草結構轉(zhuǎn)運RNA分子由一條長70~90個核苷酸并折疊成三葉草形的短鏈組成的。在較大的蛋白質(zhì)分子中，由于多肽鏈上相鄰的超二級結構緊密聯(lián)系，進一步折疊形成一個或多個相對獨立的致密的三維實體，即結構域。 酶活力　　酶活力單位的量度。這種抑制使Km增大而υmax不變。進食糖類物質(zhì)也不會導致酮體增多。一碳單位遺傳密碼包含在脫氧核糖核酸或核糖核酸核苷酸序列中的遺傳信息?？勾x物抗代謝物：在微生物生長過程中常常需要一些生長因子才能正常生長，可以利用生長因子的結構類似物干擾集體的正常代謝，以達到抑制微生物生長的目的。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng)，就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。如果DNA分子的堿基種類或順序發(fā)生變化，那么由它所編碼的蛋白質(zhì)分子的結構就發(fā)生相應的變化，嚴重的蛋白質(zhì)分子異?？蓪е录膊〉陌l(fā)生。由于常用計算機硅芯片作為固相支持物，所以稱為DNA芯片。DNA樣品的性質(zhì)與復性速度有關。在生物化學和分子生物學領域此法常用于分離蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子。DNA結構中的堿基對與Chatgaff的發(fā)現(xiàn)正好相符。酶固定化后一般穩(wěn)定性增加，易從反應系統(tǒng)中分離，且易于控制，能反復多次使用。青霉素的結構與細胞壁的成分粘肽結構中的D丙氨酰D丙氨酸近似，可與后者競爭轉(zhuǎn)肽酶，阻礙粘肽的形成，造成細胞壁的缺損，使細菌失去細胞壁的滲透屏障，對細菌起到殺滅作用。 　　疾病診斷 　　生物技術的開發(fā)應用，提供了新的診斷技術，特別是單克隆抗體診斷試劑和DNA診斷技術的應用，使許多疾病特別是腫瘤、傳染病在早期就能得到準確診斷。肝是最主要的合成場所,其次為小腸、腎上腺皮質(zhì)等等。固定化酶的概念制備方法及優(yōu)點　固定化酶：水溶性酶經(jīng)物理或化學方法處理后，成為不溶于水的但仍具有酶活性的一種酶的衍生物。 (2)堿基對(base pair)　　堿基位于螺旋的內(nèi)則,它們以垂直于螺旋軸的取向通過糖苷鍵與主鏈糖基相連。那些沒有親和力的蛋白質(zhì)由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質(zhì)分開，然后選用適當?shù)南疵撘海?改變結合條件將被結合的蛋白質(zhì)洗脫下來，這種分離純化蛋白質(zhì)的方法稱為親和層析。這一現(xiàn)象稱為增色效應?；蚯度胗址Q基因置換，它是利用內(nèi)源基因序列兩側(cè)或外面的斷裂點，用同源序列的目的基因整個置換內(nèi)源基因。探針以放射核素或非放射性核素標記，以利于雜交信號的檢測。單克隆抗體其過程先以經(jīng)剪切作用除去內(nèi)含子的成熟mRNA為模板，合成RNA/DNA雜化雙鏈，然后水解RNA鏈，再以剩下的DNA單鏈為模板合成DNA雙鏈。遺傳中心法則中心法則(genetic central dogma)，是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA，再從RNA傳遞給蛋白質(zhì)，即完成遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程。 　　（purine nucleotide cycle）：骨骼肌和心肌組織中L谷氨酸脫氫酶的活性很低，因而不能通過上述形式的聯(lián)合脫氨反應脫氨。尿素循環(huán)在哺乳動物中，肝與腎是糖異生的主要器官。在真核細胞的線粒體或細菌中，物質(zhì)在體內(nèi)氧化時釋放的能量供給ADP與無機磷合成ATP的偶聯(lián)反應。其中一些與酶的活性密切相關的化學基團稱作酶的必需基團（essential group） 米氏方程（MichaelisMentent equation）:表示一個酶促反應的起始速度（υ）與底物濃度([s])關系的速度方程：υ=υmax[s]/(Km+[s])變構酶 （allosteric enzyme） 具有變構效應的酶?！≡贒NA分子結構中，由于堿基之間的氫鍵具有固定的數(shù)目和DNA兩條鏈之間的距離保持不變，使得堿基配對必須遵循一定的規(guī)律，這就是Adenine（A，腺嘌呤）一定與Thymine（T，胸腺嘧啶）配對，Guanine（G，鳥嘌呤）一定與Cytosine（C，胞嘧啶）配對，反之亦然。