【正文】 GUCUG β珠蛋白內(nèi)元 1 GCAG GUUG ～～～～～～～ UCAGGCUG β珠蛋白內(nèi)元 2 CAGG GUGA ～～～～～～～ ACAGUCUC Igλ內(nèi)含子 1 UCAG GUCA ～～～～～～～ GCAGGGGC SV40病毒早期 T抗原 UAAG GUAA ～～～～～～～ UUAGAUUC 含有內(nèi)元的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物其拼接處的堿基順序 作為親核基團(tuán)向 Intron 539。用酵母做的實(shí)驗證明 :分支處的共同順序如果發(fā)生突變或缺失將使剪接不能進(jìn)行。 ? 人 U1snRNA的可能二級結(jié)構(gòu)如圖。 U1和U2可能參與剪接反應(yīng)的起始階段，因為 U1和 U2的滅活將阻止左側(cè)連接點(diǎn)的切斷和套索的形成。最大的是 U3，也不過 215核苷酸長。 ? 在第二階段，在受體位點(diǎn)處被切斷而將此套索狀的內(nèi)含子剪去 。 ? 在內(nèi)含子左側(cè)的連接點(diǎn)稱為供體 (donor)，在內(nèi)含子右側(cè)的稱為受體(acceptor)。 ? 某些線粒體中的內(nèi)含子也是自身剪接的內(nèi)含子。 ? 1978年 Altman從純化的 RNA酶 P中分離出一種多肽和一種RNA(M1RNA)。 五． RNA的剪接機(jī)制 1 酶母 tRNA的剪接 ? 酵母細(xì)胞核中 400個 tRNA基因中約有 40個是斷裂基因。 ? RNA和蛋白質(zhì)這兩個組分對 RNA酶 P的催化活性似乎都是必須的。 ? 加尾時間 ：轉(zhuǎn)錄后 ， 當(dāng) mRNA還未離開胞核時就加上去的 。而哺乳動物的 hnRNA平均有 800010000個堿基，其范圍很廣泛，從 202214000堿基均有，所以一般要比 mRNA大45倍。 ? mRNA在 5‘端有一個 ” 帽子 ” (5’Cap)， 3‘端含多聚腺苷酸 (polyA)序列 。 ? 組蛋白 mRNA， 呼腸弧病毒及一些植物病毒 mRNA上沒有 poly(A)。 tRNA前體的加工 RNA酶 D ? RNA酶 D，它能從 RNA的 3‘端一個一個地切去堿基，以產(chǎn)生 tRNA的真正的 3’端 (5‘端由RNA酶 P產(chǎn)生 )。這些基因均只有一個內(nèi)含子，位于與反密碼子的 339。最初的實(shí)驗結(jié)果表明，蛋白質(zhì)和 M1RNA單獨(dú)都沒有酶活性，但二者混合在一起又可恢復(fù)活性。 ? 一些常見的真菌，如粗糙脈孢菌 (Neurosporacrassa)，酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)等的線粒體內(nèi)含子都能進(jìn)行自身剪接，像四膜蟲中進(jìn)行的磷酸酯轉(zhuǎn)移反應(yīng)一樣 。在細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)基因 (即編碼多肽的基因 )中的所有內(nèi)含子在外顯子 內(nèi)含子連接處均有 GT． ..AG的共同順序。同時分離的右外顯子即與左外顯子相連接。它們和蛋白質(zhì)結(jié)合成 snRNPs。另外兩個 snRNAsns(U4和 U6)可能亦參與剪接作用，但它們的功能尚不詳。人 U1snRNP中除 RNA外還 8個蛋白質(zhì)分子。在這種剪接機(jī)構(gòu)中，有三個很短的共同順序，即供體和受體位點(diǎn)處于一個和套索分支處的一個序列。這些還是較短的共同順序，存在于幾乎所有的真核生物中。 ? 編碼細(xì)胞色素 b的 box基因在僅剪去內(nèi)含子 1時，會產(chǎn)生 RNA成熟酶的 mRNA。 ? 1983年 Altman證明，在較高濃度的 Mg2+存在下，單獨(dú)的M1RNA就可以催化 tRNA前體的成熟，而單獨(dú)的蛋白質(zhì)則沒有這種能力。 ? 不同氨基酸的 tRNA基因中的內(nèi)含子不相同，因此，剪接酶類看來并不能識別任何共同順序。以前認(rèn)為它亦 tRNA加工有關(guān)，但目前認(rèn)為它可能僅和 RNA的分解代謝有關(guān)。端降解 mRNA。 ? 原核細(xì)胞的 mRNA沒有加帽或加尾修飾 。由于它的大小很不一致，故稱 核內(nèi)不均一RNA(hnRNA)。 ? hnRNA的尾端要被切去一段，然后才加上 poly(A)。 ? 在 ，基因 rnpA編碼其