【正文】 d Low pressure High pressure 細(xì)胞周期 FL3 0 1024 2048 3072 4096 Count 300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 . G0/G1 CV= 2 . 42 G2/M S phase G0/G1 FL3 0 1024 2048 3072 4096 Count 340 320 300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 GO/G1 CV= 7 . 79 . 流式細(xì)胞儀的構(gòu)造 1. 細(xì)胞樣本成單列依次通過(guò)光檢測(cè)區(qū) 2. 激發(fā)并收集各種光信號(hào) 液流系統(tǒng) 光學(xué)系統(tǒng) 光學(xué)系統(tǒng) ? 激發(fā)光學(xué)系統(tǒng) : 激發(fā)光源 — 激光 透鏡和反射鏡 — 將激光引導(dǎo)到檢測(cè)區(qū)域 ? 接收光學(xué)系統(tǒng) : 濾光片等 — 將產(chǎn)生的光信號(hào)引導(dǎo)到對(duì)應(yīng)的光學(xué)接收器 激發(fā)光學(xué)系統(tǒng) : 將激光引導(dǎo)到檢測(cè)區(qū)域，產(chǎn)生光信號(hào) 激光 單波長(zhǎng) 高強(qiáng)度 高穩(wěn)定 488 nm blue 633 nm red 405 nm violet Light Signals 光學(xué)棱鏡 流式細(xì)胞儀檢測(cè)信號(hào) Injector Tip Fluorescence signals Focused laser beam Sheath fluid Laser beam 1. 散射光信號(hào) 前向角散射光 (FSC) 側(cè)向角散射光 (SSC) 360度立體角 通過(guò)流式細(xì)胞儀我們可以得到 ? 相對(duì)細(xì)胞大小 （前向角散射光 FSC） ? 相對(duì)細(xì)胞顆粒密度和內(nèi)部復(fù)雜度 （側(cè)向角散射光 SSC） ? 染色過(guò)細(xì)胞的相對(duì)熒光強(qiáng)度 （熒光 Fluoresent light） 前向角散射光（ FSC） Forward (Angle Light) Scatter ? FSC信號(hào)收集方向與激光束相平行 ? FSC與被測(cè)細(xì)胞或顆粒相對(duì)大小及表面積相關(guān) FALS Sensor Laser 前向角散射光（ FSC） FSC is proportional to relative size amp。 計(jì)算一個(gè)電壓脈沖峰 Time Volts Pulse Area Pulse Height Pulse Width 0 — 面積是對(duì)熒光光通量進(jìn)行積分測(cè)量的結(jié)果 — 寬度 =面積 /高度，與顆粒通過(guò)激光照射區(qū)的時(shí)間成正比 — 特定參數(shù)可選擇面積、寬度信號(hào)（ DNA含量分析）