【正文】 低濃度而且不需要細胞供給能量的擴散性轉運。腸道上皮細胞和肥大細胞膜上孔道直徑較小，分子量小于200的化合物方可以通過。（3）外源化學物的電離狀態(tài)：化合物分子在水溶液中分解成為帶電荷離子的過程稱為電離。被動轉運 被動轉運的特點是轉運過程中生物膜不具有主動性，不消耗能量，被轉運的物質只能從高濃度流入低濃度。 　?、?反競爭性抑制：抑制劑不能與游離酶結合，但可與ES復合物結合并阻止產物生成，使酶的催化活性降低，稱酶的反競爭性抑制。如果以ν～[E]作圖，就可得到一組斜率相同的平行線，隨抑制劑濃度的增加而平行向右移動。低溫時由于活化分子數目減少，反應速度降低，但溫度升高后，酶活性又可恢復。 　　⑤Km可用來判斷酶的最適底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最適底物。 Menten 于1913年推導出了上述矩形雙曲線的數學表達式，即米氏方程： ν= Vmax[S]/(Km+[S])。競爭性抑制劑通常與正常的底物或配體競爭同一個蛋白質的結合部位。其共同特點是由于珠蛋白基因的缺陷使血紅蛋白中的珠蛋白肽鏈有一種或幾種合成減少或不能合成。經Wright染色后，原巨幼細胞的胞漿呈深藍色，無顆粒，核周圍有一染色較淺的圈；核圓形，染成紫色，最顯著的特點是染色質呈顆粒狀，彼此隔開，隔開處比較透亮，有時在核的周邊有彼此分開的染色質小塊，形成所謂“鐘面”的狀態(tài)；核仁較大，藍色。貧血具體分類缺鐵性貧血　　缺鐵而影響血紅蛋白合成所引起的貧血 出血性貧血　　急性大量出血(如胃和十二指腸潰瘍病、食管靜脈曲張破裂或外傷等)所引起的。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng)，就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。如果將這樣的凝膠裝入一個足夠長的柱子中，作成一個凝膠柱。由于聚丙烯酰胺凝膠化學性質較瓊脂穩(wěn)定，很少帶有側基，在電泳過程中，吸附作用與電滲作用均小，所以該技術的分辨率均高于其它瓊脂電泳技術。 意義 o 凡是帶電顆粒均可通過電泳加以分離 o 電泳技術是生化常用分析技術 分析方法原理：凝膠層析，電泳，離子交換等電泳：蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的，在電場中能向電場的正極或負極移動。平行折疊片比反平行折疊片更規(guī)則且一般是大結構而反平行折疊片可以少到僅由兩個β股組成。維持其穩(wěn)定的是次級鍵,如氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華力等。特定核酸分子的Tm值與其G＋C所占總堿基數的百分比成正相關，兩者的關系可表示為：?Tm=＋*(G+C)%一定條件下(相對較短的核酸分子)，Tm值大小還與核酸分子的長度有關，核酸分子越長，Tm值越大；另外，溶液的離子強度較低時，Tm值較低，融點范圍也較寬，反之亦然，因此DNA制劑不應保存在離子強度過低的溶液中。指變性后DNA溶液的紫外吸收作用增強的效應。DNA變性 　　DNA變性指DNA分子由穩(wěn)定的雙螺旋結構松解為無規(guī)則線性結構的現(xiàn)象。蛋白質的變性很復雜，要判斷變性是物理變化還是化學變化，要視具體情況而定。 （三）生物化學性質的改變 　　蛋白質變性后，分子結構松散，不能形成結晶，易被蛋白酶水解。