【正文】 d Low pressure High pressure 細胞周期 FL3 0 1024 2048 3072 4096 Count 300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 . G0/G1 CV= 2 . 42 G2/M S phase G0/G1 FL3 0 1024 2048 3072 4096 Count 340 320 300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 GO/G1 CV= 7 . 79 . 流式細胞儀的構(gòu)造 1. 細胞樣本成單列依次通過光檢測區(qū) 2. 激發(fā)并收集各種光信號 液流系統(tǒng) 光學(xué)系統(tǒng) 光學(xué)系統(tǒng) ? 激發(fā)光學(xué)系統(tǒng) : 激發(fā)光源 — 激光 透鏡和反射鏡 — 將激光引導(dǎo)到檢測區(qū)域 ? 接收光學(xué)系統(tǒng) : 濾光片等 — 將產(chǎn)生的光信號引導(dǎo)到對應(yīng)的光學(xué)接收器 激發(fā)光學(xué)系統(tǒng) : 將激光引導(dǎo)到檢測區(qū)域，產(chǎn)生光信號 激光 單波長 高強度 高穩(wěn)定 488 nm blue 633 nm red 405 nm violet Light Signals 光學(xué)棱鏡 流式細胞儀檢測信號 Injector Tip Fluorescence signals Focused laser beam Sheath fluid Laser beam 1. 散射光信號 前向角散射光 (FSC) 側(cè)向角散射光 (SSC) 360度立體角 通過流式細胞儀我們可以得到 ? 相對細胞大小 （前向角散射光 FSC） ? 相對細胞顆粒密度和內(nèi)部復(fù)雜度 （側(cè)向角散射光 SSC） ? 染色過細胞的相對熒光強度 （熒光 Fluoresent light） 前向角散射光（ FSC） Forward (Angle Light) Scatter ? FSC信號收集方向與激光束相平行 ? FSC與被測細胞或顆粒相對大小及表面積相關(guān) FALS Sensor Laser 前向角散射光（ FSC） FSC is proportional to relative size amp。 計算一個電壓脈沖峰 Time Volts Pulse Area Pulse Height Pulse Width 0 — 面積是對熒光光通量進行積分測量的結(jié)果 — 寬度 =面積 /高度，與顆粒通過激光照射區(qū)的時間成正比 — 特定參數(shù)可選擇面積、寬度信號（ DNA含量分析）