這是由于連接于兩條主鏈糖基上的配對堿基并非直接相對, 從而使得在主鏈間沿螺旋形成空隙不等的大溝和小溝。主鏈有二條,它們似“麻花狀”繞一共同軸心以右手方向盤旋, 相互平行而走向相反形成雙螺旋構型。若以溫度對DNA溶液的紫外吸光率作圖，得到的典型DNA變性曲線呈S型(如下圖)。名詞解釋蛋白質(zhì)等電點尿素循環(huán)肝臟是動物生成尿素的主要器官，由于精氨酸酶的作用使精氨酸水解為鳥氨酸及尿素。 細胞色素類 都以血紅素為輔基，紅色或褐色。放出的能量則使ADP和磷酸生成ATP。葡萄糖、某些氨基酸、甘油、嘌呤堿等親水化合物，由于不溶于脂肪，不能借助簡單擴散進轉(zhuǎn)運，所以可在具有特定載體和順濃度梯度的情況下進行轉(zhuǎn)運。離子型的化合物不易透過生物膜的脂質(zhì)結構區(qū)。其特點為：；，抑制劑才能對酶產(chǎn)生抑制作用；：Km減小，Vm降低。 pH對反應速度的影響　　觀察pH對酶促反應速度的影響，通常為一鐘形曲線，即pH過高或過低均可導致酶催化活性的下降。其中，Vmax為最大反應速度，Km為米氏常數(shù)。導致血紅蛋白的組成成分改變，本組疾病的臨床癥狀輕重不一，大多表現(xiàn)為慢性進行性溶血性貧血。 溶血性貧血　　紅細胞過度破壞所引起的貧血，但較少見；常伴有黃疸，稱為“溶血性黃疸”； 巨幼紅細胞性貧血　　缺乏紅細胞成熟因素而引起的貧血，缺乏葉酸或維生素B12引起的巨幼紅細胞性貧血，多見于嬰兒和孕婦長期營養(yǎng)不良；巨幼細胞貧血是指骨髓中出現(xiàn)大量巨幼細胞的一類貧血。當含有大小不同的蛋白質(zhì)樣品加到凝膠柱上時，比凝膠珠平均孔徑小的蛋白質(zhì)就要連續(xù)不斷地穿入珠子的內(nèi)部，這樣的小分子不但其運動路程長，而且受到來自凝膠珠內(nèi)部的阻力也很大，所以越小的蛋白質(zhì)，把它們從柱子上洗脫下來所花費的時間越長。根據(jù)支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等。 二級結構特點二級結構：多肽鏈或多核苷酸鏈沿分子的一條軸所形成的旋轉(zhuǎn)和折疊等，主要是由分子內(nèi)的氫鍵維系的局部空間排列。DNA分子中堿基間電子的相互作用使DNA分子具有吸收260nm波長紫外光的特性。如果有化學鍵的斷裂和生成就是化學變化；如果沒有化學鍵的斷裂和生成就是物理變化。 蛋白質(zhì)變性的原因　　變性作用是蛋白質(zhì)受物理或化學因素的影響，改變其分子內(nèi)部結構和性質(zhì)的作用。核酸的增/減色效應蛋白質(zhì)的超二級結構酶的活性中心必需基團乳酸循環(huán)一碳單位抗代謝物分子病 （arginine）：精氨酸與脫氧膽酸制成的復合制劑（明諾芬）是主治梅毒、病毒性黃疸等病的有效藥物。天然蛋白質(zhì)的空間結構是通過氫鍵等次級鍵維持的，而變性后次級鍵被破壞，蛋白質(zhì)分子就從原來有序的卷曲的緊密結構變?yōu)闊o序的松散的伸展狀結構（但一級結構并未改變）。凡能破壞雙螺旋穩(wěn)定性的因素，如加熱、極端的pH、有機試劑甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等，均可引起核酸分子變性。氨基酸的二級結構是指氨基酸主鏈原子的局部空間結構,并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈構象,二級結構的種類有α螺旋、β折疊、β轉(zhuǎn)角兒以及無規(guī)卷曲。此時蛋白在電場中不再移動，此溶液的pH稱該蛋白質(zhì)的等電點。 在電場中充有兩性載體和抗對流介質(zhì)，當加上電場后，由于兩性載體移動的結果，在兩極間逐步建立穩(wěn)定的pH梯度，當?shù)鞍踪|(zhì)分子或其他兩性分子存在于這樣的pH梯度中時，這種分子便會由于其表面電荷在此電場中運動，并最終達到一個使其表面靜電荷為0的區(qū)帶，這時的pH則是該分子的pI，聚焦在等電點的分子也會不斷擴散，一旦偏離其等電點后，由于pH環(huán)境的改變，分子又立即得到正電荷或負電荷，從而又向pI遷移。多糖（polysaccharide）：是由糖苷鍵結合的糖鏈，至少要超過10個以上的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（c6h10o5）n表示。有時巨幼細胞貧血較輕，巨幼細胞的形態(tài)往往不很典型，稱為類巨幼細胞。 　　非競爭性抑制作用（nonpetitive inhibition）: 抑制劑不僅與游離酶結合，也可以與酶底物復合物結合的一種酶促反應抑制作用。 　　