蛋白質結構　　蛋白質是由多種氨基酸通過肽鍵構成的高分子化合物，在蛋白質分子中各氨基酸通過肽鍵及二硫鍵結合成具有一定順序的肽鏈稱為一級結構；蛋白質的同一多肽鏈中的氨基和酰基之間可以形成氫鍵或肽鏈間形成氫鍵，使得這一多肽鏈具有一定的構形，包括α螺旋、β折疊、β轉角和自由專曲，這些稱為蛋白質的二級結構；二級結構通過連接形成三級結構；多條肽鏈聚集成為具有一定空間構型稱為四級結構，其中一條肽鏈叫一個亞基。凝膠過濾　　問答（有些和名解重復）蛋白質的二級結構DNA的雙螺旋結構固定化酶的概念制備方法及優(yōu)點　β氧化與脂肪酸合成的比較乙酰CoA的來源去路及在細胞內的定位青霉素的抗菌機制磺胺藥與抗菌增效劑的抗菌機制現(xiàn)代生物技術的定義主要內容及在新藥研究開發(fā)中的應用哪些生化研究成果應用于新藥設計研究酶催化高效率的因素及基本原理糖在體內主要代謝途徑及生理意義糖酵解與糖異生的比較酮體的生成利用及意義尿素循環(huán)過程，特點及意義大腸桿菌DNA復制過程RNA轉錄過程重組DNA技術概念過程及應用選擇題出題點：20種氨基酸 各自的特點和堿基必需氨基酸　?。╡ssential amino acid）： 指人體（或其它脊椎動物）不能合成或合成速度遠不適應機體的需要，必需由食物蛋白供給，這些氨基酸稱為必需氨基酸。核酸復性核酸的雜交生物藥物核蛋白體循環(huán)岡崎片斷聯(lián)合脫氨基作用必需氨基酸TCA循環(huán)呼吸鏈同工酶變構酶蛋白質的結構域β折疊蛋白質變性 人體雖能夠合成Arg和His，但合成的量通常不能滿足正常的需要，因此，這兩種氨基酸又被稱為半必需氨基酸。能使蛋白質變性的化學方法有加強酸、強堿、重金屬鹽、尿素、乙醇、丙酮等；能使蛋白質變性的物理方法有加熱(高溫)、紫外線及X射線照射、超聲波、劇烈振蕩或攪拌等。所以，原來處于分子內部的疏水基團大量暴露在分子表面，而親水基團在表面的分布則相對減少，至使蛋白質顆粒不能與水相溶而失去水膜，很容易引起分子間相互碰撞而聚集沉淀。 蛋白質復性　　蛋白質在受到光照、熱、有機溶劑以及一些變性劑的作用時，次級鍵受到破壞，導致天然構象的破壞，使蛋白質的生物活性喪失。 　　變性DNA常發(fā)生一些理化及生物學性質的改變： 1）溶液粘度降低。 融解溫度　　對雙鏈DNA進行加熱變性，當溫度升高到一定高度時，DNA溶液在260nm處的吸光度突然明顯上升至最高值，隨后即使溫度繼續(xù)升高，吸光度也不再明顯變化。氫鍵是維系二級結構最主要的鍵。β轉角：蛋白質二級結構類型之一,由4個氨基酸殘基組成，其中第一個殘基的CO基團和第四個殘基的NH基團之間形成氫鍵，使多肽鏈的方向發(fā)生“U”形改變。 　　因為當環(huán)境PH值等于PI值時，蛋白質的溶解度最小，常用于分離和提純蛋白質或氨基酸。凝膠電泳通常用于分析用途，但也可以作為制備技術，在采用某些方法（如質譜(MS)、聚合酶鏈式反應(PCR)、克隆技術、DNA測序或者免疫印跡）檢測之前部分提純分子。因此，這些分子總會是處于不斷擴散和抗擴散的平衡中，在pI處得以“聚焦”.離子交換層析 利用蛋白質的兩性游離性質，在某一特定ＰＨ時，各蛋白質的電荷量及性質不同，故可以通過離子交換層析得以分離。因此，大的蛋白質直接通過凝膠珠之間的縫隙首先被洗脫下來。由相同的單糖組成的多糖稱為多糖，如淀粉、纖維素和糖原；以沒的單糖組成的多糖稱為雜多糖，如阿拉伯膠是由戊糖和半乳糖等組成。這種巨幼細胞的形成是DNA合成缺陷的結果，核的發(fā)育和成熟落后于含血紅蛋白的胞漿。絕大多數巨幼細胞貧血是由葉酸、維生素B12缺乏引起的，但也有一小部分是例外，如抗代謝藥物引起的巨幼細胞增生、紅白血病和紅血病、鐵粒幼細胞貧血的巨幼細胞增多、遺傳性乳清酸尿等。