【正文】 醇。從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。 專業(yè)資料分享 土壤中產(chǎn)淀粉酶芽胞桿菌的篩選及其淀粉酶活力的測定設計性實驗方案一、綜述： 淀粉酶是淀粉降解酶。一般地說，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影響，微生物不易生存，離地表10 cm～30 cm的土層中菌數(shù)最多，隨土層加深，菌的數(shù)量減少【5】。加入瓊脂,加熱煮沸，使瓊脂溶化。C溫室中培養(yǎng)約20h.。菌種的鑒定、顏色、干濕情況、形態(tài) 、高度 、透明程度、邊緣、是否易被挑起、氣味等。淀粉瓊脂平板不宜保存于冰箱，因而以臨用時制備為妥。每管分別加入40％NaOH溶液10～20滴，并加等量α奈酚，振蕩試管，以使空氣中的氧溶入，置37℃恒溫箱中保溫15～30min后，若培養(yǎng)液呈紅色，（用“＋”表示）；若不呈紅色，（用“－”表示）。酶活力根據(jù)下式計算：酶活力（u/ml）=(Rr)/R*50*D式中R、r分別表示對照和反應液的光密度，D為酶的稀釋倍數(shù)。進行染色鑒定時，都應有已知的對照菌種在同等條件下染色，然后進行對比記錄結(jié)果。種子液以2 %接種量接種于產(chǎn)酶液體培養(yǎng)基50/500mL ,相同條件培養(yǎng)72h ,發(fā)酵8000r/min，離心10min ,取上清液測酶活, 每個樣品重復3 次,最后結(jié)果取平均值。立即檢視結(jié)果，陽性反應（淀粉被分解）為瓊脂培養(yǎng)基呈深藍色、菌落或培養(yǎng)物周圍出現(xiàn)無色透明環(huán)、或肉湯顏色無變化。（注：觀察芽孢的形狀和位置，查伯杰細菌手冊）復染：滴加番紅染色液，染3－5分鐘，水洗后用吸水紙吸干。37℃下恒溫培養(yǎng)24h。加入瓊脂,加熱煮沸，使瓊脂溶化。二、實驗目的要求1．了解生物分離提純的原理和方法技術2．掌握從土壤中篩選產(chǎn)淀粉酶菌株的原理和方法、綜合分析問題解決問題和判斷實驗結(jié)果的能力。淀粉酶種類繁多,特點各異,可應用于造紙、印染、釀造、果汁和食品加工、醫(yī)藥、洗滌劑、工業(yè)副產(chǎn)品及廢料的處理、青貯飼料及微生態(tài)制劑]等多種領域。因此，純培養(yǎng)的確定除觀察其菌落特征外，還要結(jié)合顯微鏡檢測個體形態(tài)特征后才能確定，有些微生物的純培養(yǎng)要經(jīng)過一系列分離與純化過程和多種特征鑒定才能得到。每個環(huán)境的土樣裝1個錐形瓶，共2個，同時將其分為4組，編號AB。實驗室里，四個平板均加入碘液，立即觀察記錄陽性和陰性菌落所在位置，并可同時記錄透明圈的大小。 在上述各平板中分別劃線接種不同的菌種，每個菌種重復接種六個平板。注意接種的整個過程中，不能人為的制造氣泡，若發(fā)酵管內(nèi)有氣泡，則輕輕甩動發(fā)酵管直至氣泡消失。 要嚴格按照培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基，防止雜菌污染。嚴格無菌操作，防止污染情況的發(fā)生。接種后，每一管外包一層無菌紙，以防污染。（“—”不生長，“+”生長較差 ， “++”生長一般，“+++”生長良好。否則繼續(xù)進行劃線分離，培養(yǎng)后再經(jīng)革蘭氏染色鏡檢直至得到純種桿菌后進行芽孢染色。取已稀釋成101土壤液，用無菌的移液器吸取1mL土壤懸液加入102的無菌水的試管