【正文】 用牙簽或鑷子將組織塊移至盛有預冷的固定液的小瓶中。 ? 置換 用脫水劑：環(huán)氧丙烷（ Epon812）、二甲苯（石蠟）。 ▲ 超薄切片染色 (2)超薄切片后染色 醋酸雙氧鈾 檸檬酸鉛雙染 鈾染 :細胞核及結締組織染色 鉛染 :提高細胞質成分的反差 1）前固定 （ 固定液體積是固定材料的十倍以上，材料不堆積 ） 3%戊二醛 in PBS ,，室溫 56h，后 4176。 盛放過包埋劑的容器要及時用丙酮清洗干凈 . 167。 注意事項 ? 脫水梯度逐級進行 , 急劇脫水會引起細胞收縮 。 (3)減小損傷 ，切割器械鋒利，操作輕，避免牽拉、挫傷與擠壓組織。 (4)高錳酸鉀 ※ 強氧化劑，較好固定 脂蛋白 。 所用 器皿 應烘干； 167。 C, overnight,可以停下） 80%95%100%100%） 用丙酮置換乙醇： 乙醇 :丙酮 =1:1，純丙酮 2次， 每級 2030分鐘 6）滲透 丙酮 :樹脂 =2:1， 1:1（可以停下了， overnight） ， 1:2 23h/級 純樹脂 12h， 換純樹脂 12h （從進入樹脂開始更要嚴格防潮?。? 7）包埋聚合 60176。 包埋、聚合 包埋操作： 將組織塊包埋在多孔橡膠包埋模板中或膠囊中，一定條件下可聚合硬化，形成包埋塊。 ︾ 目的是盡可能使細胞中的各種 細胞器 以及大分子結構 保持生活狀態(tài)，牢固地固定在它們 原來 所在的 位置 上，不發(fā)生位移。 2 固定 (抽氣 ) 固定的目的 ︾ 采用物理、化學等方法迅速殺死細胞的過程稱之為固定。 包埋劑在單體狀態(tài)時 (聚合前 )為液體，能夠滲入組織內，當加入某些催化劑，經(jīng)加溫或其他條件，能聚合成固體，以便進行超薄切片。 C overnight 4）漂洗： PBS 充分漂洗 34次， 2030Min/次 5）系列脫水 ： 30%50%70%（ 4176。 配包埋劑時，每加入一種試劑要攪拌均勻； 167。 ※ 對 神經(jīng)髓鞘 、 葉綠體 及其他各種 膜結構 的研究均可作為固定劑； ※ 只用于某些常用固定劑難以固定的植物和酵母樣品，且一般不需要用鋨酸后固定 . 3漂洗、脫水 漂洗的目的 : ☆ 組織固定后脫水前的漂洗 : 清除殘留固定劑 ,減小固定劑和脫水劑之間