【正文】 晶干燥得純品。 第 5 期：形成大空泡，有中性染色大顆粒，菌絲呈桶狀，脂肪包涵體消失，青霉素產(chǎn)量最高。1 ℃ 。葡萄糖的流加，波動(dòng)范圍較窄，濃度過(guò)低使抗生素合成速度減慢或停止，過(guò)高則導(dǎo)致呼吸活性下降，甚至引起自溶，葡萄糖濃度調(diào)節(jié)是根據(jù) pH，溶氧或 CO2 釋放率予以調(diào)節(jié)。 流加控制：補(bǔ)糖，根據(jù)殘?zhí)恰?pH、尾氣中 CO2 和 O2 含量。 pH 上升，加糖率過(guò)低不足以中和蛋白產(chǎn)生的氨或其他生理堿性物質(zhì)。 （ 6）消沫 發(fā)酵過(guò)程泡沫較多，需補(bǔ)入消沫劑。濾液澄清透明，進(jìn)行萃取。 萃取條件：為減少青霉素降解，整個(gè)萃取過(guò)程應(yīng)在低溫下進(jìn)行（ 10 ℃ 以下）。結(jié)晶經(jīng)過(guò)洗滌、干燥后，得到青霉素產(chǎn)品。萃取總收率在 85％左右。濾液 ，蛋白 質(zhì)含量 %。另外，因補(bǔ)入物料較多，在發(fā)酵中后期一般每天帶放一次，每次放掉總發(fā)酵液 的 10%左右。過(guò)高則會(huì)降低發(fā)酵產(chǎn)率，增加葡萄糖的維持消耗，降低葡萄糖至青霉素的轉(zhuǎn)化得率。補(bǔ)加無(wú)機(jī)氮源。發(fā)酵過(guò)程需連續(xù)流加補(bǔ)入葡萄糖、硫酸銨以及前體物質(zhì)苯乙酸鹽，補(bǔ)糖率是最關(guān)鍵的控制指標(biāo)，不同時(shí)期分段控制。 （ 2）種子罐和發(fā)酵罐培養(yǎng)工藝 種子培養(yǎng)要求產(chǎn)生大量健壯的菌絲體，因此，培養(yǎng)基應(yīng)加入比較豐富的易利用的碳源和有機(jī)氮源。 二、 發(fā)酵條件下的生長(zhǎng)過(guò)程 第 1 期：分生孢子萌發(fā)，形成芽管，原生質(zhì)未分化，具有小泡。另外，培養(yǎng)基中還得添加無(wú) 機(jī)鹽、微量元素以及消沫劑，部分抗生素還得加入特殊前體，如青霉素的前體是苯乙酸，大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素的前體是丙酸鹽。青霉素；生產(chǎn)工藝 抗生素在目前的制藥工業(yè)中仍占有舉足輕重的地位，尤其是下游半合成抗生素的發(fā)展，進(jìn)一步刺激了上游的工業(yè)發(fā)酵。 最初青 霉素的生產(chǎn)菌是音符型青霉菌，生產(chǎn)能力只有幾十個(gè)單位，不能滿(mǎn)足工業(yè)需要。 1－ 4 期為菌絲生長(zhǎng)期， 3 期的菌體適宜為種子。 三級(jí)發(fā)酵罐：生產(chǎn)罐。發(fā)酵初期，利用快效的葡萄糖進(jìn)行菌絲生長(zhǎng)。但濃度大于 ％時(shí)對(duì)細(xì)胞和合成有毒性。 （ 4）溶氧 溶氧＜ 30％飽和度，產(chǎn)率急劇下降，低于 10％，則造成不可逆的損害。 五 、 青霉素的提煉工藝過(guò)程 青霉素提純工藝流程簡(jiǎn)圖： 青霉素不穩(wěn)定，發(fā)酵液預(yù)處理、提取和精制過(guò)程要條件溫和、快速，防止降解。工業(yè)上通常用醋酸丁酯和戊酯。然 后采用重結(jié) 晶方法，進(jìn)一 步提高純度，將鉀鹽溶于 KOH 溶液，調(diào) pH 至中性，加無(wú)水丁醇，在真空條件下，共沸蒸餾結(jié)晶得純品。加醋酸鉀－乙醇溶液，得到青霉素鉀鹽。從發(fā)酵液萃取到乙酸丁酯時(shí)， pH 選擇 ，從乙酸丁酯反萃到水相時(shí)， pH 選擇 。是進(jìn)行分離純化的一個(gè)工序。通氣比一般為 1： 。 策略是流加低濃度前體，一次加入量低于 %，保持供應(yīng)速率略大于生物合成的需要?？筛鶕?jù)形態(tài)變化，滴加葡萄糖，取代乳糖。接種量為 12