【正文】 磷酸骨架的斷裂 堿基置換（ AT?GC轉(zhuǎn)換、AT→TA 顛換、 GC→CG 顛換）及染色體畸變 吖啶類 個(gè)別堿基的插入或缺失 移碼突變 紫外線照射 形成嘧啶二聚體；形成嘧啶的水合物；DNA交聯(lián)； DNA斷裂 AT→GC 轉(zhuǎn)換、 AT→GC 顛換、 及移碼突變 電離輻射 脫氧核糖 堿基之間化學(xué)鍵及脫氧核糖 磷酸之間化學(xué)鍵的斷裂；通過(guò)自由基對(duì)DNA的作用 AT?GC轉(zhuǎn)換、移碼突變及染色體畸變 60 第三節(jié) 生物誘變劑 （轉(zhuǎn)座因子） ? 20世紀(jì) 80年代初，人們?cè)诓捎媚承┦删w來(lái)篩選抗噬菌體突變菌株時(shí)，發(fā)現(xiàn)常伴隨著出現(xiàn)抗生素產(chǎn)量明顯提高的抗性突變株。 作用機(jī)理 嘧啶二聚體、嘧啶水合物、交聯(lián)作用、 DNA鏈斷裂 ? 效應(yīng)： 移碼突變，堿基置換 51 紫外線誘發(fā)胸苷二聚體 O O U V O O H C H 3 H C H 3 H C H 3 C H 3 H N N N N O N H O N H O N H H N O T h y m i n e T h y m i n e T h y m i n e d i m e r O O 4 5 4 5 3 6 6 2 1 F i g . 2 1 P r o d u c t i o n o f t h y m i n e d i m e r b y u l t r a v i o l e t l i g h t i r r a d i a t i o n . 52 53 54 紫外誘變的注意事項(xiàng) ? 避免光復(fù)活作用，應(yīng)在紅光下操作，避光培養(yǎng)。凡接觸過(guò) NTG的器皿必須及時(shí)、單獨(dú)處理，例如用自來(lái)水大量沖洗或用 1—2mol/L的 NaOH或 2%的 Na2S2O3浸泡過(guò)夜，洗凈。 ? NTG有超誘變劑之稱，能使細(xì)胞發(fā)生一次或多次突變，誘變效果好，尤其適合于誘發(fā)營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株。這些位點(diǎn)引起堿基置換的僅占烷化作用的 10%左右。于 35— 37℃ 處理 5— 10min、加入 5倍的 酸氫二鈉溶液，使 pH下降到 。 ? 主要誘變劑 ： 5溴尿嘧啶（ 5BU） /T 2氨基嘌呤（ 2AP） /A ? 誘發(fā)的突變 ： AT GC的 轉(zhuǎn)換 。 ? 誘變劑種類： 化學(xué)誘變劑、物理誘變劑和生物誘變劑 4 第一節(jié) 化學(xué)誘變劑 ? 定義： 一類能對(duì) DNA起作用，改變 DNA結(jié)構(gòu)，并引起遺傳變異的化學(xué)物質(zhì)。稀釋分離于平板。 ? 堿基中容易發(fā)生烷化作用的是嘌呤類。 烷化劑名稱 理化特性 pH7水中半衰期 /h 分子量 狀態(tài) 水溶性 溶點(diǎn)或沸點(diǎn) 20℃ 30℃ 37℃ 甲基磺酸乙酯 (EMS) 無(wú)色液體 約 8% 沸點(diǎn)85~86℃/10mmHg 93 26 124 乙烯亞胺 (EI) 無(wú)色液體 易溶于水 沸點(diǎn) 56℃/760mmHg 4