1961年國際酶學會議規(guī)定：1個酶活力單位是指在特定條件（25℃，其它為最適條件）下，在1min 內能轉化1μmol底物的酶量，或是轉化底物中1μmol的有關基團的酶量。這種抑制使Km不變而υmax變小。因此，Km等于酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。 　?、菿m和Vmax的測定：主要采用LineweaverBurk雙倒數作圖法和Hanes作圖法?！?。如果以ν～[E]作圖，可得到一組隨抑制劑濃度增加而斜率降低的直線。其特點為：；，故底物濃度的改變對抑制程度無影響；：Km值不變，Vm值降低。簡單擴散過程可受下列因素的影響：(1)生物膜兩側的濃度差：濃度差越大，擴散越快。弱酸性化學物在酸性介質中非離子型多，在堿性介質中離子型多；弱堿性化學物在酸性介質中離子型多，而在堿性介質中非離子型多。特殊轉運分主動轉運和易化擴散。在一些大分子顆粒物質被吞噬細胞由肺泡去除或被肝和脾的網狀內皮系統(tǒng)由血液去除的過程中起主導作用。糖的無氧分解糖的有氧氧化磷酸戊糖途徑磷酸戊糖途徑總反應方程式如下：抑制劑，呼吸鏈，限速酶　　能減弱、抑制甚至破壞酶活性的物質稱為酶的抑制劑。整個過程稱為氧化呼吸鏈或呼吸代謝。鐵硫蛋白含有非血紅素鐵和酸不穩(wěn)定硫，其鐵與肽類半胱氨酸的硫原子配位結合。根據吸收光譜，可分為三類：a,b,c。過程：EMP,TCA,尿素循環(huán)，β氧化　EMP途徑即糖酵解途徑或稱葡萄糖酵解途徑，這條途徑幾乎是所有具有細胞結構的生物所共有的主要代謝途徑。由于精氨酸水解在尿素生成后又重新反復生成，故稱尿素循環(huán)。血槳脂蛋白分類　　血漿脂蛋白是根據密度來分類的： 　?。?） 乳糜微粒，密度非常低，運輸甘油三酯和膽固醇酯，從小腸到組織肌肉和adipose組織。蛋白質變性DNA分子中堿基間電子的相互作用使DNA分子具有吸收260nm波長紫外光的特性。通常將核酸加熱變性過程中，紫外光吸收值達到最大值的50%時的溫度稱為核酸的解鏈溫度，由于這一現(xiàn)象和結晶的融解相類似，又稱融解溫度(Tm,melting temperature)。可以把它們想象為由折疊的條狀紙片側向并排而成,每條紙片可看成是一條肽鏈, 稱為β折疊股或β股(β－strand),肽主鏈沿紙條形成鋸齒狀,處于最伸展的構象,氫鍵主要在股間而不是股內。所謂雙螺旋就是針對二條主鏈的形狀而言的。堿基對具有二次旋轉對稱性的特征，即堿基旋轉180176。 (4)結構參數螺旋直徑2nm；螺旋周期包含10對堿基；；。四個常見RNA堿基腺嘌呤，尿嘧啶，鳥嘌呤和胞嘧啶顯然不能提供足夠的空間以形成一個堅固的結構，因為這些堿基大部分被修飾過以延長它們的結構。 　　腺嘌呤與胸腺嘧啶之間有兩個氫鍵，鳥嘌呤與胞嘧啶之間有三個氫鍵，即A＝T, G≡C結構域結構域是位于超二級結構和三級結構間的一個層次。變構酶分子組成，一般是多亞基的，分子中凡與底物分子相結合的部位稱為催化部位(catalytic site)，凡與效應劑相結合的部位稱為調節(jié)部位(regulatory site)，這二部位可以在不同的亞基上，或者位于同一亞基。產生同工酶的主要原因是在進化過程中基因發(fā)生變異，而其變異程度尚不足以成為一個新酶。酶的競爭性抑制競爭性抑制作用（petitive inhibition）：通過增加底物濃度可以逆轉的一種酶抑制類型。呼吸鏈這種含有高能鍵的物質，其高能鍵斷裂后，釋放高能磷酸基團，使ADP磷酸化生成ATP的過程，被稱為底物水平磷酸化作用（substrate level phosphorylation）。