⑦Vmax可用于酶的轉(zhuǎn)換數(shù)的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉(zhuǎn)換數(shù)，即單位時間內(nèi)每個酶分子催化底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的分子數(shù)。 　?、瓶赡嬉种谱饔茫?　　抑制劑以非共價鍵與酶分子可逆性結合造成酶活性的抑制，且可采用透析等簡單方法去除抑制劑而使酶活性完全恢復的抑制作用就是可逆抑制作用。 簡單擴散（simple diffusion）外源化學物大部分是具有一定脂溶性的大分子有機化合物，可首先溶解于膜的脂質(zhì)成分而后擴散到另一側(cè)。特殊轉(zhuǎn)運 特殊轉(zhuǎn)運指有一定的載體，具有較強的專一性，有一定的選擇性和主動性，生物膜主動選擇某種機體需要或由機體排出的物質(zhì)進行的轉(zhuǎn)運。所以胞吞和胞吐作用對體內(nèi)外源化學物或異物的清除轉(zhuǎn)運具有重要意義。它從NADH得到兩個電子，經(jīng)鐵硫蛋白傳遞給輔酶Q。標兵酶是一種調(diào)節(jié)酶，它們常常也是別構酶。血漿脂蛋白可以把脂類(三酰甘油、磷脂、膽固醇)從一個器官運輸?shù)搅硪粋€器官。指變性后DNA溶液的紫外吸收作用增強的效應。β－折疊(β－sheet)也是一種重復性的結構,可分為平行式和反平行式兩種類型，它們是通過肽鏈間或肽段間的氫鍵維系。每對堿基處于各自自身的平面上，但螺旋周期內(nèi)的各堿基對平面的取向均不同。三葉草結構的其余兩環(huán)被包裹成肘狀，在那里它們提供整個分子的結構。米氏常數(shù)催化同一化學反應而化學組成不同的一組酶。主要為機體提供可利用的能量。也稱為糖胺聚糖。花生四烯酸是大多數(shù)前列腺素的前體，前列腺素是能調(diào)節(jié)細胞功能的激素樣物質(zhì)。其實可以看成是氨基酸的氨基與α酮酸的酮基進行了交換。所以一碳單位缺乏時對代謝較強的組織影響較大，例如：紅細胞，導致巨幼性貧血。轉(zhuǎn)錄生物技術藥物cDNA文庫廣義的基因敲除包括某個或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因調(diào)控序列的敲除以及成段基因組序列的敲除。核酸變性時，并不涉及核苷酸間磷酸二酯鍵的斷裂，后者稱為核酸降解，核酸降解伴有核酸分子量降低，而核酸變性作用則無此改變。 一般是大分子先流出來，小分子后流出來。 也就是說雙螺旋結構在滿足二條鏈堿基互補的前提下，DNA的一級結構產(chǎn)并不受限制。但是,由于包埋物或半透膜具有一定的空間或立體阻礙作用,因此對一些反應不適用。生物技術在醫(yī)藥方面的應用　　目前，醫(yī)藥衛(wèi)生領域是現(xiàn)代生物技術應用得最廣泛、成績最顯著、發(fā)展最迅速、潛力也最大的一個領域。注射或口服疫苗可以激活體內(nèi)的免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生專門針對病原體的特異性抗體。 　　它在具有線粒體的組織中可以進入三羧酸循環(huán)進行徹底氧化轉(zhuǎn)化為二氧化碳、水和能量。 (3)大溝和小溝　　大溝和小溝分別指雙螺旋表面凹下去的較大溝槽和較小溝槽。如蛋白質(zhì)的α螺旋、β片層、β轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲及DNA的雙螺旋結構。 DNA熱變性的溫度一般為70176。敲除的基因用以觀察生物或細胞的表型變化，是研究基因功能的重要手段。核酸的雜交轉(zhuǎn)錄是遺傳信息由DNA轉(zhuǎn)換到RNA的過程。合成的子代DNA，一股單鏈從親代完整地接受過來，另一股單鏈則完全從新合成。轉(zhuǎn)氨酶與谷氨酸氧化脫氨或是嘌呤核苷酸循環(huán)聯(lián)合脫氨，以滿足機體排泄含氮廢物的需求。對成人來說，這類氨基酸有8種，包括賴氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸、苯丙氨酸。通過生成的乙酰輔酶A與草酰乙酸縮合生成檸檬酸(三羧酸)開始，再通過一系列氧化步驟產(chǎn)生CONADH及FADH2，最后仍生成草酰乙酸，進行再循環(huán)，從而為細胞提供了降解乙?；峁┊a(chǎn)生能量的基礎。呼吸鏈(respiratory chain)是由一系列的遞氫反應(hydrogen transfer reacti