重要的粘多糖有：硫酸皮膚素，硫酸類肝素，硫酸角質素，硫酸軟骨素和透明質酸等TCA循環(huán)三羧酸循環(huán)：體內物質糖類、脂肪或氨基酸有氧氧化的主要過程。肝臟具有較強的合成酮體的酶系，但卻缺乏利用酮體的酶系。必需氨基酸　必需氨基酸指的是人體自身不能合成或合成速度不能滿足人體需要，必須從食物中攝取的氨基酸。精氨酸在釋放了尿素后產生的鳥氨酸，和氨甲酰磷酸反應產生瓜氨酸，瓜氨酸又和天冬氨酸反應生成精氨基琥珀酸，精氨基琥珀酸為酶裂解，產物為精氨酸及延胡索酸。聯(lián)合脫氨基作用 　　一種氨基酸經過兩次轉氨作用可將α氨基轉移至草酰乙酸生成門冬氨酸。 半保留復制DNA生物合成時，以母鏈DNA兩股單鏈各自作為模板(template)，按堿基配對規(guī)律，合成與模板互補的子鏈。這是所有有細胞結構的生物所遵循的法則。核蛋白體循環(huán)是指活化的氨基酸在核糖體上，以mRNA為模板合成多肽鏈的過程。就是利用基因工程技術、細胞工程技術、微生物工程技術、酶工程技術、蛋白質工程技術、分子生物學技術等來研究和開發(fā)藥物，用來診斷、治療和預防疾病的發(fā)生。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。以mRNA為模板，經反轉錄酶催化，在體外反轉錄成cDNA，與適當的載體（常用噬菌體或質粒載體）連接后轉化受體菌，則每個細菌含有一段cDNA，并能繁殖擴增，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細胞的cDNA文庫。分子病由于遺傳上的原因而造成的蛋白質分子結構或合成量的異常所引起的疾病。常用同源重組的方法?！　∫鸷怂嶙冃缘囊蛩睾芏?，由于溫度升高而引起的變性稱熱變性?！　。ǘ?復性　　變性DNA在適當條件下，彼此分開的兩條鏈重新締合恢復其天然DNA性質，這一過程稱為復性或退火。親和層析離子交換層析固定相是離子交換劑的層析分離技術。問答題（有些和名解重復）蛋白質的二級結構二級結構：多肽鏈或多核苷酸鏈沿分子的一條軸所形成的旋轉和折疊等，主要是由分子內的氫鍵維系的局部空間排列。配對堿基總是A與T和G與C。這一特征能很好的闡明DNA作為遺傳信息載體在生物界的普遍意義。優(yōu)點：固定化酶（immobilized enzyme）不溶于水的酶?；瘜W法是將酶通過化學鍵連接到天然的或合成的高分子載體上,使用偶聯(lián)劑通過酶表面的基團將酶交聯(lián)起來,而形成相對分子量更大、不溶性的固定化酶的方法.β氧化與脂肪酸合成的比較　合成分解反應最活躍時期高糖膳食后饑餓刺激激素胰島素/胰高血糖素高比值胰島素／胰高血糖素低比值主要組織定位肝臟為主肌肉、肝臟亞細胞定位胞漿線粒體為主?；d體檸檬酸（線粒體到胞漿）肉毒堿（胞漿到線粒體）含磷酸酰疏基乙胺的活性載體?；d體蛋白區(qū)，CoACoA氧化還原輔因子NADPHNAD+，F(xiàn)AD二碳供體/產物丙二酰CoA；酰基供體乙酰CoA：產物激活劑 抑制劑檸檬酸脂輔酶CoA（抑制乙酰CoA羧化酶）丙二酰CoA（抑制肉毒堿?；D移酶）反應產物軟脂酸乙酰輔酶A乙酰CoA的來源去路及在細胞內的定位　　乙酰CoA（乙酰輔酶A）乙酰CoA（乙酰輔酶A）可以通過脂肪酸的β氧化、丙酮酸氧化脫羧和氨基酸的降解生成，其實是活化了的乙酸。 　　酮體是肝分解氧化脂酸時候特有的中間代謝物,只有肝能利用乙酰CoA生成酮體。 　　疾病預防 　　利用疫苗對人體進行主動免疫是預防傳染性疾病的最有效